Kobay eritrositlerinin hücre tek tabakasına yapışması, pozitif bir test olarak kabul edilir. İnfluenza ve parainfluenza virüsleri en sık izole edilen hem adsorbe edici virüslerdir, ancak kabakulak virüsü de pozitif reaksiyon verir.
Çok sayıda farklı hücre kültürü çizgisinin mevcudiyetine rağmen, klinik açıdan önemli bir dizi virüs, bu geleneksel yöntemler kullanılarak büyütülemez. Epstein-Barr virüsü (bulaşıcı mononükleozun nedeni) ve insan immün yetmezlik virüsü (AIDS’in nedeni), büyüme için insan beyaz kan hücrelerine ihtiyaç duyar.
Bazı coxsackie A virüsleri, kuduz virüsü ve arbovirüsler gibi diğer virüsler en iyi farelerde izole edilir. Bu prosedürlerin oldukça uzmanlaşmış doğası nedeniyle, bu tür yöntemler genellikle sadece referans laboratuarlarında gerçekleştirilir.
Ek olarak, bazı virüsler (örn., Hepatit virüsleri ve rotavirüs) hiçbir şekilde yetiştirilemez. Bu viral enfeksiyonların teşhisi için elektron mikroskobu, antijen tespit testleri veya seroloji gibi alternatif prosedürler kullanılır.
Doğrudan Numune Testleri
Viral antijenleri saptamak için immünofloresans ve enzim immünolojik testi gibi immünolojik testler kullanılır ve viral nükleik asitleri doğrudan hasta örneklerinde saptamak için nükleik asit amplifikasyon teknikleri kullanılır.
Solunum sinsityal virüsü, herpes simpleks virüsü, grip A ve B virüsleri, rotavirüs ve adenovirüs dahil olmak üzere bir dizi farklı virüs için antijen tespit testleri mevcuttur. Şu anda, nükleik asit amplifikasyonu insan papilloma virüsünün saptanmasıyla sınırlıdır, ancak HIV gibi virüslerin kan seviyelerini ölçmek için deneyler mevcuttur.
Viral ürünler tespit edilirse, enfeksiyonun laboratuvarda teşhisi konur ve viral kültür yapma ihtiyacı ortadan kalkar. Sonuçlar genellikle 10 ila 60 dakika içinde alınır.
Reddedilmiş numune ne demek
Hemolizli numune ne demek
Kanda pıhtılı numune ne demek
Uygunsuz numune ne demek
Laboratuvar Numune Alma
Laboratuvar numune kabul KRİTERLERİ
Numune türleri
Reddedilen laboratuvar tetkikleri ne demek
Sitohistolojik İnceleme
Viral tanı için kullanılan en eski kültür dışı laboratuvar yöntemi, enfekte insan hücreleri ve dokularındaki karakteristik değişiklikleri taramaktı. Hücre yaymalarının veya özel doku lekeleriyle boyanmış doku bölümlerinin incelenmesi, viral replikasyonun “ayak izlerini” temsil eden ve belirli viral enfeksiyonları düşündüren karakteristik viral inklüzyon cisimcikleri ortaya çıkarabilir.
Bununla birlikte, böyle bir yaklaşımın tanısal değeri sınırlıdır çünkü diğer mevcut yöntemlerle karşılaştırıldığında duyarlılık düşüktür (% 50 ila 70). Bu yöntemin başlıca uygulaması, molluscum contagiosum (genital siğillerin nedeni) gibi kültürlenemeyen virüslerin neden olduğu enfeksiyonların teşhisi içindir. Bununla birlikte, bu virüsleri klinik örneklerde tespit etmek için artık ticari olarak bir gen amplifikasyon yöntemi mevcuttur.
Elektron Mikroskobu
Elektron mikroskobu, viral morfoloji ve boyut çalışması için güçlü bir araçtır, ancak çoğu teşhis laboratuarında sınırlı bulunur. Direkt elektron mikroskobu ayrıca yüksek titrelerde (ml başına 107) viral partikül içeren numuneler gerektirir.
Elektron mikroskobunun başlıca tanısal uygulaması, belirli kültürlenemeyen virüslerin, özellikle gastroenterite neden olanların (örn. Kalisivirüsler, astrovirüsler ve rotavirüs) saptanması içindir.
Seroloji
Hastanın antikorlarını tanımlamaya yönelik serolojik testler, Egzersiz 33’te daha ayrıntılı olarak açıklanmaktadır. Bununla birlikte, birçok viral enfeksiyonun teşhisi için çeşitli serolojik testler mevcuttur.
Bunlar, antikor titresinde önemli bir değişikliği saptamak için iki serum örneğinin (akut ve iyileşme serumları en az 2-4 hafta aralıklarla) incelenmesini içerir. Seroloji, çeşitli hepatit virüslerinin neden olduğu enfeksiyonların teşhisinde son derece faydalıdır.
Prionlar
Prion, proteinli bulaşıcı partiküller için kısa bir terimdir. Boyutları virüslerden daha küçüktür ve ne DNA ne de RNA içerdiğine inanılmaktadır. Prionlar, süngerimsi ensefalopatiler olarak bilinen yavaş nörodejeneratif hastalıklara neden olur.
Ajana maruziyetten 20 ila 30 yıl sonra hastada enfeksiyon semptomları gelişmeden önce geçebileceğinden, yavaş viral enfeksiyonlar olarak sınıflandırılırlar. Creutzfeldt-Jakob hastalığı ve kuru, insan prion hastalığının örnekleridir.
Son yıllarda, prionlar, Büyük Britanya ve diğer bazı Avrupa ülkelerinde “deli dana hastalığı” olarak da bilinen sığır spongiform ensefalopati salgını nedeniyle uluslararası bilimsel ve kamuoyunun dikkatini çekmiştir.
Deli dana hastalığı, öncelikle sığır ve koyunlarda enfeksiyona neden olur, ancak insan enfeksiyonları, enfekte hayvan eti yemekten kaynaklanabilir. Prionlar, tahribata karşı oldukça dirençlidir ve enfekte hayvan ürünlerinin iyice pişirilmesiyle etkisiz hale getirilmez. Prionların neden olduğu hastalıklar için hiçbir tedavi mevcut değildir ve hastalıklar evrensel olarak ölümcüldür ve ölüm genellikle semptomatik hastalığın başlangıcından sonraki bir yıl içinde meydana gelir.
Prion enfeksiyonunun teşhisi sorunludur. Şu anda, tanı koymak için klinik laboratuar yöntemi yoktur.
Bunun yerine tanı, beyin dokusunun histolojik bölümlerinde, genellikle ölümden sonra karakteristik süngerimsi değişiklikler (süngerimsi delikler) gösterilerek doğrulanan klinik şüpheye dayanır. Son kanıtlar, bu süngerimsi değişikliklerin daha kolay erişilebilir tonsil dokusunda da görülebileceğini göstermektedir.
Bir Bakteriyel Virüsün Titresini Belirleme (Bakteriyofaj)
Öğrendiğimiz gibi, virüsler, insan veya bakteri canlı hücrelerin içi dışında çoğalamazlar. Diğer virüsler gibi, bakterileri (bakteriyofajlar) avlayanlar da konakçı hücre duvarına bağlanır ve kendilerini hücreye yerleştirir.
Orada iki olaydan biri gerçekleşebilir. Birincisinde, viral nükleik asit hücrenin metabolik mekanizmasını devralır ve onu yeni viral partiküller üretmeye yönlendirir. Sonuç, enfeksiyona uğramak üzere temas eden bakteri hücrelerini arayan birçok yeni viryonun salınmasıyla bakterinin nihai ölümü ve parçalanmasıdır (kopması).
Bu süreç litik döngü olarak bilinir. Lizojen olarak bilinen ikinci olayda, viral nükleik asit konakçı hücre kromozomuna entegre olur ve her seferinde onunla çoğalır. Lizojenik bakteriyofaj, bazı işlemler uyanmasına ve litik döngüyü başlatmasına neden olana kadar konakçı hücreye zarar vermez.
Difteri basili gibi birçok insan patojeni, DNA’sı insan konakçıya zararlı toksinlerin sentezini yöneten virüsler tarafından lizojenize edilir.
Bu deneyde, Escherichia coli bakterisi için bir bakteriyofaj litik olan kolifaj T2’yi inceleyeceğiz.
Amaç
Bir kolifajın titresini plak tahlil yöntemi ile belirlemek için
Malzemeler
Escherichia coli suşu B’nin gecelik et suyu kültürü
Kolifaj T2 (et suyunda 1: 100 süspansiyon)
4,5 ml triptik soya suyu içeren test tüpleri
2,5 ml yumuşak triptik soya agarı (% 0,7) içeren test tüpleri
Oda sıcaklığında triptik soya agarı plakaları
Steril 1.0- ve 5.0-ml pipetler
Pipet ampulü veya diğer pipetleme cihazı