Nükleer kromatin organizasyonundaki küçük değişiklikler sadece kötü huylu hücrelerde değil, aynı zamanda kötü huylu tümörü olan hastaların görünüşte ‘normal’ hücrelerinde de gösterilmiştir. Bu değişiklikler, “malignanlıkla ilişkili değişiklikler” veya MAC’ler olarak adlandırıldı.
Çekirdeklerin bilgisayarlı doku analizi kullanılarak güvenilir bir şekilde ölçülebilirler ve genellikle çıplak gözle görülemeyen nükleer özellikleri vurgularlar. Örneğin, servikal sitolojide, numune başına sadece 30 normal görünen hücrenin analizinde, orta veya şiddetli dislazili numunelerin% 70’inin tanımlanabildiği gösterilmiştir.
Bu, otomatik servikal tarama cihazlarındaki rollerini savunur ve mevcut sistemlerin çoğu, tanısal bir özellik olarak nükleer dokuyu kullanır. MAC’ler ayrıca kolon, mesane, göğüs ve akciğerde de gösterilmiştir. Görünüşe göre normal hücrelerdeki bu değişikliklerin hücrede birincil bir habis öncesi değişikliği mi işaret ettiği yoksa çevredeki hücrelerin tümörle ilişkili faktörlere maruz kalmasına bağlı ikincil değişiklikler mi olduğu açık değildir.
Bir tümörün çıkarılmasından sonra MAC’lerin ortaya çıkması, en azından bazı dokularda ikincisini akla getirir. Son çalışmalar, MAC’lerin akciğer kanseri taraması için potansiyel bir yöntem olarak kullanılabileceğini önermektedir.
Histolojik olarak normal akciğer biyopsilerinde MAC’lerin analizi, kanser hastalarının% 80’inden fazlasının doğru tanımlanmasına izin verdi. Ek olarak, hastaların akciğer kanseri taramasında balgam örneklerinden normal görünen hücrelerde dokusal bozuklukların tanımlanması savunulmuştur.
Doku Histolojisinde Otomasyon
Sitoloji preparatlarının otomatik analizi zorlu bir görevdir. Görüntülerin karmaşıklığından dolayı histolojik sahnelerin otomatik olarak yorumlanması ve analiz edilmesi daha da zor. Yakın zamana kadar, histolojik görüntülerin otomatik analizi, en basit uygulamalar dışında aşılmaz bir görev olarak görülüyordu.
Bununla birlikte, bilgisayar işlem gücündeki gelişmeler ve uzman sistem metodolojisinin kullanılmasıyla, karmaşık görüntüleme görevleri için makine görme sistemlerinin geliştirilmesi artık mümkündür. Bu, görüntüyü oluşturan bileşenlere ve bunların birbirleriyle ilişkilerine ilişkin bilginin tanımlanmasını gerektirir.
Bunlar bir bilgi dosyasında tanımlanır ve bir sahne bölümleme uzman sisteminin eylemlerini yönlendirmek için kullanılır. Nesneler, tanımlanan kantitatif kriterler temelinde histolojik bileşenler olarak kabul edilir veya reddedilir.
Reddedilen nesneler, tanımlanmalarını kolaylaştırmak için daha fazla görüntü işleme için seçilebilir. Tüm nesneler tanımlandıktan sonra, histolojik sahne yeniden oluşturulur ve ilgili histometrik özelliklerin ölçülmesine izin verilir. Bu metodoloji artık kolon, prostat ve göğüste başarıyla uygulanmıştır.
İmmünohistokimyasal bulgular
İmmünohistokimyasal bulgular negatif
Histokimyasal ve immunohistokimyasal boyalar
İmmünohistokimya işlem Basamakları
İmmünohistokimya PDF
İmmunohistokimya prosedürü
İmmünohistokimyasal yöntemler nelerdir
– tümörlerin araştırılması için kullanılan
Kantitatif İmmünohistokimya
Son 30 yılda tanısal patolojideki en büyük gelişmelerden biri, immünositokimyasal yöntemler kullanılarak proteinlerin mikroskobik görselleştirilmesidir. Bununla birlikte, boyama reaksiyonunun değerlendirilmesi, yalnızca immüno-pozitif hücrelerin sayısını değerlendirmek için değil, aynı zamanda etiketleme reaksiyonunun yoğunluğunu belirlemek için öznel kalır.
Çoğu görsel yaklaşım, belirli bir vaka için genel bir immüno-skor sağlamak için eklenen hem pozitif hücre yüzdesi hem de yoğunluk için sayısal bir skorlama sistemine dayanır. Bu iyi tanımlanmış yaklaşım bile, bir uzman tarafından oluşturulan skoru aynı doku örneğindeki başka bir uzmanla karşılaştırırken zayıf tekrarlanabilirlikten muzdariptir.
Bu nedenle, birçok cihaz üreticisi artık renkli dijital görüntülerden dansitometrik bilgilerin analizi yoluyla niceliksel immünohistokimyasal verileri çıkarabilen görüntü analiz ekipmanı pazarlamaktadır.
Birincil haberci molekül belirli bir renge sahip olduğundan, görüntüleme sisteminin bu rengi hücre preparatlarında belirleyebilmesi ve onu mevcut olabilecek herhangi bir karşıt boyadan ayırt edebilmesi önemlidir.
Kantitatif immünositokimyada standardizasyon ve kalite kontrol ile ilgili sorunlar da vardır ve tanımlanmış immünoreaktivitenin slayt üstü kontrollerinin kullanılması önerilir. Kantitatif immünohistokimyanın geliştirilmesindeki ana odak noktası, meme kanserinde östrojen ve progesteron reseptörlerinin ve HER2 / neu pozitifliğinin kantitatif değerlendirmesi olmuştur.
Otomasyon aynı zamanda, tanı, prognoz ve tedaviye yanıtın potansiyel immünositokimyasal biyobelirteçlerinin belirlenmesi için doku mikrodizilerinin hızlı verimli analizini amaçlayan birçok ticari sistemle birlikte ana itici güçtür.
Dijital Slayt
Dijital görüntülemedeki son gelişmeler artık tüm bir mikroskobik slaytı tarama ve dijital olarak kaydetme yeteneği sağlıyor. Bu, numunenin mikroskobik detayının muhafaza edilmesi için yüksek büyütmede gerçekleştirilebilir ve slayt, ekrandaki görüntü dijital olarak büyütülerek veya küçültülerek herhangi bir büyütmede görüntülenebilir.
Görüntünün tam boyutları, bunu birkaç yıl önce imkansız bir görev haline getirebilirdi. Şimdi, hızlı işleme ile, bu megapiksel görüntülerin hızlı gezinmesini ve incelenmesini sağlayan yazılım geliştirildi.
Bu, potansiyel olarak patoloji vakalarının cam slaytlar yerine dijital olarak merkezler arasında dağıtılmasına izin verir. Tüm slaytların taranması aynı zamanda makine görüsünü kullanarak doku ve hücre özelliklerinin otomatik analizini kolaylaştırır ve bu, doku mikrodizilerinin değerlendirilmesinde giderek daha önemli hale gelmektedir.
Tüm görüntülerin bu şekilde analizi hala hesaplama açısından zahmetlidir, ancak bu, çok sayıda slaydın otomatik olarak işlenmesi ile insan müdahalesi olmadan yapılabileceğinden, patolojik araştırma ve uygulamada otomatik analizi kolaylaştırmada büyük bir potansiyele sahiptir.
Sonuç
Patolojide ölçüm, konvansiyonel görsel yorumu açıkça geliştirir. Bununla birlikte, tekniklerin rutin uygulamaya dahil edilmesi yavaş olmuştur ve olmaya da devam etmektedir. Bir dizi faktör sorumludur, bunlardan en önemlisi, belirli teşhis problemlerinde ölçümün etkinliğini test etmek için büyük ölçekli klinik çalışmaların olmamasıdır.
Çoğu çalışma, yarı kontrollü koşullar altında nispeten az sayıda vaka üzerinde gerçekleştirilmiştir. Doku örneği ölçümünün klinik değerini ve maliyet etkinliğini gösteren büyük ölçekli çalışmalar yürütüldüğünde bile, çok az merkez bu yaklaşımları benimsemiştir.
Bu genellikle patologlara uygulanan mali ve zaman kısıtlamalarından kaynaklanır ve hasta örneklerinden sayısal veriler oluşturmak için gereken ek çabayı engeller. Rutin patolojide ölçüm sunan birkaç kurum (özellikle Hollanda ve ABD’de) bu ek hizmet için ücret almaktadır.
Bu ücret ya hastaya, sağlık sigortasına ya da sağlık hizmeti sağlayıcısına aktarılır ve ölçümler esas olarak teknik personel tarafından yapılır.
İlaç şirketlerinin geliştirdiği yeni belirteçlerin miktarını belirleme ihtiyacıyla birlikte ekipman üreticilerinin dürtüsü ve daha otomatik yaklaşımların getirilmesi, rutin tanısal patolojide ölçümün geleceğinde belirleyici konular olabilir.
Bu, patolojinin nasıl uygulanacağını önemli ölçüde etkileyebilir ve patoloğun tanılama yeteneğini tamamlayarak tanısal karar verme ve prognozda değerli objektif destek sağlar.