Numune Hazırlama ve Uygulama – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
M. tuberculosis (MTB) kompleksi, nükleik asit fosfat (NAP testi) içeren bir BACTEC flakonuna pozitif bir flakondan bir alikot aşılanarak diğer mikobakterilerden farklılaştırılabilir. GI değerinde artış veya azalma olmaması, MTB kompleksinin varlığını gösterir. Sistem ayrıca MTB kompleks izolatlarının antibiyotik duyarlılık testi için de kullanılabilir.
BACTEC 9000 MB Sistemi (Becton Dickinson), mikobakterilerin klinik örneklerden hızlı izolasyonu için tasarlanmıştır ve sıvı kültür ortamında büyüyen mikobakterileri tespit etmek için floresan teknolojisini kullanır.
Her kültür flakonu, mevcut oksijen konsantrasyonuna yanıt veren bir floresan sensör içerir. Mikroorganizmalar mevcut olduğunda, flakondaki besinler metabolize edilerek ortamdaki oksijenin tükenmesine neden olur. Cihazdaki fotodetektörler, tüketilen oksijen miktarına karşılık gelen floresan seviyesini ölçer.
Floresansın artırılmasıyla ölçülen oksijen düşüş oranının analizi, cihazın şişenin cihaz pozitif olup olmadığını belirlemesini sağlar. Şişeler, her biri en fazla 40 şişe tutan altı raf halinde düzenlenmiştir.
Raflar sürekli olarak 37 ° C’de inkübe edilir ve mikroorganizmaların maksimum geri kazanımı için 10 dakikalık aralıklarla karıştırılır. Şişeler, floresan sensörleri etkinleştiren ışık yayan diyotlarla (LED’ler) her 10 dakikada bir test edilir. Pozitif bir tespit, canlı mikobakterilerin varlığını gösterir ve aletin ön tarafındaki bir gösterge ışığı ile işaretlenir ve monitörde görüntülenir.
Numune hazırlama hataları
Numune Hazırlama aşamaları
Numune Hazırlama Teknikleri
Numune hazırlama Cihazları
Metalografik numune Hazırlama pdf
Dağlama işlemi
Metalografi pdf
Metalografik Numune Hazırlama Cihazları
Mikobakterilerin büyümesi, tespiti ve duyarlılık testi için BacT / ALERT 3D (bioMerieux) modülü, kan kültürleri için olana benzer bir tespit sistemine sahiptir. Her şişenin tabanındaki bir sensör, karbondioksiti büyümenin bir göstergesi olarak algılar ve yeşilden sarıya renkteki değişim, algılama ünitesindeki bir reflektometre ile sürekli olarak izlenir. İnkübasyon modülünün her biri 60 kuyucuk dört çekmecesi vardır ve çekmecelerin her biri, aynı sistem içinde statik veya çalkalanmış kültürlere izin vermek için bağımsız bir çalkalama mekanizmasına sahiptir.
BACTEC MGIT 960 Sistemi (Becton Dickinson), BACTEC 9000MB tarafından kullanılan floresan teknolojisinin aynısını kullanarak mikobakterilerin varlığı açısından 960 7 ml MGIT tüpüne kadar test yapabilen, yüksek kapasiteli, tam otomatik, sürekli izleme cihazıdır. sistemi. Kültür tüpleri, kültür ortamındaki oksijen konsantrasyonuna yanıt veren bir floresan sensör içerir.
Cihazın fotodedektörleri, her bir tüpteki floresanı her 60 dakikada bir ölçer. Floresans seviyesi, mikroorganizmalar tarafından tüketilen oksijen miktarına karşılık gelir ve bu da mevcut bakteri sayısıyla orantılıdır.
Cihaz ayrıca kültürden streptomisine, izoniazid, rifampisin ve etambutole kadar Mycobacterium tuberculosis’in duyarlılık testi için hızlı bir kalitatif prosedür olarak BACTEC MGIT 960 SIRE kitini kullanabilir.
Yorum
Mikrobiyolojik testleri ‘gerçek zamanlı’ gerçekleştirmek için, yani laboratuvardan fizikçiye anlamlı klinik tanı bilgileri göndermek için, mikrobiyologların giderek otomatik enstrümantasyona yönelmesi kaçınılmazdır. Bu aynı zamanda, daralan bütçeler, personel azalmaları ve sürekli artan iş yükünün neden olduğu baskıyı hafifletmeye de yardımcı olacaktır.
Otomatik testlerin birçok avantajı şunları içerir: daha zorlu karmaşık görevleri yerine getirmek için kalifiye personelin tekrar eden işten çıkarılması, böylece laboratuvar çalışmasının genel kalitesini arttırması; iyileştirilmiş geri dönüş süreleri; öznelliği ve insan hatasını ortadan kaldırarak testlerin daha iyi standardizasyonu; ve ek işlem gerektirmeyen negatif numuneleri tarayarak testlerin uygun maliyetli performansıdır.
Yüzyıldan fazla kullanımdan sonra agar plakasının ve tel halkanın ortadan kaybolduğunu hayal etmek zordur; ancak, klinik mikrobiyoloğun ulaştığı ilk araçlar olmadığında zaman hızla yaklaşıyor olabilir.
Bakteriyoloji moleküler teknikler: Numune Hazırlama ve Uygulama
Moleküler yöntemlere duyulan ihtiyaç
Moleküler tanı yöntemlerini geliştirmek ve uygulamak için gerekli olan önemli kaynakları gerekçelendirmek için, bir bakteriyel enfeksiyonun bir dizi temel kriteri karşılaması gerekir. Birincisi, enfeksiyon, vaka sayısı, morbidite ve mortalite açısından önemli bir klinik problemi temsil etmelidir.
İkinci olarak, enfeksiyonun erken teşhisi hasta için prognozu iyileştirmelidir; genellikle spesifik, etkili terapi mevcut olacaktır. Son olarak, geleneksel mikroskopi, kültür ve seroloji yöntemlerine dayanan mevcut tanı yaklaşımı, optimalin altında bir performans üretmelidir.
Rutin laboratuvarda antimikrobiyal duyarlılık açısından kolaylıkla tanımlanabilen ve test edilebilen bir bakteriyel enfeksiyon için moleküler tabanlı bir teşhis yöntemi geliştirmenin çok az klinik gerekçesi vardır.
Gelişmiş moleküler yöntemlerin uygulanması, kültürde üreyen ve zor üreyen bakterileri hedef almalıdır; ikincil derecede hasar görmüş bakteriler; benzer patojenik olmayan bakterilerden kolayca ayırt edilemeyen; antimikrobiyal duyarlılık açısından güvenilir bir şekilde değerlendirilemeyenler; ve mevcut tipleme yöntemleriyle yeterli ayrımcılık ile ayrılamayan türler. Bu bölüm, bakteriyel nükleik asitlerle ilgili moleküler yöntemlere odaklanacaktır.
Örnek hazırlama
Bakteriyel nükleik asitlerin incelenmesinde kullanılan herhangi bir tekniğin başarısı, başlangıçta hedef nükleik asitlerin salınmasına ve saflaştırılmasına dayanır. Henüz klinik örneklerin hazırlanması için evrensel olarak kabul edilmiş bir yöntem yoktur, ancak dikkate alınması gereken birbiriyle ilişkili birçok faktör vardır.
Hedef organizma seçildikten sonra, incelenen klinik örneklerin tipi hastalığın patogenezi tarafından belirlenecektir. Tespit şansını en üst düzeye çıkarmak için, örnek içindeki bakteri yükü (örnek hacmi başına organizma sayısı) dikkate alınmalıdır.
Optimal olarak, bakteri yükünün düşük olduğu yerlerde, en büyük uygun numune hacmi taranmalıdır; ancak, moleküler teknikler genellikle <100 ml hacimleri kullanır. Nihayetinde hedef organizmanın küçük bir hacme konsantre edilmesi gerekir.
Bu, Mikobakteri tüberkülozu için balgam ve bakteriyemi için kan gibi örneklerde yüksek düzeyde konsantrasyon gerektirir, ancak gerekli duyarlılığı elde etmek için Chlamydia için idrar gibi örneklerde düşük seviyeler gerekir. Büyük numune hacimleri, etanol çökeltme ve nükleik asit hedef yakalama gibi karmaşık hedef ekstraksiyon tekniklerini gerektirir ve bu da kullanılan testin duyarlılığının azalmasına neden olur.
Büyük numune hacimleri, testi tehlikeye atabilecek yabancı DNA’dan daha yüksek seviyelerde spesifik olmayan nükleik asit içerebilir. Numune türü ve toplama sırasında ve sonrasında nasıl işlendiği önemlidir. Beyin omurilik sıvısı (BOS), idrar ve balgam gibi örnekler inhibitörler içerebilir.
Dağlama işlemi Metalografi pdf Metalografik Numune Hazırlama Cihazları Metalografik numune Hazırlama pdf Numune Hazırlama aşamaları Numune hazırlama Cihazları Numune hazırlama hataları Numune Hazırlama Teknikleri