Folat ve kobalamin eksikliğinin nedeninin araştırılması
Folat eksikliğine genellikle malabsorpsiyon veya yetersiz diyet alımı (veya hamilelikte olduğu gibi artan gereksinimle bunlardan birinin kombinasyonu) neden olur.
Takviye basittir ve bazı ülkelerde gıdalar rutin olarak ilave folat ile takviye edilir, ancak kobalamin eksikliği olan bir hastaya folat verilmesi kordun subakut kombine dejenerasyonuna neden olabileceğinden dikkatli olunması gerekir. Kobalamin eksikliğinin önemli bir nedeni, mide parietal hücrelerinin artık ileal kobalamin emilimi için gerekli olan intrinsik faktörü üretemediği pernisiyöz anemidir (PA).
Ön araştırma, gastrik parietal hücre antikorlarının ve intrinsik faktör antikorlarının değerlendirilmesini içerebilir. İlki, PA vakalarının %90'ında pozitiftir, ancak normal deneklerin %3-10'unda mevcut olduğu için durum için zayıf özgüllüğe sahiptir. İntrinsik faktör antikorları PA için oldukça spesifiktir ancak duyarlılıkları düşüktür.
IF'nin kobalamine bağlanmasını bloke eden ve IF-kobalamin kompleksinin terminal ileum tarafından alınmasını bloke eden iki tür intrinsik faktör antikoru vardır. Eski antikor rutin olarak ölçülen antikordur ve PA vakalarının %50'sinde bulunur.
Geçmişte, uygulanan kobalamini absorbe etme yeteneğini belirlemek ve bunun intrinsik faktör eksikliğinden (PA'da olduğu gibi) kaynaklanıp kaynaklanmadığını belirlemek için Schilling testi (ilave intrinsik faktör varlığında ve yokluğunda radyoaktif kobalamin absorpsiyonunun ölçülmesi) kullanılırdı. ) veya ileal hastalık gibi başka bir neden.
Kas içi enjeksiyon yoluyla uygulanan etiketsiz kobalamin ile önceden doygunluk, emilen tüm etiketli kobalaminlerin atılmasını sağlar. Schilling testi, radyoizotopların kullanımıyla ilgili problemler ve testin genel olarak uygun olmaması nedeniyle geçmişte olduğundan daha az kullanılmaktadır.
Protoporfirin nedir
Porfirin nedir
Eritrosit protoporfirin nedir
Porfirin sentezi
Porfirin METABOLİZMASI
Protoporfirin 9 nedir
Porfirin Nedir cilt
Porfirin halkası
PA vakalarının yaklaşık %80'inde, pariyetal hücrelerin hidroklorik asit üretememesi nedeniyle ilişkili aklorhidrinin bir sonucu olarak serum gastrin yükselmiştir, bu nedenle serum gastrin PA'nın araştırılmasında değerli olabilir.
İlginç bir şekilde, diyetteki doğal bağlayıcı proteinlerden diyetle alınan kobalamin (ve folatın) salıverilmemesi emilimi bozabileceğinden, mide asidinin yokluğu başlı başına önemlidir. Bu nedenle, doğal gıdalardan proteine bağlı kobalamin emen bir hastada normal bir Schilling testi (serbest kobalamin emilimini ölçen) ortaya çıkabilir.
Pernisiyöz aneminin araştırılması için bir laboratuvar kademesi gösterilmiştir. Bu, Schilling testinin kullanılmasını önler, ancak bir dizi laboratuvarda, özellikle Birleşik Krallık'ta rutin olarak mevcut olmayan ölçümleri içerir.
Metilmalonik asit nadiren bulunur ve gastrin mevcut olmasına rağmen bu bağlamda çok az kullanılır. PA tedavisinde oral kobalamin takviyesi etkisiz olduğundan, kesin tanı önemlidir.
Demir
Demir, sadece hemoglobin sentezinde değil, moleküler oksijen kullanımında yer alan hem ve hem de içermeyen birçok metaloporoteinde rol oynayan önemli bir elementtir. Eksikliğinin en belirgin etkisi demir eksikliği anemisidir, ancak diğer metabolik süreçlere katılımından kaynaklanan daha ince değişiklikler olabilir.
Demirin Fe(II) ve Fe(III) olmak üzere iki temel oksidasyon durumunda bulunması ve bunun sonucunda bir elektron transferine katılabilme kolaylığı, onun önemli bir kullanıma sahip olan potansiyel bir oksijen serbest radikal kaynağı olmasına neden olur. konakçının bakterilere karşı savunmasında, ancak uygun konumlarıyla sınırlı değilse, konak dokularına oldukça zarar verir.
Böylece demirin emilimi ve taşınması, serbest demirin varlığından kaçınmak için sıkı bir şekilde kontrol edilir ve aşırı demir yüklenmesi koşullarının ciddi klinik sonuçları olur.
Demir eksikliği ve aşırı yükün laboratuvar önlemleri
Hemoglobinin kendisinden ayrı olarak, en sık kullanılan demir durumu laboratuvar ölçümleri, serum demiri ve demir bağlama kapasitesi, serum ferritin, kırmızı hücre çinko protoporfirin ve daha yakın zamanda serum transferrin reseptörü (TfR) konsantrasyonudur.
Serum demir ve demir bağlama kapasitesi
Serum demiri, demir durumunun en belirgin ölçüsüdür, ancak konsantrasyonu, bağlayıcı proteini olan transferrin konsantrasyonu da dahil olmak üzere bir dizi faktörden etkilenir.
Bu nedenle, ya proteinin doğrudan ölçümü ile ya da transferrin konsantrasyonuna eşdeğer olan serumun demir bağlama kapasitesinin kimyasal olarak değerlendirilmesi yoluyla serum demir konsantrasyonunun yorumlanmasında bir miktar transferrin ölçümü gereklidir.
Ferritin
Ferritin, 4500'e kadar demir atomu içerebilen ve çoğu vücut dokusunda bulunan mevcut demirin ana depolama formunu oluşturan bir çekirdeğin etrafındaki 24 protein alt biriminden oluşur. Denatüre formda, ferritin hemosiderin oluşturur. Plazmadaki ferritin konsantrasyonu, her bir "g/l serum ferritini yaklaşık 8 mg depo demirine eşdeğer olmak üzere, demir depolarının seviyesi ile doğrudan ilişkilidir.
Bununla birlikte, aynı zamanda, konsantrasyonu enfeksiyon, iltihaplanma ve maligniteye yanıt olarak artan bir akut faz proteinidir ve bu, inflamatuar hastalığı olan demir eksikliği olan bir hastada "normal" serum ferritin seviyeleri ile sonuçlanabilir.
Çinko Protoporfirin (ZPP)
Hemoglobin sentezinde, ferroketalaz enzimi, hem vermek üzere protoporfirin halka sistemine demir (II) sokar. Yeterli demirin yokluğunda çinko eklenir (yine enzimatik olarak) ve çinko protoporfirin ömrü boyunca kırmızı hücrede kalır.
Bu nedenle, basit demir eksikliği veya yeterli demir depolarının varlığında fonksiyonel bir demir eksikliği nedeniyle kemik iliğinde demir bulunmadığında ZPP konsantrasyonu artar. Bu son durum, kronik hastalık anemisi ile ilgilidir.
Bu nedenle ZPP'nin ölçümü, kemik iliğinde azalan demir mevcudiyetini belirleme özelliğine sahiptir, ancak her zaman demir depoları hakkında doğrudan bilgi vermez. Artan ZPP ayrıca hem sentezinde (kırmızı hücre yaşam süresi sırasına göre) uzun süredir devam eden sorunları yansıtır ve örneğin gastrointestinal kan kaybının neden olduğu hızlı başlangıçlı demir eksikliğinde normal olabilir. Nadiren yorumlayıcı bir problem olmasına rağmen, ZPP kurşun toksisitesinde de ortaya çıkar.
Serum transferrin reseptörü (TfR)
Kemik iliğindeki çekirdekli kırmızı hücreler, transferrin reseptörlerinin büyük çoğunluğunu taşır, ancak diğer hücrelerde hücrelerin demir gereksinimlerini yansıtan sayılarda bulunurlar. Hücre zarında yer alan bu reseptörler, demirini serbest bıraktıktan sonra hücre dışı sıvıya geri dönen transferini içselleştirir.
Transferrin reseptörü, 95 kDa moleküler kütleye sahip iki özdeş protein alt biriminden oluşur. TfR sentezi demir temini ile kontrol edilir, hücre demirle dolu olduğunda azalır.
TfR plazmada bulunur, transferrine bağlıdır ve plazma veya serumdaki konsantrasyonu, hücresel transferrin reseptörlerinin sayısını yansıtır ve demir depoları yeterli olduğu sürece bu, kemik iliğinde gelişen kırmızı hücrelerin sayısını yansıtır.
Demir eksikliği, hücresel reseptörlerdeki artışa paralel olarak serum TfR'sinde artışa neden olur. Artan serum TfR, bu nedenle, azalan demir mevcudiyetini veya artan eritropoezi veya her ikisini yansıtabilir.
Antibiyotikler ve Diğer Antibakteriyeller
Safsızlık profili kavramı antibiyotikler için çok önemlidir, çünkü bunların çoğu hala fermantasyon veya fermantasyon ürünlerinden başlayarak yarı sentez yoluyla üretilmektedir. Antibiyotikler tipik olarak birkaç bileşenin karmaşık karışımlarıdır ve bileşimleri fermantasyon koşullarına bağlıdır. Bozulmaya bağlı safsızlıklar sıklıkla meydana gelir.
Ticari numuneler genellikle aralarında sadece küçük yapısal farklılıklar olan, ancak farmakolojik aktiviteleri açısından büyük ölçüde farklılık gösteren önemli miktarlarda safsızlıklar içerir. Bu safsızlıklar antibiyotik aktivitesi sergileyebilir, ancak çoğu durumda inaktiftir ve hatta bazen toksiktir. CE’nin antibiyotik analizindeki uygulanabilirliği başka bir yerde gözden geçirilmiştir.729 CZE’nin antibiyotiklerin safsızlık analizinde kullanımı aşağıda ayrıntılı olarak tartışılmaktadır.
Aminoglikozitlerin CE analizine genel bir bakış, CZE’nin bu tip antibiyotiği analiz etmek için açık ara en yaygın kullanılan teknik olduğunu göstermektedir.10 Bununla birlikte, aminoglikozitlerin en büyük dezavantajlarından biri, doğrudan sınırlayan UV kromofor ve / veya florofor eksikliğidir. tespit etme. Bu problemi aşmak için bir dizi teknik kullanılabilir.
Aminoglikozidler çalışmasında CZE’nin kullanımına ilişkin ilk büyük çalışma, BGE’de güçlü bir UV emici madde olan imidazolü dahil ederek 214 nm’de dolaylı UV saptaması kullanmıştır. Alkali pH’da, aminoglikozitler gibi polioller, aşağıdakilerle bir kompleks oluşturur: borat sadece tetrahidroksiborat formunda değil, aynı zamanda triborat ve tetraborat gibi daha yüksek oranda yoğunlaştırılmış bir polianyon olarak kullanılır.
195 nm’de çalışan geleneksel bir UV dedektörü, bu negatif yüklü aminoglikozid-borat kompleksleri için algılama sağladı. Tanımlama yeteneklerini göstermek için on iki aminoglikozid incelendi ve ayrıldı.
Borat tampon sistemi, öncüler ve yakından ilişkili fermantasyon ürünleri gibi küçük safsızlıkların tespitine izin verdi. UV saptaması için borat kompleksasyonunun kullanımıyla ilgili bir dezavantaj, soğurmanın kompleksin gücüne bağlı olmasıdır. Düşük duyarlılık ve daha az ölçüde seçicilik, bu yöntemin temel sınırlamalarıydı.
Aminoglikozitler, özellikle alkali ortamda metal elektrotlarla temas ettiğinde kolayca oksitlenebilen bir dizi hidroksi ve amino grubu içerir. Dolayısıyla, ECD, aminoglikozid tespit engelini aşmanın başka bir yoludur. Bir nikel disk elektrotunda bir alkalin BGE ve amperometrik saptama kullanılarak, yedi aminoglikozidin belirlenmesi için bir CZE yöntemi geliştirilmiştir.
Geniş spektrumlu antibiyotikler listesi
Antibiyotik isimleri ve grupları
Antibiyotiklerin sınıflandırılması
Veteriner antibiyotik etkileşim tablosu
Antibiyotiklerin etki mekanizması
Sinerjik etkili antibiyotikler Veteriner
Geniş spektrumlu antibiyotik isimleri
Antibiyotikler pdf
Yöntem, kanamisin numunelerinin saflığını belirlemek için başarıyla kullanılmıştır. Yedi aminoglikozidin başka bir karışımı, bakır bazlı bir elektrotta ECD ile CZE ile analiz edildi. Bakır mikropartikülle modifiye edilmiş bir karbon fiber elektrot üretildi ve netilmisin, tobramisin, linkomisin, kanamisin ve amikasinin aynı anda belirlenmesi için CZE analizinde kullanıldı.
Temel ayırma nispeten kısa analiz süresinde elde edildi. Aminoglikositlerin tespiti, çoğunlukla çevrim dışı olarak türetme yoluyla da gerçekleştirilebilir, ardından doğrudan UV tespiti yapılır ve farklı türevlendirme ajanları tarif edilmiştir.
Tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için, elde edilen türevin hem verimi hem de stabilitesi zamana, sıcaklığa ve ışığın varlığına / yokluğuna bağlı olduğundan reaksiyon aşamasının dikkatlice kontrol edilmesi gerekir. O-ftaldialdehit (OPA) ve merkaptoasetik asit (MAA) ile türetmeyi takiben CZE, kanamisinin sekiz ilgili maddesini ve birkaç küçük bilinmeyen maddeyi ana bileşenden ayırmak için uygulanmıştır.
Ayırma,% 16 (v / v) metanol içeren bir boraks tamponu pH 10.0’da gerçekleşti ve tiyoizoindol türevleri, 335 nm’de saptandı. Gentamisinin belirlenmesi için aynı türevlendirme ajanları, OPA ve MAA kullanıldı.
Gentamisin C1, C1a, C2, C2a, C2b, sisomisin ve birkaç küçük bileşenin taban çizgisi ayrılması, ön kapiller türetme ve 30 mM sodyum tetraborat pH 10.0, 7.5 mM b-CD ve% 12.5 (h / v) metanoldür.
Yöntem, elektroforetik aracılı mikroanalize (EMMA) dayalı olarak OPA ve MAA ile kılcal türetme kullanılarak tam otomatik ve doğrulanmış bir prosedüre dönüştürüldü .18 Ön kapiller yöntemle karşılaştırılabilir seçicilik gösterildi.
Ek olarak, üç safsızlık, garamin, paromamin ve 2-deoksistreptamin ayrıldı ve ilk kez tanımlandı. Aynı grup, tobramisinin CZE analizi için OPA ve merkaptopropiyonik asit ile ön kapiller türetme potansiyelini araştırdı.
30 mM sodyum tetraborat pH 10.2 ve ACN (75:25, v / v) içeren basit bir BGE ile başarılı sonuçlar elde edildi. Bu koşullar altında, tobramisinin kanamisin B’den taban çizgisi ayrılması ve bilinmeyen bir pik gerçekleştirildi. Yöntem, kesinlik, nicelik sınırı (LOQ), saptama sınırı (LOD), özgüllük ve doğrusallık açısından iyi doğrulama verileri gösterdi ve toplu tobramisin farmasötik numunelerinin analizi için uygun olduğu bulundu.
OPA ve MAA ile ön kapiler türetmeden sonra paromomisin bileşenlerinin belirlenmesi için bir CZE yöntemi geliştirilmiştir. BGE, sodyum tetraborat tamponu, b-CD ve metanolden oluşuyordu. Son olarak, streptomisin analizi için daha düşük dalga boylarında doğrudan UV saptamanın açıklandığı belirtilmelidir.
Bir çalışma, streptomisin, dihidrostreptomisin ve bunlarla ilgili maddelerin, 205 nm’de direkt UV tespiti ile CZE ile eşzamanlı tespitini bildirmektedir. Kısa analiz süresi içinde iyi seçicilik elde edildi. Doğrulama sırasında, yalnızca zayıf bir kromoforun varlığı nedeniyle beklendiği gibi oldukça yüksek LOD’ler ve LOQ’lar gözlendi.
Yukarıda açıklanan çalışmaların çoğunun, geliştirilen CZE yöntemini yerleşik bir LC yöntemiyle karşılaştırdığı vurgulanabilir. Genel olarak, benzer bir seçicilik elde edilir ve CZE, LC’ye göre daha hızlı, ancak daha az kesin bir ayırma sağlar.
Tetrasiklinler genel olarak, dehidrasyon ve epimerizasyon reaksiyonlarından kaynaklanan çok sayıda ilgili madde ve bozunma ürünü içerir ve tüm bu bileşenlerin ayrıştırılmasının oldukça zor olduğu kanıtlanmıştır.
Etilendiamin tetraasetik asidin (EDTA) BGE’ye eklenmesinin gerekliliği, tetrasiklinlerin metal2iyon kompleksleşmesini önlediği için kısa süre sonra fark edildi, ikincisi analiz için zararlıdır. 1992’de tetrasiklinler için analitik bir araç olarak CZE’yi araştıran ilk çalışma, katkı maddesi olarak EDTA içeren bir fosfat tamponu kullanılarak tetrasiklin ve çeşitli bozunma ürünlerinin temel ayrımını tanımladı.
Tetrasiklin ve altı fermantasyon ve bozunma safsızlığının aynı anda belirlenmesi için bir CZE yöntemi geliştirilmiştir.23% 0.5 (v / v) metanol ve 1 mM EDTA içeren sodyum karbonat pH 9.0 kullanılarak, çoğu bileşik ayrılabilir ve 270 nm’de UV saptanabilir.
Ne yazık ki, bir safsızlık, 2-asetil-2-dekarboks-amidotetrasiklin (ADTC), tetrasiklin ile birlikte göç etti. Aynı yazarlar tarafından gerçekleştirilen sonraki bir çalışmada, ADTC, yüksek konsantrasyonlu bir sodyum karbonat tamponundan oluşan bir BGE aracılığıyla tetrasiklinden iyi bir şekilde çözülebilir.