Üre Aktivitesi – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Amaç
Bakteriyel büyümenin üç ayırt edici özelliğini test etmek için tek bir besiyerinin nasıl kullanılabileceğini gözlemlemek
Malzemeler
SIM orta ksilen tüpleri
Kovac reaktifi
5 ml pipetler
Ampul veya diğer pipet aspirasyon cihazı
Eğik Escherichia coli, Proteus vulgaris ve Klebsiella pneumoniae kültürleri
Escherichia coli, Proteus vulgaris ve Klebsiella pneumoniae’nin et suyu kültürleri
Prosedürler
1. Üç eğik kültürün her birinden üremeyi ayrı SIM ortamı tüplerine inoküle edin. Aşılama telini, derinliğinin yaklaşık dörtte biri kadar bir mesafe boyunca agar boyunca düz bir şekilde bıçaklayın. Teli aynı yol boyunca hızla geri çekin (agar içinde hareket ettirmeyin).
2. Tüpleri 35 ° C’de 24 saat inkübe edin.
3. Tüpleri hidrojen sülfit üretimi (besiyerinin kararması veya kararması) açısından inceleyin. Sonuçları kaydedin.
4. Tüpleri organizmanın hareketliliğinin kanıtı açısından inceleyin. Hareketli bir tür, bıçak hattından uzağa doğru büyür.
Çevreleyen agarlar vardır. Tüp boyunca büyüme çizgileri ve hatta genel bulanıklık görülebilir. Hareketsiz bir cismin büyümesi organizma, bıçağın yolu ile sınırlıdır. Gözlemlerinizi kaydedin.
5. SIM ortamında gözlenen sonuçları doğrulamak için her broth kültürünün asılı damla veya ıslak montaj preparatını kurun.
6. Indol için Kovac testini gerçekleştirin.
a. Bir pipet ampulü veya başka bir aspirasyon cihazı kullanarak, 0,5 ml ksileni SIM tüpüne pipetleyin (agarın üst yüzeyinde katmanlaşacaktır).
b. 0,5 ml Kovac reaktifini ksilenle aynı şekilde pipetleyin ve SIM tüpüne ekleyin. c. Ksilen katmanının rengini gözlemleyin ve kaydedin.
Amonyaktan üre sentezi
Karaciğer üre amonyak
Ornitin Döngüsü
Karaciğerde üretilen ürenin izlediği yol
Ornitin transkarbamilaz
Üre döngüsü Biyokimya pdf
Üre oluşumu denklemi
Karbamoil fosfat sentetaz 1
Sorular
1. Asit pH değerinde fenol kırmızısının rengi nedir?
2. Durham tüpünün işlevi nedir?
3. Nişasta hidrolizini saptamak için neden iyot kullanılır?
4. Bir indol pozitif organizmayı adlandırın.
5. SIM ortamında indol nasıl üretilir? Nasıl tespit edilir?
6. Bu ortamda hidrojen sülfür nasıl gösterilir?
7. Bakteriyel hareketliliği belirlemek için iki yöntemi adlandırın.
8. Biyokimyasal testler için saf kültürlere sahip olmak neden gereklidir?
9. Steril olması gereken bir sıvıda kontaminantın varlığını ortaya çıkarmak için pH’a duyarlı bir renk göstergesi kullanılabilir mi?
Bakteriyel Enzimlerin Aktiviteleri
Enzimler, her canlı hücrenin faaliyetlerinin en önemli kimyasal aracılarıdır. Bu organik maddeler, hücresel bileşenlerin sentezi veya enerji için gerekli hammaddelerin alımını ve kullanımını katalize eder veya teşvik eder.
Enzimler ayrıca hücreden atılması ve çevreye geri verilmesi gereken gereksiz maddelerin veya metabolik yan ürünlerin parçalanmasında da rol oynarlar.
Katalizörler olarak enzimler, genellikle adlandırıldıkları gibi, yalnızca çok özel maddeler veya substratlardaki değişiklikleri teşvik eder. Bu nedenle, önceki alıştırmada, basit karbonhidratlarda ve nişasta substratlarında üretilen değişiklikler, farklı, spesifik enzimler tarafından gerçekleştirildi.
Bir enzimin etkinliğini farklı bir sonuçla, bir antimikrobiyal maddenin parçalanmasını gördük, ama prensip tamamen aynı. İkinci durumda, beta-laktamaz enzimi penisilinaz, penisilin substratında bir değişikliğe neden oldu.
Enzimler belirli substratlarla sınırlı göründüğünden, her bakteri hücresinin, her biri farklı bir metabolik sürece aracılık eden büyük bir farklı enzimler piline sahip olması gerektiği sonucu çıkar. Substratta üretilen değişim türü açısından tanımlanırlar.
Bunları adlandırırken, son eki genellikle etkilenen alt tabakanın adına eklenir. Dolayısıyla üreaz, üreyi bozan, jelatinaz jelatini (bir protein) parçalayan, penisilinaz penisilini inaktive eden bir enzimdir.
Bu alıştırmada, kaç tane bakteriyel enzimin gösterildiğini ve bunların bakteri kültürlerinde tanınmasının türlerin tanımlanmasına nasıl yol açtığını göreceğiz.
DENEY : Üre Aktivitesi
Bazı bakteriler üre molekülünü ikiye bölerek karbondioksit ve amonyak açığa çıkarırlar. Üre enziminin aracılık ettiği bu reaksiyon, substrat olarak üre eklenmiş kültür ortamında görülebilir. PH indikatörü olarak fenol kırmızısı da eklenir.
Üreaz üreten bakteri hücreleri bu ortamda büyütüldüğünde üre bozulur, amonyak salınır ve pH alkali hale gelir. Bu pH değişimi, gösterge renginin turuncu-pembeden koyu pembeye değişmesiyle tespit edilir.
Hızlı üreaz üretimi, Proteus türlerinin ve bir zamanlar Proteus cinsinde sınıflandırılan diğer birkaç enterik bakterinin karakteristiğidir. Bu nedenle, bu basit test, bu organizmaları onlara benzeyen diğer bakterilerden ayırt etmede faydalı olabilir.
Amaç
Üreazın aktivitesini gözlemlemek ve onu üreten bakterileri üretmeyenlerden ayırt etmek
Malzemeler
Üre suyu veya agar tüpleri
Eğik Escherichia coli ve Proteus vulgaris kültürleri
Prosedürler
1.Ecoli ile ve başka bir şekilde protezkültür ile birlikte bir göğüs kafesi tüpünü aşılayın.
2. Tüpleri 35 ° C’de 24 saat inkübe edin.
Katalazın Aktivitesi
Pek çok bakteri, hidrojen peroksiti parçalayarak oksijeni serbest bırakan katalaz enzimini üretir. Basit katalaz testi, organizma gruplarını ayırt etmede çok faydalı olabilir. Hidrojen peroksit doğrudan eğimli bir kültüre veya temiz bir cam slayt üzerine bulaşmış bakterilere eklenebilir.
Kırmızı kan hücrelerinde katalaz bulunduğundan, kan içeren ortamda büyüyen organizmalar üzerinde test yapılmamalıdır.
Amaç
Bakteriyel katalaz aktivitesini gözlemlemek için
Malzemeler
% 3 hidrojen peroksit
Kılcal pipetler
Pipet ampulü veya diğer aspirasyon cihazı
Staphylococcus epidermidis ve Enterococcus faecalis’in besleyici agar yatık kültürleri
Çin işaretleme kalemi veya işaretleme kalemi
Prosedürler
1. Temiz bir cam slaydı işaret kaleminizle iki kısma ayırın.
2. Sterilize edilmiş ve soğutulmuş bir aşılama özesi ile besleyici agardan az miktarda Staphylococcus kültürü alın
eğik. Kültürü doğrudan slaydın sol tarafına sürün. Smear, bezelye büyüklüğünde olmalıdır.
3. Özeyi tekrar sterilize edin ve slaydın sağ tarafına az miktarda Enterococcus kültürü sürün.
4. Kılcal pipet ile her smear üzerine bir damla hidrojen peroksit koyun. Damlaları birlikte çalıştırmamaya dikkat edin.
Gaz kabarcıklarının oluşup oluşmadığını anlamak için sıvıyı lekelerin üzerinde gözlemleyin. Sonuçları tabloya kaydedin. Slaytı bir dezenfektan kavanozuna atın.
5. Eğik Staphylococcus kültürünü eğimli bir pozisyonda tutun ve 5 ila 10 damla hidrojen peroksidi bakteri üremesi ile yüzeye pipetleyin. Gaz kabarcıklarının oluşup oluşmadığını yakından gözlemleyin.
6. Prosedürü Enterococcus kültürü ile tekrarlayın. Oksijenin serbest kalıp kalmadığını ve kabarcık oluşumunun olup olmadığını not edin.
Amonyaktan üre sentezi Karaciğer üre amonyak Karaciğerde üretilen ürenin izlediği yol Karbamoil fosfat sentetaz 1 Ornitin Döngüsü Ornitin transkarbamilaz Üre döngüsü Biyokimya pdf Üre oluşumu denklemi