Spektroskopi yöntemleri

Mikroorganizmaların Mikroskobik Morfolojisi Asma-Bırak ve Islak-Montaj Hazırlıkları Artık mikrobiyolojide kullanılan bazı temel araç ve yöntemlere yöneldiğinize göre, mikroskop altında morfolojilerini incelemek için nasıl hazırlıklar yapacağımızı öğrenerek mikroorganizmalarla ilgili çalışmamıza başlayacağız. Canlı mikroorganizmaları incelemenin en basit yöntemi, onları bir sıvıda (su, tuzlu su veya et suyu) süspanse etmek ve bir "asılı damla" veya basit bir "ıslak montaj" hazırlamaktır. Asılı bir damla için slayt, içbükey bir kuyu ile öğütülür. merkezinde; kapak camında bir damla emekli maaşı bulunur. Kapak camı, sürgünün kuyusu üzerinde ters çevrildiğinde, damla, sürgünün oyuk içbükeyliği içinde camdan sarkar (şekil 3.1, adım 4). Böyle bir ıslak müstahzarın mikroskobik incelenmesi faydalı bilgiler sağlayabilir. Esas olarak, yöntem bir organizmanın hareketli olup olmadığını belirlemek için kullanılır, ancak aynı zamanda hücre gruplarının ve bireysel hücre şeklinin doğal modellerinin bozulmamış bir görünümüne de izin verir. Damla hızlı kurumadığı için asılı bırakma preparatları oldukça uzun bir süre gözlemlenebilir. Islak monteli preparatlar, öncelikle mikrobiyal hareketliliği hızlı bir şekilde tespit etmek için kullanılır. Sıvı film, asılı bırakılan preparatlardan daha incedir ve bu nedenle preparat, kapatıldığında bile daha hızlı kuruma eğilimindedir. Asılı damla, lekesiz mikroorganizmaları görüntülemek için klasik yöntem olmasına rağmen, ıslak montajın gerçekleştirilmesi daha kolaydır ve genellikle yeterli bilgi sağlar. Mikroorganizmaların Sınıflandırılması Bakterilerin mikroskobik Morfolojileri Mikrobiyoloji bakteriler pdf Basil bakteri Bakterilerin sınıflandırılması Mikrobiyoloji Bakteri nedir Şekillerine göre bakteriler Bakterilerin genel özellikleri Mikrobiyoloji Sarkık Damla Hazırlama Bakterileri asılı bir damlada gözlemlemek, morfolojilerini incelemek ve hareketliliklerini belirlemek için; Hafif bir maya hücresi süspansiyonu ile karıştırılmış Proteus vulgaris'in 24 saatlik et suyu kültürü Hafif bir maya hücresi süspansiyonu ile karıştırılmış Staphylococcus epidermidis'in 24 saatlik et suyu kültürü 2 oyuk öğütülmüş slayt Birkaç kapak camı Tel aşılama döngüsü Bunsen brülörü veya bakteri yakma fırını Çin işaretleme kalemi veya kalıcı işaretleme kalemi vazelin Prosedürler 1. Bir kapak camı alın ve yağdan arındırılmış olduğundan emin olarak iyice temizleyin (üzerine konulacak damla yağlı yüzeyden sarkmayacaktır). Alkole batırılabilir ve kağıt mendille cilalanabilir veya sabun ve suyla yıkanabilir, tamamen durulanabilir ve silinebilir. 2. İçi boş bir slayt alın ve kuyuyu bir parça kuru mendille temizleyin. Slayt üzerindeki içbükey kuyucuğun etrafına (içinde değil) ince bir petrol jeli filmi yerleştirin (şekil 3.1, adım 1). 3. Proteus broth kültürünü eşit şekilde süspansiyon haline gelene kadar yavaşça sallayın. İyi bir aseptik teknik kullanarak, tel halkayı sterilize edin, tüpün kapağını çıkarın ve bir öze dolusu kültür alın. Et suyuna koymadan önce özenin oda sıcaklığına kadar soğuduğundan emin olun, aksi takdirde et suyunun "sıçramasına" ve tehlikeli bir aerosol oluşturmasına neden olabilir. Tüpü kapatın ve rafa geri koyun. 4. Kültür halkasını şekil 3.1, 2. adımda olduğu gibi kapak camının ortasına yerleştirin (etrafına yaymayın). Döngüyü sterilize edin ve yere koyun. 5. İçi boş zemin sürgüsünü, kuyu aşağıda olacak şekilde kapak camının üzerinde tutun (şekil 3.1, adım 3), ardından vazelin kapak camına yapışması için hafifçe bastırın. Şimdi slaytı ters çevirin.Kuyuya sarkan kültür damlası ile sızdırmaz ıslak bir altlığa sahip olmalısınız (şekil 3.1, adım 4). 6. Slaydı mikroskop aşamasına yerleştirin, camı kapatın. Odağı bulmak için sınavınıza düşük güçlü hedefle başlayın. İlk olarak damlanın koyu bir çizgi olarak görünecek olan bir kenarına odaklanmak yararlıdır. İris diyaframı ile ışık azaltılmalı ve gerekirse kondansatör alçaltılmalı. Süspansiyondaki maya hücrelerine kolayca odaklanabilmelisiniz. Odaklanma konusunda sorun yaşıyorsanız eğitmenden yardım isteyin. 7. Yüksek kuru ve yağa daldırma hedefleriyle incelemenize devam edin (sonuncuyla kapak camını kırmamaya çok dikkat edin). Maya hücreleri daha büyük boyutlarından dolayı belirgin olsa da, bakteri hücrelerini gözlemlemek için etraflarına bakın. 8. Az önce tarif edilen aynı prosedürleri izleyerek Staphylococcus kültürünün asılı bırakılarak hazırlanmasını sağlayın. 9. İki bakteriyel organizmanın boyutu, şekli, hücre grupları ve hareketliliği hakkındaki gözlemlerinizi, maya hücreleri. 10. Slaytlarınızı dezenfektan solüsyonlu bir kaba atın. Not: Bakterilerin gerçek ve bağımsız hareketliliği, onların kamçıya sahip olmalarına bağlıdır. Eğer bu şekilde donatılmışlarsa, ilerici, yönlü hareketle (genellikle oldukça hızlı) kendilerini ilerletebilirler. Bu tür bir aktif hareket, bir akışkan içinde asılı duran organizmaların veya diğer parçacıkların titreşim hareketinden ayırt edilmelidir. İkinci hareket türü Brown hareketi olarak adlandırılır ve sıvıdaki moleküllerin sürekli, hızlı salınımından kaynaklanır. Bakteriler de dahil olmak üzere her türden küçük parçacıklar (hareketli olsun ya da olmasın), sıvı moleküllerinin titreşimi tarafından sürekli olarak bombardımana tutulur ve bu nedenle yukarı ve aşağı, ileri geri sallanır. Bu tür bir hareket düzensizdir ve yönsüzdür ve hareketsiz organizmaların çevrelerindeki diğer nesnelere göre konum değiştirmelerine neden olmaz. Bir sıvıdaki akımların neden olduğu hareketi gerçek hareketlilikle karıştırmamaya dikkat etmelisiniz. Islak bir kundak iyi kapatılmamışsa veya kabarcıklar içeriyorsa, hava akımları reaksiyona giren sıvı akımları oluşturur ve bir gelgit boyunca akan organizmaları görürsünüz. Sonuçlar 1. Her organizmanın şeklini ve gruplandırmasını göstermek için aşağıdaki dairelerde çizimler yapın. Hareketli olup olmadığını dairenin altında belirtin. Boyutları, maya hücrelerinin boyutlarıyla nasıl karşılaştırılır? 2. Aşağıdaki sol dairede, gerçek hareketliliğe sahip tek bir bakterinin yolunu çizin. Sağdaki daireye, tek bir hareketli olmayan bakterinin yolunu çizin. Islak Montaj Hazırlama Bakterileri basit bir ıslak zeminde gözlemlemek ve hareketliliklerini belirlemek Hafif bir maya hücresi süspansiyonu ile karıştırılmış Proteus vulgaris'in 24 saatlik et suyu kültürü Hafif bir maya hücresi süspansiyonu ile karıştırılmış Staphylococcus epidermidis'in 24 saatlik broth kültürü 2 mikroskop lamı Birkaç kapak camı Kılcal pipetler ve pipet ampulleri Çin işaretleme kalemi veya kalıcı işaretleme kalemi Oje temizle (isteğe bağlı)