Fizibilite
API’yi fosfatsız elde etmek mümkün olmadığından, 400 mg / mL klorür ve 0.4 mg / mL fosfat içeren bir test numunesi hazırladık. Hızlı hareket eden iyonun istif çözme etkisini değerlendirmek için klorür miktarını 0 ile 400 mg / mL arasında artırmanın etkisini kontrol ettik (Şekil 20). Öte yandan, yavaş hareket eden bir iyonun olası yeniden istifleme etkisini değerlendirmek için 0 ila 400 mg / mL arasında artan miktarda heptanesülfonat eklendi (Şekil 21). Bu, olası tITP optimizasyonunu değerlendirmek için yapıldı.
Sonuçlar
En yüksek teorik plaka sayısı 400mg / mL klorür ve 400mg / mL heptanesülfonat ile elde edildi. Bununla birlikte, pik alana baktığımızda,% 11,74 RSD değeri elde ettik, bu da istifleme ve istiflemenin yalnızca minimum bir etkiye sahip olduğunu gösterdi. TITP istiflemesi aranmadan daha fazla geliştirme gerçekleştirildi.
Mevcut ticari CE cihazları, dolaylı UV veya C4D iletkenlik tespiti kullanarak UV’de emilmeyen anyonları, organik asitleri, katyonları ve aminleri analiz edebilir. Farmasötik laboratuarında iyonların analizi için kullanılan yöntemler kolay ve sağlamdır. Karşı iyon ve safsızlık analizleri için kullanılabilirler. Diğer uygulamalar su ve hammadde analizleridir.
Birkaç tampon sistemi ile çok sayıda analitik problemi çözmek mümkündür ve gerektiğinde mevcut tamponlarda küçük değişiklikler yapılabilir. Yöntem geliştirme hızlıdır ve sonuçlar sağlamdır ve kolayca aktarılabilir.
Fizibilite etütleri Nelerdir
Fizibilite raporu Nedir
Fizibilite ne demek
Fizibilite çalışması Nedir
Fizibilite RAPORUpdf
KOSGEB fizibilite raporu örneği
GİRİŞİMCİLİK fizibilite örnekleri
Operasyonel fizibilite
BİYOFARMASÖTİK GELİŞİM VE
KALİTE KONTROLÜNDE CE’NİN ROLÜ
Bu bölüm, kapiler elektroforezin (CE), terapötik biyomoleküllerin biyofarmasötik araştırma, geliştirme, üretim ve salımındaki temel rolünü gösterir. Üç ana ayırma tekniği (CE-SDS, cIEF ve CZE) tartışılmaktadır. Biyoteknoloji endüstrisinde yaygın olarak kullanılan dört analitik salım yöntemine dayanan ayrıntılı yöntem geliştirme örnekleri, ürün saflığının, kimliğinin ve tutarlılığının belirlenmesi için gösterilmiştir.
Metot kalifikasyonu, transferi ve doğrulamasına ilişkin hususlar da tartışılmaktadır. Anormal elektroferogramlar dahil sorun giderme için pratik örnekler, yöntem geliştirme ve transfer sırasında kazanılan deneyimlerden sunulmuştur.
CE yöntemleri, yüksek düzeyde düzenlenmiş kalite kontrol (QC) ortamı için nispeten yeni olsa da, deneyimlerimiz, bunların uygun analist eğitimi, ayrıntılı standart işletim prosedürleri ve özel sistem uygunluğu ve numune kabul kriterleri ile bu ortama uyarlanabileceğini göstermektedir.
CE’nin geleneksel slab-jel yöntemlerine göre üstün performansı, biyofarmasötik moleküllerin genel kalite salımı için büyük bir ilerleme göstermektedir.
GİRİŞ
Son 40 yılda, kapiler elektroforez (CE), biyomoleküler karakterizasyon için bir teknik olarak önemli ölçüde ilerlemiştir. Yalnızca laboratuvar merakından mikro ölçekli ayırma için araç temelli olgun bir yönteme geçişi geçmekle kalmadı, aynı zamanda biyoteknoloji ve ilaç endüstrilerinde vazgeçilmez bir araç olarak ortaya çıktı.
CE, moleküler karakterizasyon için araştırma ve geliştirmede (Ar-Ge) ve terapötik biyomoleküllerin serbest bırakılması için kalite kontrolünde (QC) tercih edilen bir yöntem haline geldi.16220 Biyofarmasötik endüstrisinde, giderek daha fazla CE yöntemi Uluslararası Uyum Konferansı (ICH) gereksinimleri.
Bu bölümde, CE’nin farmasötik ürünlerin Ar-Ge’sindeki rolünü göstermek için gerçek endüstriyel örnekler sunuyoruz. Bu bölümdeki odak, terapötik proteinlerin ve antikorların üretimi ve salımı için yöntem geliştirme analitik kontrolü üzerinedir.
YÖNTEM GELİŞTİRME VE YETERLİLİK
Biyomoleküllerin analizi için biyoteknoloji / ilaç endüstrisinde farklı CE metotları kullanılmaktadır: kapiler elektroforez-sodyum dodesil sülfat (CE-SDS), kapiler izoelektrik odaklama (cIEF) ve oligosakkarit ve protein analizi için kapiler bölge elektroforezidir (CZE).
CE-SDS yöntemi, proteinleri denatüre koşullar altında hidrodinamik boyutlarına göre ayırır ve genellikle saflık tayini için kullanılır. CIEF ve CZE yöntemleri, proteinleri yüklerine göre ayırır ve kimlik ve saflık yöntemleri olarak kullanılır. CZE oligosakarit analizi, glikanların glikoproteinden enzimatik salımı üzerine oligosakarit yapısının bileşimini belirler ve genellikle üretim sürecinin tutarlılığını izlemek için bir kalite deneyi olarak kullanılır.
Aşağıdaki bölümler, biyofarmasötikler için saflık ve kimlik deneyleri gibi CE tabanlı yöntemler için yöntem geliştirme ve kalifikasyonun ayrıntılı örneklerini sağlar.
Metot yeterliliği, ICH metot doğrulama kılavuzlarına dayanmaktadır. Yöntem türü (saflık veya kimlik), gerekli yeterlilik testinin seviyesini belirleyecektir. Metot kalifikasyonu ve doğrulaması için çeşitli stratejiler mevcuttur ve bunlar ihtiyaçlara, mevcut kaynaklara ve proje zaman çerçevesine dayanmaktadır.
Yaklaşımlardan biri, daha kısa zaman çizelgelerine sahip projeler için gerekli olabilecek, ancak sağlamlık testi için gelecekteki doğrulama faaliyetlerine daha fazla yük ve risk yükleyebilir ve başarısızlıkla sonuçlanabilir.
Bölüm 4’te tartışıldığı gibi, alternatif bir yaklaşım yöntem geliştirmeye daha fazla zaman ve kaynak yatıracak, ardından daha fazla geliştirme gerekip gerekmediğini belirlemek için kapsamlı yeterlilik ve sağlamlık testleri izleyecektir. Bu strateji, sürecin erken aşamalarında daha fazla zaman ve kaynak gerektirir, ancak doğrulama sırasında dahil olan iş yükü ve risk düzeyini azaltır.
Metot kalifikasyonunun amacı, amaçlanan kullanımını örnek türüne göre tanımlamaktır. Metot yeterliliği, ayrıca metot geçerli kılmak için kabul kriterlerini oluşturmak için kullanılan metoda ilişkin bir değerlendirme sağlar.
Bir saflık belirleme yöntemi için, yöntem nitelendirme sırasında aşağıdaki sekiz parametre / özellik incelenir: aralık, doğrusallık, algılama sınırı / niceleme sınırı (LOD / LOQ), kesinlik / tekrarlanabilirlik, ara kesinlik, özgüllük, kararlılık gösteren yetenekler ve sağlamlık.
Bir kimlik belirleme yöntemi için, sadece özgüllük ICH tarafından gereklidir. Tablo 1, ICH kılavuzlarına dayalı yöntem yeterlilik / doğrulama parametrelerini listeler.
Kapiler Elektroforez-Sodyum Dodesil Sülfat
Yıllardır, sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) yöntemleri, hidrodinamik boyutu belirlemek, ürün saflığını izlemek, küçük ürün veya işlemle ilgili safsızlıkları tespit etmek ve partiden partiye tutarlılığı doğrulamak için önemli bir araç olarak kullanılmıştır.
Bununla birlikte, jel bazlı tekniklerin, otomasyon eksikliği, değişken tekrarlanabilirlik ve sınırlı bir doğrusal aralık gibi bazı sınırlamaları vardır. SDS-PAGE aynı zamanda yoğun emek gerektirir ve büyük miktarda toksik atık üretir. En önemlisi, teknik, proteinlerin ve antikorların saflık ve safsızlık tespiti için kantitatif sonuçlar sağlamaz.