Hem ganglion hücreleri hem de sinir lifleri, hızlı asetil kolinesteraz yöntemi kullanılarak gösterilebilen kolinesteraz içerir. Hirschsprung’un tanımlanması normalde ilk teşhisi doğrulamak için ve daha sonra anormal bağırsak çıkarılmadan önce rezeksiyon sınırlarının belirlenmesi gerektiğinde düzeltici cerrahi sırasında gereklidir.
Bu ameliyat sırasında küçük rektal emme biyopsileri kullanılarak yapıldığından hız önemlidir. Kriyostat H & E ile boyanmış kesitler genellikle büyük gangliyon hücrelerinin yokluğunu veya varlığını saptamak için yeterlidir, ancak lamina propriadaki anormal sinir liflerini göstermek için asetil kolinesteraz yöntemi kullanıldığı için atılmayan yüzeysel biyopsilerdir.
Aynı yöntem, çizgili kas biyopsilerinde motor uç plak anormalliklerini göstermek için kullanılabilir.
Gastrointestinal Doku
Malabsorbsiyondan şüphelenilen gastrointestinal biyopsilerde kesin bir tanıya ulaşmak için tek başına morfolojik bilgi yetersizdir. Villinin fırça kenarındaki çeşitli enzimler faydalıdır, ancak disakkaridazlar, laktaz, trehalaz ve sükraz özellikle önemlidir.
Bu enzimler, enterosit hasarındaki değişiklikleri yansıtır; laktaz en duyarlıdır, oysa sükraz en dirençlidir ve bu nedenle bu iki diasakaridaz için histokimyasal boyama yararlıdır. Bu yöntemler aynı zamanda birincil laktaz veya sükraz eksikliklerini saptamak için de kullanılabilir, ancak klinik olarak bu disakkaritlerin biyokimyasal analizi genellikle histokimyasal tanımlamadan daha önemlidir.
Enterositlerin lizozomlarında ve lamina propriadaki makrofajlarda bulunan asit fosfataz, malabsorpsiyon düşünüldüğünde gösterilmesi gereken yararlı bir enzim olabilir. Malabsorbsiyonu doğru bir şekilde değerlendirmek ve izlemek için jejunumun yönlendirilmesi gerekir, böylece villuslar uzunlamasına bölümlere ayrılır.
Gastrointestinal sistem Nedir
Gastrointestinal sistem organları
Sindirim sistemi FİZYOLOJİSİ
Etkisiz doku perfüzyonu hemşirelik bakım planı çevre
Etkisiz Doku Perfüzyonu hemşirelik bakım planı
Gastrointestinal perfüzyonda etkisizlik Riski
Etkisiz Gastrointestinal Doku Perfüzyonu Riski
Etkisiz Gastrointestinal Doku Perfüzyonu Riski hemşirelik
Lenfoid ve Miyeloid Hücreler
Spesifik olmayan esteraz, asit fosfataz ve kloroasetat esteraz dahil olmak üzere çeşitli enzimler, Tablo 3.2’de gösterildiği gibi, smear preparasyonlarındaki hücrelerin sitokimyasal tanımlanması ve değerlendirilmesi için kullanılır. Enzim aktivitesine ek olarak, belirli hücreler boyama modellerine göre, yani odak veya dağınık olarak farklılaştırılabilir.
İmmünohistokimya şu anda histopatolojide bu hücreleri tanımlamak için tercih edilen yöntemdir, ancak bazı hematoloji bölümleri hala enzim histokimyasal yöntemlerini kullanmaktadır.
Daha önce bahsedildiği gibi parafine gömülmeden hayatta kalan kloroasetat esteraz, birincisi gösterilmediği için lenfoid ve miyeloid hücreleri ayırt edebilir. Mast hücreleri, bu enzim histokimyasal yöntemini kullanarak güçlü boyama, morfoloji ve taneciklikleriyle de kolayca tanınır.
Karaciğer Dejenerasyonu
Karaciğerin donmuş bölümlerinde enzim aktivitesinin olmaması, erken hepatosit hasarını ve sirotik değişiklikleri belirlemede faydalı olabilir. Belirgin sirotik değişiklik olduğunda, dahili kontrol olarak işlev görecek herhangi bir normal hepatosit bulunmayabileceğinden bir kontrol numunesi önemlidir. Çekirdekte bulunan asit fosfataz gibi enzim aktivitesinin yeniden dağıtılması da lizozomal dejenerasyona bağlı hücre hasarının ve nihai nekrozun erken bir işaretidir.
Sonuç
Enzim histokimyası, yeni immünohistokimyasal yöntemler mevcut olmasına rağmen, özellikle kas hastalığının saptanması ve teşhisinde olmak üzere, histo-patolojide hala hayati bir rol oynamaktadır. İmmünositokimyada ve moleküler biyolojide, enzim histokimyasal teknikleri tespit sistemlerinde rutin olarak kullanılmaktadır.
Süksinik dehidrojenaz için formazan yöntemi, ölüm sonrası dokudaki enfarktüsü tanımlamak için taze makro kalp dilimlerinde başarıyla kullanılmıştır. Adli bilim adamları, bir yaranın indüklendiği tarih ve saati belirlemeye yardımcı olmak için enzim histokimyasal yöntemlerini de kullandılar.
Araştırmada, ışık mikroskobuna ek olarak elektron mikroskobu ve akış sitometrisi gibi çeşitli teknikler kullanılarak çok daha geniş bir enzim yelpazesi incelenir.
İmmünohistokimya
Normal fonksiyon ve hastalık durumları açısından, analiz için bölümlerin veya hücrelerin basit morfolojisinin incelenmesi genellikle yeterlidir. Bölüm 3 ve 5’te açıklandığı gibi, histokimya, enzim histokimyası ve elektron mikroskobu gibi yardımcı teknikler, bir hücre veya doku tipinin doğasını ve işlevsel durumunu daha fazla anlamada en çok yardımcı olabilir.
Bununla birlikte, 1970’lerde hücre işlevi ürünlerinin daha ayrıntılı değerlendirilmesinin hem gerekli hem de mümkün olduğu ortaya çıktı. Histopatolojide, immünohistokimyanın (IHC) gelişi heyecan vericiydi ve biyopsi ve cerrahi eksizyon örneklerinin araştırılmasında büyük yeni bakış açıları açtı.
Tüm IHC’nin altında yatan ilke, histolojik olarak görselleştirilebilen bir etikete bağlı olan bir antikora bağlanması yoluyla antijeni göstermektir. Böylece, söz konusu antijenin yeri vurgulanır.
IHC yöntemleri uygun bir şekilde üç ana gruba ayrılabilir, yani. doğrudan, dolaylı ve karmaşıktır ve UV ile aktifleştirilen floresan kullanılarak görselleştirilenlerden kromojenik olanlara kadar değişir. Ek olarak, ağır metal gibi parçacıklı malzeme hem ışık hem de elektron mikroskobu seviyelerinde kullanılabilir.
Doğrudan Yöntemler
Bunlarda belirli bir moleküle veya bir molekülün bir kısmına (epitop) yönelik antikor, bir kısma bağlanır. Antikor, kendisine bağlı bir “haberci maddeye” sahiptir ve bu nedenle doğrudan görselleştirilir. Yöntem, ilgili antijenik sinyalin “amplifikasyonu” olmadığı için nispeten duyarsızdır. Doğrudan teknik, rutin IHC’de büyük ölçüde terk edilmiştir; ancak yine de akış sitometrisi için tercih edilen yöntemdir.
Dolaylı Yöntemler
Dolaylı yöntemler, ilgili antijeni göstermek için anti-vücut katmanlarının kullanılmasını içerir. Bu, klasik olarak, farklı tür özgüllüğüne sahip antijenlere yönelik anti-cisim katmanlarının birikmesi, moleküllerin “tersine çevrilmiş bir konisini” vermesi ve böylece orijinal sinyali büyük ölçüde yükseltmesiyle açıklanmaktadır.
Bu nedenle, örneğin, ilk adım olarak tavşan anti-insan antijeni ayrıca, örneğin etiketli bir domuz anti-tavşan antikoru ile reaksiyona sokulur. Bu, doğrudan yöntemlerden daha fazla hassasiyet sağlar, ancak büyük ölçüde daha karmaşık yöntemlerle değiştirilmiştir.
Çok Aşamalı Yöntemler
Çok aşamalı yöntemler, sinyali antikor bağlanma bölgesinde yükseltmek için antikor katmanları ve etiketler oluşturmayı içerir. Bunların örnekleri arasında enzim köprü yöntemleri, peroksidaz antiperoksidaz (PAP) ve alkalin fosfataz-anti-alkalin fosfataz (APAAP) teknikleri ve avidin / streptavidin-biyotin bazlı sistemler yer alır.
Tüm bu reaksiyonlarda, sinyal hassasiyeti, doğrudan ve dolaylı tekniklerden çok daha fazladır, amplifikasyonun “tersine çevrilmiş konisi”, moleküllerin çok katmanlı hale getirilmesiyle çok daha büyüktür.