G6PD Eksikliği (Glukoz 6-fosfat dehidrojenaz)
Kırmızı hücre, glikoz metabolizmasının pentoz fosfat şant yolundaki ilk enzimin eksikliğinden dolayı azaltılmış bir indirgeyici enerjiye sahiptir. Genellikle cinsiyete bağlı çekinik bir durumdur: hastalık erkeklerde X kromozomunda bir etkilenmiş genle ifade edilir, ancak dişilerin etkilenmiş iki gene ihtiyacı vardır.
Bir tanesi etkilenen dişiler, Lyon hipotezine göre, hangi hücrelerde hangi X kromozomunun inaktive edildiğine bağlı olarak değişken ekspresyon gösterecektir. Çoğunlukla siyahi ve Akdenizli popülasyonlarda görülür ve dünya nüfusunun %3'ünü etkiler. G6PD aktivitesi retikülositlerde mevcuttur ancak bu bireylerde hızlı ve erken düşer.
Bu nedenle oksidan kimyasallara ve ilaçlara (örn. sülfonamid antibiyotikler) maruz kalındığında kırmızı hücre bütünlüğü azalır. Heinz cisimleri özel olarak hazırlanmış kan filmlerinde görülür. Teşhis, G6PD testiyle yapılır, ancak yalnızca kararlı durumda (hemolitik krizlerden sonra olduğu gibi aşırı sayıda retikülosit olduğunda değil). Bazı bölümlere yiyecekler (klasik olarak bakla - 'favizm') ve ilaçlar neden olur.
6GPD eksikliği için tarama
Pentoz fosfat yolu içinde NADP, G6PD tarafından NADPH'ye indirgenir. Bu ürün ultraviyole ışık altında floresan verir. Bu, floresan nokta testinin temelini oluşturur.
Tam kan aşağıdakilerle karıştırılır:
Glikoz 6-fosfat.
NADP.
Parçalayıcı ajan (genellikle saponin)
Tampon
Daha sonra filtre kağıdına lekelenmeden önce 5-10 dakika inkübe edilir, kurutulur ve uzun dalga UV ışığı altında incelenir. Normal numuneler parlak bir şekilde flüoresans yapacak, eksik numuneler flüoresan etmeyecek veya sadece zayıf olacaktır. Herhangi bir anormal tarama testi, bir G6PD testi ile onaylanmalıdır; burada G6PD tarafından NADPH üretimi, optik yoğunlukta zaman içinde bir değişiklik ile spektrometrik olarak ölçülür.
Enzim eksikliği olanlar ne yememeli
G6PD eksikliği diyet
G6PD eksikliği askerlik
G6PD eksikliği anestezi
glukoz 6-fosfat dehidrogenaz nedir
Glukoz 6-fosfat dehidrogenaz yüksekliği
bebeklerde glukoz-6-fosfat dehidrogenaz yüksekliği
Enzim eksikliği öldürürmü
Piruvat kinaz eksikliği
Piruvat kinaz eksikliği "otozomal resesif" bir durumdur (her iki genin anormal olması, bir kişinin durumu kalıtım yoluyla alması) ve başka bir enzim sorunudur - daha nadir görülen G6PD dışı hastalıkların en yaygınıdır. Hücreler deforme olur ve savunmasız hale gelir. Kan filmi poikilositleri (anormal şekilli kırmızı hücreler) gösterir ve bunlar bir ilaç uyarısı olmadan kendiliğinden hemolizlenir. Transfüzyon gerekebilir.
Piruvat kinaz eksikliği taraması
Piruvat kinaz, reaksiyonun katalizörüdür: ADP + fosfoenolpiruvat ! ATP + piruvat
Bu reaksiyonun ürünü olan piruvat daha sonra laktat dehidrojenaz (LDH) tarafından katalize edilen aşağıdaki reaksiyona ilerler:
Piruvat ş NADH ! laktat + NAD
NADH, uzun dalga UV ışığı altında floresan verirken NAD olmaz. Bu nedenle, tam kan ADP, fosfoenolpiruvat ve NADH ile inkübe edildiğinde, normal numunelerde NADH, sonuçta bir floresan kaybıyla NAD'ye oksitlenir. Eksik numuneler parlak bir şekilde floresan verecektir.
Anormal bir PK tarama testi, NADH'nin NAD'ye oksidasyonunun zaman içinde fotometrik olarak absorbanstaki bir değişiklikle ölçüldüğü, enzimin tam bir tahlili ile teyit edilmelidir.
Bağışıklık Hemolizleri
Çeşitli koşullar (Tablo 34.4'te listelenenler gibi), daha kısa bir ömre sahip olan antikor kaplı kırmızı hücrelerle sonuçlanır. İmmün hemoliz, laboratuvardaki termal aktivite (ve aglütinasyon) aralığına bağlı olarak laboratuvarda 'sıcak' ve 'soğuk' tiplere ayrılır, klasik olarak ılıkta 37 C ve soğukta 4 C, ancak bazen küçük örtüşmedir.
Pozitif olacak (DCT, Şekil 34.4) geniş bir tarama doğrudan Coombs (anti-globulin) testinin yanı sıra, sıcak immün hemolizde daha spesifik bir profil (IgG, kompleman) veren reaktifler kullanılabilir. Soğuk immün hemoliz şüphesinde, kan örneğini serum ayrılana kadar sıcak tutmak, ardından yetişkin (antijen içeren) ve göbek bağı (antijen taşıyan) hücrelere karşı test etmek olağandır.
DCT genellikle sadece kompleman reaktifi ile pozitiftir ve kan filmi, ısıtılmadıkça aglütinasyon gösterir. Sıcak ve soğuk koşullar arasındaki ayrım tedavi için önemlidir. Sıcak immün hemolizlerde, antikor üretiminin etkisini durdurmayı veya buna müdahale etmeyi amaçlayan steroidler ve diğer immünosupresif tedaviler genellikle yararlıdır.
Splenektomi sıklıkla işe yarar. Bununla birlikte, soğuk immün hemolizlerde sitotoksik kemoterapi (bazen) ve hastayı sıcak tutmak (neredeyse her zaman) yardımcı olur, ancak steroidler veya splenektomi değil. Otoaglütinasyon çapraz eşleşmeyi engellediğinden, immün hemolizde genellikle transfüzyondan kaçınılır.
Hastanın klinik durumu zaman zaman transfüzyon gerektirir ve kesinlikle kırmızı hücre eksikliği nedeniyle yenik düşmesine izin verilmemelidir, bu durumda 'en az uyumsuz' kan verilir.
Yenidoğanın hemolitik hastalığı (HDN)
Rh+ fetüsündeki Rh-pozitif hücreler, Rh annenin dolaşımına geçer, örn. hamilelik sırasında kanama veya düşük yapma tehdidi. Bu, annenin anti-D (anti-rhesus) antikorları üretmesine neden olur ve bu antikorlar daha sonra aynı veya sonraki gebeliklerde fetüse geçer ve kırmızı hücreleri kaplar ve bebek Rh+ ise hemolize neden olur.
ABO grubu uyumsuzlukları benzer sorunlara neden olabilir, ancak daha az önemdedir. Doğumdan sonra yüksek konjuge olmayan bilirubin seviyeleri (hemolize bağlı olarak) kan-beyin bariyerini geçecek ve beyin hasarıyla birlikte 'kernikterus'a neden olacaktır. Değişim transfüzyonunu içerebilen tedavi bunu önleyecektir.
Kan filminde sferositler görülebilir ve DCT pozitif olacaktır. Ağır vakalarda bebek hidropik olacaktır (anemi/sarılık/ödemle şişmiş). Potansiyel feto-maternal kanama zamanlarında, annenin antikor üretimi, Rh+ hücrelerini temizlemek için intramüsküler enjeksiyon yoluyla anti-D'nin pasif olarak uygulanmasıyla engellenebilir, bu da annenin kendi yanıtını üretmesini engelleyecektir.
Anti-D'nin bu şekilde profilaktik kullanımı, modern bilimsel tıbbın başarı öykülerinden biridir, bu nedenle etkilenen bebekler artık nadirdir. Bunlar intrauterin transfüzyon (zor bir manevra!) veya yenidoğanın değişim transfüzyonu ile erken doğum indüksiyonu ile tedavi edilebilirler.
Uyumsuz Transfüzyon
Uyumsuz transfüzyon, immün aracılı bir hemoliz oluşturur. ABO uyumsuzluğunda (çok nadir görülen bir durumdur, ümit edilir) hastanın doğal olarak oluşan anti-A veya anti-B antikorları (veya her ikisi) nedeniyle donör hücreler intravasküler olarak yok edilir.
Hasta daha önce tarif edildiği gibi çok hızlı bir şekilde hastalanabilir ve hemoglobinüri geliştirecektir. Transfüzyon durdurulmazsa veya hasta anestezi altındaysa, durum ölümcül olabilir.
Diğer antijenlere bağlı uyumsuzluk reaksiyonları genellikle anemi ve sarılık ile ekstravasküler hemolize neden olur. İyileşme olağandır ancak alyuvar antijenlerine karşı allo-antikorlar nedeniyle bundan sonra çapraz eşleşme sorunları olacaktır.
Bazı streptokok türleri hemolizin üretmez. Bu nedenle, kolonileri kanlı agarda büyüdüğünde, etraflarındaki kırmızı kan hücrelerinde herhangi bir değişiklik görülmez. Bu türlere hemolitik olmayan streptokoklar denir, ancak eskiden gama streptokoklar olarak adlandırılırdı. Renk plakası 28, yüzey altı kolonileri olarak büyüyen alfa, beta ve hemolitik olmayan streptokokların görünümünü gösterir.
Klinik mikrobiyoloji laboratuvarında, hemolizin gözlemlenmesi, streptokok türlerini ayırt etmede önemli bir ilk adımdır.
Alfa-hemolitik streptokoklar normal boğaz florasının üyeleridir ve solunum kültürlerinden izole edildiklerinde daha fazla tanımlanmaları gerekmez. Bununla birlikte, kalp kapakçığı anormallikleri olan kişilerde, bu streptokoklar, genellikle kan dolaşımına girme ve dolaşma fırsatına sahip olduklarında, genellikle diş hekimliği çalışması sırasında kapakçıklarda birikebilir.
Kapakta gelişen iltihaplanma süreci endokardit olarak adlandırılır ve tedavi edilmezse yaşamı tehdit eden bir enfeksiyondur. Endokarditli hastalarda, birden fazla kan kültüründen viridans streptokok izolasyonu endokardit için tanısal kabul edilir.
Boğaz kültürlerinde beta-hemolitik streptokoklar bulunduğunda, laboratuvar antijenik grubu belirlemek için daha fazla test yapmalıdır. Bu, karbonhidrat antijenini streptokokal hücre duvarından ekstrakte ederek ve bunu bir lateks aglütinasyon testi veya enzim immünolojik testinde spesifik antikorlarla reaksiyona sokarak yapılır.
Alfa hemolitik streptokok
Pyr testi nasıl yapılır
Basitrasin testi nedir
Streptococcus pyogenes virülans faktörleri
Streptococcus pneumoniae özellikleri
Streptococcus pyogenes Hastalıkları
Alfa hemoliz
Beta hemolitik streptokok nedir
En önemli streptokok grubu, streptokokal farenjit (“strep boğaz”) ve diğer çeşitli ciddi deri ve derin doku enfeksiyonlarından sorumlu olan grup A’dır. A grubu streptokoklara verilen tür adı piyojendir (irin üreten, üretilen enfeksiyonun bir özelliği). S. pyogenes’in bazı toksinleri ve hücre dışı ürünleri, kızıl, romatizmal ateş ve Staphylococcus aureus tarafından üretilene benzer bir toksik şok sendromundan sorumludur.
Bir zamanlar B grubu streptokoklar (Streptococcus agalactiae) esas olarak hayvan patojenleri olarak kabul edildi. Şimdi, insan dişi vajinal yolunu kolonize ettikleri biliniyor. Bazı kolonize hamile kadınlarda, organizma doğumdan sonra endometrium enfeksiyonuna neden olur ve daha ciddi bir şekilde yeni doğan çocuklarında sepsis ve menenjit oluşturabilir.
Bu şiddetli enfeksiyonlar nedeniyle, hamile kadınlar termden birkaç hafta önce B grubu Streptococcus’un vajinal taşınması için rutin olarak taranır ve kolonize edilmişlerse antimikrobiyal ajanlarla tedavi edilir.
Diğer beta-hemolitik streptokoklar, C ila V gruplarına yerleştirilir, ancak çoğu hastalığa neden olmaz. C, F ve G grupları hafif farenjite neden olabilir ancak A ve B gruplarının yaptığı ciddi etkilere sahip değildir. D grubu antijene sahip Streptococcal benzeri bakteriler ilk başta Streptococcus cinsinde sınıflandırıldı, ancak çalışmalar bunların birçok biyolojik açıdan farklılık gösterdiğini ortaya çıkardı. Bu nedenle, artık kendi cinsleri olan Enterococcus’a yerleştirilmişlerdir.
Streptococci’nin Tanımlanması
Hasta materyalinden alınan smearlarda, mikrobiyolog, zincirlerdeki gram pozitif kokları tahminen streptokok olarak tanımlar (Gram boyama reaksiyonu ve morfolojisi sadece hekime bildirilmesine rağmen). Kültür büyümesi mevcut olduğunda, kanlı agar plakaları üzerindeki koloniler tarafından üretilen hemoliz türü, tanımlamada bir sonraki adıma / adımlara götürür.
Solunum örneklerinden alınan alfa-hemolitik koloniler, normal flora olarak kabul edildikleri için daha fazla tanımlanmamıştır. Beta-hemolitik koloniler, grup A (herhangi bir örnek türü) veya grup B (hamile kadınlardan alınan genital örnekler) olup olmadıklarını belirlemek için tanımlanmalıdır.
Serolojik testler (en yaygın olarak lateks aglütinasyon yöntemiyle, şekil 19.2) beta-hemolitik streptokokları gruplandırmak için kesin yöntem olmasına rağmen, gruplama için hızlı yöntemler ancak yakın zamanda kullanılabilir hale gelmiştir ve bunlar pahalıdır. Bu nedenle, laboratuarda A ve B grubu streptokokları belirlemek için alternatif, varsayımsal testler yaygın olarak kullanılmaktadır.
Örneğin, grup A streptokoklar, ancak diğer beta-hemolitik streptokoklar değil, ilaç bacitrasininin düşük konsantrasyonlarına duyarlıdır. Deney 15.1’de yaptığınız gibi bir basitrasin disk difüzyon testi kullanılarak, şüpheli suşların duyarlılığı test edilebilir.
Grup B streptokoklar, bazı Staphylococcus aureus suşlarının sahip olduğu beta-hemolizinlerin etkisini artıran, CAMP faktörü adı verilen bir madde üretir. Diğer tüm beta-hemolitik streptokok grupları serolojik olarak tanımlanmalıdır, ancak pratikte, grup A ve B suşlarının yokluğunun belirlenmesi genellikle klinik amaçlar için yeterlidir.
Grup A streptokokları belirlemek için hızlı bir lateks aglütinasyon testi kullanmanın yanı sıra, kültürde organizmayı büyütmeden A grubu antijeni doğrudan bir boğaz swabından saptamak için hızlı bir enzim immünoassay testi de mevcuttur.
Bu tür testler genellikle kliniklerde ve hekim muayenehanelerinde yapılır çünkü hızlıdır (10 ila 30 dakika) ve kültür uzmanlığı gerektirmez. Bununla birlikte, pozitif bir test için, çubukta çok sayıda organizmaya ihtiyaç vardır. Klinik farenjit kanıtı olan hastalarda negatif sonuçlar elde edildiğinde, “strep” kültürü için boğaz swabı her zaman klinik mikrobiyoloji laboratuvarına gönderilmelidir.
Grup A streptokoklar için pozitif bir lateks aglütinasyon reaksiyonu. Sol taraftaki çukurda çok ince, granüler bir çökelti görülmektedir. Bu kuyucukta, A grubu karbonhidrat antijeni, bu spesifik antijene karşı antikorla kaplı lateks boncuklarla birleşmiştir.
Sağdaki kuyu (grup B antijeni) negatif kalır ve sadece aglütine olmayan lateks partiküllerinin süte benzer süspansiyonunu gösterir. Bu antijen, lateks partikülleri üzerindeki anti-grup A antikorları ile reaksiyona girmez.
Streptococcal enzim immunoassay (EIA) şeması;
(a) Streptokokal farenjitli bir hastadan alınan bir boğaz swabı, grup A antijenini çıkaran ekstraksiyon solüsyonlu bir tüpe yerleştirilir.
(b) Ekstraksiyon solüsyonu daha sonra A grubu antijenin yüzeyine bağlandığı bir filtreden geçirilir.
(c) Bir yıkama aşamasından sonra, bir enzime bağlanan A grubu Streptococcus’a karşı bir antikor, A grubu antijenine bağlandığı filtreye eklenir.
(d) Başka bir yıkamadan sonra, enzime özgü renksiz bir substrat eklenir ve antikora bağlı enzim ile temas ettiğinde renkli bir son ürüne bölünür.
(e) A grubu dışında bir antijen mevcutsa, hiçbir antikor bağlanmayacaktır. Bağlanmamış antikor yıkanacak ve hiçbir renk reaksiyonu görülmeyecektir.