Mayalar ve Küfler – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Deneyde, Escherichia coli bakterisi için bir bakteriyofaj litik olan kolifaj T2’yi inceleyeceğiz.
Amaç
Bir kolifajın titresini plak tahlil yöntemi ile belirlemek için,
Malzemeler
Escherichia coli suşu B’nin gecelik et suyu kültürü
Kolifaj T2 (et suyunda 1: 100 süspansiyon)
4,5 ml triptik soya suyu içeren test tüpleri
2,5 ml yumuşak triptik soya agarı (% 0,7) içeren test tüpleri
Oda sıcaklığında triptik soya agarı plakaları
Steril 1.0- ve 5.0-ml pipetler
Pipet ampulü veya diğer pipetleme cihazı
Prosedürler
1. Yumuşak agar tüplerini eritin ve 50 ° C su banyosuna koyun.
2. 4,5 ml triptik soya suyu içeren 8 tüplü bir raf hazırlayın. Tüplerin her birini şu şekilde etiketleyin: 10 3, 10 4,
10 5, 10 6, 10 7, 10 8, 10 9 ve “Kontrol edin.”
3. 8 yumuşak agar tüpünü ve 8 triptik soya agar plakasını yukarıdaki sırayla 10 4 ile başlayıp 10 10 ile biten şekilde etiketleyin ve
bir kontrol edin.
4. 1,0 ml’lik bir pipetle 0,5 ml 1: 100 kolifaj süspansiyonunu çıkarın ve triptik soya suyu tüpüne koyun. Etiketli 10 3. Pipeti atın.
5. Yeni bir pipetle, birkaç kez yukarı ve aşağı pipetleyerek, 10 3 etiketli tüpteki süspansiyonu karıştırın (bir ampul veya
diğer pipetleme cihazı). Bu tüpten 0,5 ml alın ve 104 etiketli broth tüpüne aktarın. Pipeti atın.
6. Kolifajı 104 etiketli tüpten 105 etiketli tüpe aktararak 5. adımı tekrarlayın ve bu şekilde 0,5 ml faja kadar devam edin.
10 8 etiketli tüpten 10 9 etiketli tüpe aktarılmıştır.
7. Yeni bir pipetle, 10 9 etiketli tüpün içeriğini karıştırın ve ardından bu tüpten 0,5 ml’yi bir kap içine atın. Tüp etiketli kontrole herhangi bir kolifaj eklemeyin.
8. 5.0 ml’lik bir pipet kullanarak, gece boyunca 0.5 ml E. coli kültürünü aşağıdakiler de dahil olmak üzere erimiş yumuşak agar tüplerinin her birine aktarın.
kontrol tüpü. Bakteriyel aşıyı ekledikten sonra, her bir tüpü 50 ° C su banyosuna geri koyun, ancak hızlı bir şekilde sonraki adımları izleyin.
9. Ardından, sonraki prosedür, bir iş ortağınızla çalışmanızı daha kolay gerçekleştirecektir. “Kontrol” etiketli tüpten (kolifaj dilüsyonları serisinde), “Kontrol” etiketli yumuşak agar tüpüne 0,1mlofthetrypticsoybroth transfer edin. Pipeti yerleştirmeden veya herhangi bir yüzeye dokunmadan, tüpü partnerinize verin. Partneriniz, tüpü avuç içleri arasında yuvarlayarak ve ardından yumuşak agarı “Kontrol” etiketli triptik soya agar plakasının yüzeyine yerleştirerek içeriği karıştırmalıdır. Plak daha sonra döndürülmeli ve yumuşak agar yayılacak şekilde eğilmelidir. Daha sıkı agar plakasının yüzeyi boyunca eşit olarak yumuşak agar sertleşene kadar plağı bir kenara koyun.
10. Adım 9’daki ile aynı 1.0 ml’lik pipeti kullanarak, 0.1 ml kolifaj süspansiyonunu 10 9 etiketli triptik soya suyu tüpünden çıkarın ve 10 10 etiketli yumuşak agar tüpüne aktarın. Et suyu ve yumuşak agar tüplerindeki etiketlerin aynı olmadığını (ancak her ikisinin de doğru olduğunu) unutmayın. Tüpü, içeriği dikkatlice 10 10 etiketli agar plakasının üzerine yerleştirecek olan partnerinize verin.
Maya ve küf arasındaki fark
Mayalar
Küflerin genel özellikleri
Mayaların genel özellikleri
Mayaların özellikleri
Gıdalarda mayalar
Peynirde maya küf
Maya Nedir Mikrobiyoloji
11. Her kolifaj dilüsyonundan 0.1 ml’yi bir sonraki yüksek dilüsyon ile etiketlenmiş yumuşak agar tüpüne aktararak 10. adımı tekrarlamaya devam edin, 10 etiketli yumuşak agar tüpündeki 103 dilüsyon ile sona erene kadar 4. bir yüzeye dokunarak kontamine ettiğinizi düşünmediğiniz sürece aynı pipeti kullanın. Her durumda, partneriniz yumuşak agar tüpünün içeriğini karşılık gelen triptik soya agar plakasının üzerine katmanlamalıdır.
12. Tüm plaklar sertleştikten sonra, bir sonraki oturuma kadar bunları 37 ° C’de inkübe edin.
13. Plakları, E. coli suşu üzerindeki kolifajın litik aktivitesinin kanıtı açısından inceleyin. Temiz bir alan veya “plak”, bir bakteri hücresine bağlanan ve giren bir viral partikülün, hücreyi parçaladığı ve bitişiğindeki istila ettiği her noktada görünür.
14. Plakları gösteren plakları, eşit bir bakteri büyümesi “çimenliği” göstermesi gereken kontrol plağıyla karşılaştırın.
15. Plak sayısının 30 ile 300 arasında olduğu bir tabak seçin ve sayın. Orijinali hesapla aşağıdaki formül kullanılarak kolifajın konsantrasyonu (plak oluşturan birimler veya PFU) ve PFU / ml orijinal süspansiyon sayısı plak 1 / plaka dilüsyonuna bakın.
16. Sonuçlarınızı kaydedin ve diğer grupların sonuçlarıyla karşılaştırın.
Sorular
1. Mikoplazmalar nedir? Nasıl tanımlanırlar?
2. Mikoplazmalar ışık mikroskobu ile incelenebilir mi? Varsa ne tür hazırlıklar yapılıyor?
3. Bakteri hücre duvarının işlevleri nelerdir? Yokluğu bakterilerin davranışını nasıl etkiler?
4. Mikoplazmalar diğer bakterilerden nasıl farklıdır?
5. Virüsler diğer mikroorganizmalardan nasıl farklıdır?
6. Rickettsiae nasıl bulaşır?
7. Önemli klamidyal hastalıkları adlandırın.
8. Virüsler laboratuvarda nasıl tanımlanır?
9. Arbovirüs nedir?
10. Lizojenik bakteriyofaj nedir? Bazı hastalıklarda neden önemlidir?
11. Hücre kültürünü tanımlayın.
12. Elektron mikroskobunun ışık mikroskobundan farkı nedir? Prensiplerini açıklayın.
13. Bir prionun kısa bir tanımını girin.
14. Prionların neden olduğu üç insan hastalığını adlandırın.
15. Prion hastalıkları neden yavaş viral enfeksiyonlar olarak adlandırılır?
16. Aşağıdaki tabloyu doldurun.
Mantarlar: Mayalar ve Küfler
Tıbbi mikoloji, topluca mantarlar (tekil, mantar) olarak adlandırılan patojenik mayalar ve küflerin incelenmesi ve tanımlanmasıyla ilgilenir. Bir dizi önemli mikotik hastalığa aşina olmanız gerekir.
Mayalar, tomurcuklanarak, yani yavru hücreleri oluşturup sıkıştırarak çoğalan tek hücreli mantarlardır. Maya hücreleri, bakteri hücrelerinden çok daha büyüktür (yaklaşık beş ila sekiz kat). En iyi bilinen (ve en kullanışlı) tür ekmek yapımında ve şarap ve bira üretiminde kullanılan fermantasyonlarda kullanılan “fırıncı mayası” Saccharomyces cerevisiae’dir.
Küfler çok hücreli, daha yüksek mantar formlarıdır. Miselyum adı verilen bir matta bolca örülmüş hif adı verilen filamentlerden oluşurlar. Üreme için özel yapılar, hiflerden ortaya çıkar ve her biri yeni mantar büyümesi oluşturmak için filizlenebilen conidia (sporlar olarak da adlandırılır) üretir.
Bir küfün gözle görülür büyümesi genellikle bulanık bir görünüme sahiptir, çünkü miselyum vejetatif büyüme tabanından yukarı doğru uzanır ve konidia taşıyan özel hifleri havaya iter.
Bunu küflü ekmek veya diğer yiyeceklerde sık sık gördünüz ve muhtemelen farklı küflerin konidiyal pigmentlerinden dolayı renklerinin (siyah, yeşil, sarı) değiştiğini de fark etmişsinizdir.
Doğada bulunan binlerce maya ve küf türünün çoğu saprofitiktir ve hastalığa neden olamaz. Aslında, çoğu belirli gıdaların (peynirler gibi) işlenmesinde ve bir antimikrobiyal madde kaynağı olarak son derece faydalıdır. Örneğin penisilin notatum, penisilin üreten küftür.
Gıdalarda mayalar Küflerin genel özellikleri Maya Nedir Mikrobiyoloji Maya ve küf arasındaki fark Mayalar Mayaların genel özellikleri Mayaların özellikleri Peynirde maya küf