Kromatografik Tutmayı Etkileyen Parametreler – Biyokimya ve Moleküler Biyolojide Laboratuvar Teknikleri – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Çözünen molekül çözücü içinde çözüldüğünde, negatif bir serbest enerji değişimi üreten iki etkileşim mümkündür, bunlar Van der Waals ve elektrostatik etkileşimlerdir.
Van der Waals etkileşimleriyle ilişkili enerji yaklaşık olarak çözünen maddenin moleküler yüzey alanıyla orantılıdır. elektrostatik kuvvetler çözücünün dielektrik sabitine ve çözünen moleküllerin dipol momentine bağlıdır.
Hidrokarbonlu bağlı fazın bir ligandına çözünen bağlanmanın birleşme süreci benzer bir şekilde değerlendirilebilir; diğer bir deyişle, yukarıda açıklanan işlemlerin her biri ile ilişkili bireysel enerjiler, çözücü etkisiyle ilişkili serbest enerji değişikliğini sağlamak için toplanır.
Gaz fazındaki türlerin her birinin etkileşimi biliniyorsa, ters faz kromatografisinde esas olarak Van der Waals kuvvetleri olacaksa, ilişkilendirme sürecinin toplam serbest enerji değişimi değerlendirilebilir.
Bu nedenle, bir çözünen maddenin sabit faza bağlanması, esas olarak, çözücünün kompleks oluşumu üzerine çözücüye maruz kalan moleküler yüzey alanındaki azalma ile kolaylaştırılan birleşme ile çözücü etkilerinden kaynaklanırken, çözücü ile çekici etkileşimler bu etkileşimlere karşı çıkmaktadır. Tutulmayı belirleyen çözünen madde ile hidrokarbonlu ligand arasındaki polar olmayan etkileşim, bu iki etki arasındaki bir farktan kaynaklanır.
Ters fazlı kromatografide tutulmayı hesaba katmak için birkaç başka model önerilmiştir; bu ikisinin bir kısmı bir dereceye kadar popülerlik bulmuş ve “moleküler bağlantı” ve “etkileşim indeksleri” kavramlarını içermektedir. Moleküler bağlantı indeksinin değerinin, kapasite oranı ve suda çözünen maddenin çözünürlüğü ile orantılı olduğu gösterilmiştir.
Etkileşim indeksi, Snyder’in polarite indeksi P’ye biraz benzer, ancak polar bileşiklerle önemli farklılıklar gözlemlenebilir. Etkileşim indeksi, çözünen madde ve mobil faz arasındaki etkileşimleri tanımlar ve model, kapasite oranının logu ile elüentteki organik çözücünün hacim fraksiyonu arasında ikinci dereceden bir ilişki olduğunu gösterir.
Bu modelin bir sonucu, kapasite oranının düzeltilmiş logu arasında doğrusal bir ilişki olmasıdır; günlük k * = (I k ’- log $) / V ve 9’un faz oranı ve V’nin çözücünün molar hacmi olduğu etkileşim indeksi vardır.
Spesifik bir çözünen maddenin tutulması, bu nedenle çözünen maddenin etkileşim indeksinden ve solventin spesifik fiziksel parametrelerinden tahmin edilebilir. Bu model, hem ikili hem de üçlü çözücü sistemlerinde çözünen maddelerin tutulma davranışını doğru bir şekilde belirlemek için kullanılmıştır.
Adsorpsiyon kromatografisi
Kromatografik yöntemler
Kolon kromatografisi nedir
Kromatografik analizler
Kromatografi nedir
Kromatografi Çeşitleri
Rf değerini etkileyen faktörler nelerdir
İnce tabaka kromatografisi
Sabit Faz Etkileri
Solvofobik teorinin çözünen maddelerin tutma davranışına uygulanması, kromatografik davranışı belirleyen fizikokimyasal parametrelerin çok daha net anlaşılmasını sağlamıştır. Bununla birlikte, solvofobik teorinin, bu yapının doğası tanımsız kalmasına rağmen idealleştirilmiş bir durağan faza dayandığı vurgulanmalıdır.
Solvofobik teoride yapılan varsayımlar, bir dizi farklı açıklamanın önerildiği bir dizi kromatografik sistemde düzensiz kromatografik davranışta yansıtılır.
Anormal davranışların çoğu, durağan fazın yüzeyindeki serbest silanol grupları ile çözünen etkileşimlere atfedilebilir ve silanofilik etkileşimleri düzelten ikili bir tutma modeli sağlamak için temel solvofobik teoride bir değişiklik ile de sonuçlanmıştır.
Bu tür etkileşimler, sudaki bir artışla maskelenebilir. Mobil fazın konsantrasyonu veya bir tampon bileşeni olabilen uygun bir aminin dahil edilmesi. Tersine, pürinleri ve pirimidinleri ayırırken hareketli fazın metanol konsantrasyonundaki bir artışın, muhtemelen bağlı fazın alkil zincirlerinin yüzey alanını artırarak ve böylece hidrofilik etkileşimleri teşvik ederek karışık bir tutma mekanizmasını geliştirdiği de gösterilmiştir.
Alternatif olarak metanol, özellikle düşük yüzey kaplamalı kolonlarda silanofilik etkileşimler için çözünen maddelerle rekabet edebilir. Metanol içeriğindeki artış ayrıca çözünen maddelerin çözülmüş durumunda bir değişikliğe neden olabilir ve böylece tutma davranışını da değiştirebilir.
Silanol-çözünen etkileşimlerini azaltma stratejisi, piklerin artmasını önleyerek hem kromatografik davranışı hem de pik şeklini iyileştirebilir. Alternatif olarak, silanofilik etkileşimler, serbest silanol gruplarının dodesiltrimetilamonyum klorür ile maskelenmesinin bazı sentetik peptitlerin çözünürlüğünü azalttığı görülebileceği gibi kromatografik seçiciliği de artırabilir.
Solvofobik ve silanofilik etkileşimlere ek olarak, sterik tanıma ve çözünenler ile durağan faz arasındaki pi-pi etkileşimleri dahil olmak üzere diğer durağan faz etkileri de gösterilmiştir.
Bu nedenle, durağan fazın ve çözünen maddelerin özel doğası, etkileşim derecesini etkiler; örneğin, düzlemsel çözünenlerin tercihen düzlemsel bir yapı, genişletilmiş oktadesil grupları veya büyük aromatik halkalar oluşturan sabit fazlarda tutulduğu da gösterilmiştir.
Kromatografik Tutmayı Etkileyen Parametreler
Organik Değiştiriciler
Solvofobik teorinin önemi, ters faz kromatografisinde çözünen maddelerin tutma özelliklerini tahmin edebilmesidir. Bu, organik modifiye edicilerin mobil fazdaki çözünen maddelerin tutma davranışı üzerindeki etkileri ile açıkça da gösterilebilir.
Genel olarak saf su, saf asetonitril veya saf metanol ile değiştirildiğinde, çözünen maddelerin kapasite faktörlerinde doğrusal bir düşüş gözlenir. Bu davranışın açıklaması, çözücü etkisini oluşturan bireysel serbest enerji terimlerinin gözlemlenen “log k” ile birlikte ayrı ayrı gösterildiği de gösterilmektedir.
Van der Waals terimi AGEw / R .T en büyük tek terimi temsil eder, ancak bu, çözücü In (R.T / PV) ve elektrostatiktermAGZ ‘/ R’T’nin serbest hacim terimi ile birlikte, yalnızca log k’da küçük değişikliklere neden olur. Bu nedenle, çözücü etkisini etkileyen ana terimin “AG: / R” olduğu açıktır. T, boşluk oluşumundan dolayı enerjideki değişimi de temsil eder.
Bu nedenle, asetonitril konsantrasyonu arttıkça, bir çözücü molekülü için bir boşluk oluşturmak için gereken enerji azalır ve bir çözünen maddenin çözelti içine hareket etme eğilimi azalır, böylece kapasite faktörü de azalır.
Artan organik modifiye edici konsantrasyonu ile kavite oluşumunun serbest enerjisindeki değişime büyük ölçüde yüzey gerilimi hakimdir ve bu nedenle, yaygın olarak kullanılan tüm organik değiştiricilerin yüzey gerilimi, suyun aşırı yüksek yüzey geriliminden çok daha az olduğundan, organik değiştirici konsantrasyonu, kapasite faktöründe mutlaka bir azalmaya da neden olacaktır.
Adsorpsiyon kromatografisi İnce tabaka Kromatografisi Kolon kromatografisi nedir Kromatografi Çeşitleri Kromatografi nedir Kromatografik analizler Kromatografik yöntemler Rf değerini etkileyen faktörler nelerdir