Tespit Sınırı – Farmasötik Analiz İçin Kapiller Elektroforez Yöntemleri – Ayırma Teknolojisi –FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Saf reaktifler veya en azından sabit kalitede reaktifler kullanmak önemlidir. Farklı reaktif ve malzeme grupları kullanarak ayırmanın tekrarlanmasının mümkün olduğunu göstermek gerekir. Kullanılan tüm reaktiflerin uzun vadeli kullanılabilirliği garanti edilmelidir.
Bir reaktif sıklıkla kullanılıyorsa bu bir sorun değildir. Bununla birlikte, daha az yaygın olan reaktifler oldukça nadiren satılır; şirketler sadece geçici olarak üretebilir. Bu nedenle, bu reaktifler genellikle sadece pahalı olmakla kalmaz, aynı zamanda sabit kalitede bulunabilirlik sorununa da neden olabilir.
Seçicilikteki farklılıklar, özellikle kiral seçiciler için nominal özdeş reaktifler kullanılarak bildirilmiştir.26229 CD’lerin tek izomerlerinin tanımlanmış karışımlarının kullanılması, çözünürlükte küçük farklılıklar sağlar. Sağlam bir enantiyo ayırma yönteminin geliştirilmesi için, çözünürlüğü artırmak için rastgele ikame edilmiş CD türevlerinden ziyade tanımlanmış tek izomer CD’lerinin karışımlarının uygulanması muhtemelen daha tavsiye edilir. CE için iyi karakterize edilmiş tampon katkı maddelerinin kullanılması çok önemlidir.
Entegrasyon parametrelerini doğrulamak hala yaygın değildir. En yüksek entegrasyon için çeşitli yazılım paketleri, sağlamlık testi için gerekli olacağı gibi entegrasyon parametrelerini kademesiz olarak değiştirme seçeneği sunmaz. Yöntem açıklamalarında, uygun entegrasyon parametreleri için bir aralık ve hatta video entegrasyonu tolere edilir.
Doğrulanmış zirve entegrasyon yazılımını elde etme olasılığı 31 referansında açıklanmıştır. Ancak, bu yazılım henüz değildir. satışa sunulmuştur. Mümkün olan en iyi koşulları elde etmek için, doğrulama planında entegrasyon parametrelerinin ve entegrasyon yazılımının ayrıntılı bir kaydının açıklanması gerekir.
Sağlamlık testi için, kritik tepe çiftlerinin çözünürlüğü ve verimlilikleri de dahil olmak üzere ilgili tüm parametreleri gözlemlemek önemlidir. Geçiş süreleri (özellikle tEOF), pik alanlar (PA’lar) ve göreli PA’lar (Tablo 5) için tüm ilgili pikler için ortalamalar ve ek olarak standart sapmalar verilmelidir.
Sağlamlık testi başlamadan önce, tüm yöntem parametrelerinin kesin olarak belirtilmesi kesinlikle gereklidir (Tablo 6); aksi takdirde hangi yöntemin doğrulandığı daha sonra net olmayabilir. İlk CE deneyleri için olası ayarlar, Şema 2’de gösterilmektedir. Özellikle, tampon bileşimini, örn., Tampon reçeteleri ile belirlemek önemlidir (Tablo 8). Aksi takdirde, pH veya iyonik güçteki istenmeyen değişiklikler seçicilikte değişkenliğe yol açabilir.
Validasyon Raporu örneği
LOD hesaplama
lod, loq nedir
Tayin sınırı
Tespit limiti nedir
validasyon/verifikasyon nedir
LOD LOQ
Gözlenebilme sınırı nedir
Ayrıca, durulama prosedürleri ve dengeleme koşulları dikkatlice tanımlanmalıdır. Her cihaz türünün farklı basınç ayarları kullandığını, bu nedenle durulama sürelerinin doğrudan aktarılamayacağını unutmayın. Bu nedenle, cihazdan bağımsız olarak değerlendirilebilecek yöntemde bir durulama hacmi veya basınç farkı ve durulama süresi 20 ürününün belirtilmesi tercih edilir.
Kesirli bir faktöryel tasarım, aynı anda birkaç parametreyi gözlemlemek için sıklıkla önerilir.1,2,4 Avantajlar, diğerlerinin yanı sıra, denetçiler ve denetçiler tarafından değerlendirilmesi kolay olan resmi örnekleme planıdır. Dahası, kısmi bir tasarım, ilgili parametreleri tek tek test eden bir tasarıma kıyasla, deneylerin yalnızca bir kısmına (genellikle yaklaşık% 50) ihtiyaç duyar.
Ancak, kesirli faktöryel tasarımlar daha az esnektir. Parametrelerin değiştirileceği aralık önceden bilinmelidir. Bu nedenle, bu aralığı küçümsemek yerine abartmak çok daha iyidir; aksi takdirde tüm deney anlamsız hale gelebilir. Bir parametrenin aralığı büyük ölçüde fazla tahmin edilmişse, bu deneysel tasarıma ek veriler dahil etmek mümkündür.
Kesirli faktöryel tasarımın çok fazla çalışma süresi kazandırdığı sıklıkla iddia edilir. Ancak, bir tasarımın tüm deneyleri birlikte değerlendirilmelidir. Bu büyük bir dezavantaj olabilir. 2 veya 3 hafta sürebilecek tek tek sağlamlık parametreleri testini düşünün. Kesirli faktöryel tasarım sadece 11⁄2 haftaya ihtiyaç duyabilir; ancak bu süre zarfında hava basıncı ve nem gibi analistlerin kontrolü dışındaki parametreler değişebilir. Test sırasında lamba performansı kesinlikle değişecektir.
Dahası, bir kılcal damar 10 gün boyunca kırılabilir ve değiştirilmesi gerekebilir. Tüm bu parametreler, bir faktöryel tasarımın sonuçlarını tahmin edilemeyen bir şekilde etkileyecektir. Tek tek tasarım sırasında her parametre bir gün içinde test edilir. Kontrol edilemeyen etkiler çok daha az olasıdır. Kılcal damar kırıldığında, sadece değiştirilir ve serinin sadece küçük bir kısmının tekrarlanması gerekir.
Sağlamlık kontrolü, hassasiyetle ilgili ön deneyleri içerir. Sağlamlık testi sırasında, gerçek kalibrasyona başlamadan önce tek bir standart tekrar tekrar analiz edilir. Tek bir konsantrasyonda yeterli hassasiyet olmadan kalibre etmek sonuçsuzdur. Bununla birlikte, tekrarlanan enjeksiyonlardan elde edilen RSD, genel hatayı 3,33’e varan bir faktörle olduğundan az tahmin etmektedir.
Tespit Sınırı
DL kalibrasyon yapılmadan belirlenebilir. Genellikle sinyal-gürültü (S / N) oranı kullanılarak tanımlanır.
burada H, ortalama taban çizgisi ile ilgili ölçülen tepenin yüksekliğidir. Tepeden tepeye gürültü hn, tepenin her iki yanında yüksekliğin yarısında yaklaşık 20 tepe genişliğine sahip bir bölümde ölçülen maksimum ve minimum (taban çizgisi) sinyal arasındaki fark olarak tanımlanır. DL artık isteğe bağlı olarak örneğin 2 veya 3 S / N oranını garanti eden konsantrasyon olarak tanımlanabilir.
Safsızlıklar için DL’ler, ana bileşiğin% 0.1’inden daha azına karşılık gelmelidir; daha düşük miktarlarda etkili olan 34 bileşik, daha düşük DL’ler gerektirebilir. Örneğin, imipramin N-oksit hidroklorür katışkıları ve salisilamid katışkıları% 0.01 düzeyinde belirlenmiştir. Ultraviyole (UV) algılama için kullanılan küçük optik yol (502100 mm) ve HPLC 10mm optik uzunluk ve 102200ml ile karşılaştırıldığında küçük enjekte edilen hacim (2220nl) nedeniyle CE’deki DL’ler ve QL’ler genellikle HPLC’ye göre bir dereceye kadar daha yüksektir (konsantrasyon olarak) enjekte edilen hacimdir.
DL’leri ve QL’leri iyileştirmek için yöntem geliştirme aşamasında çeşitli faktörler optimize edilebilir. Bir olasılık, istifleme etkilerini artırmak ve analit sinyalini arttırmak için düşük iletkenliğe sahip bir örnek çözücü kullanmaktır. Kapiler elektroforezdeki istifleme olgusu, referans 36’da ayrıntılı olarak açıklanmaktadır.
Algılama penceresinde bir kabarcık hücresi kullanmak, optik yolu artıracak ve böylece algılamayı iyileştirecektir. Artan bir optik yola ve enjekte edilen hacme sahip olmak için daha büyük bir kılcal çap kullanıldığında, sınır, artan akım ve ardından bant genişlemesine neden olan Joule etkisidir. CE’de etkili yol uzunluğu hakkında ayrıntılı bilgi, referans 37’de tartışılmaktadır.
Gözlenebilme sınırı nedir lod LOD hesaplama LOD LOQ loq nedir Tayin sınırı Tespit limiti nedir Validasyon Raporu örneği validasyon/verifikasyon nedir