Kemoterapinin Laboratuvar Kontrolünün Genel Prensipleri
Şu anda Birleşik Krallık'ta ve dünya çapında klinik kullanım için lisanslı 100'ün üzerinde antibiyotik bulunmaktadır. Rutin hastane temelli tanı laboratuvarının ana rolü, numunelerin işlendiği bireysel hastalarda hastalığa neden olan patojenleri tanımlamak ve mümkünse izolatları ilgili antibiyotiklere duyarlılık açısından test etmektir.
Normalde, testler yalnızca o hastanın enfeksiyonuyla klinik olarak ilgili olan ve izole edilmiş patojene karşı aktif olduğu düşünülen sınırlı, önceden belirlenmiş bir antibiyotik bataryası üzerinde gerçekleştirilecektir.
Hangi antimikrobiyallerin test edileceği ve / veya raporlanacağına dair karar verme süreci karmaşıktır ve enfeksiyonun yeri ve ciddiyeti, antimikrobiyalin atılma yöntemi veya metabolizması, hastanın karaciğerinin işlevi ve böbrekler, toksisite, mevcut uygulama yolları, maliyet, kombinasyon terapisi ihtiyacı, kanıtlanmış klinik fayda, hem antimikrobiyaller hem de antimikrobiyal olmayanlarla mevcut tedavi ve ilaç etkileşimleridir.
Birleşik Krallık'ta 100'den fazla lisanslı antimikrobiyal olmasına rağmen, bunlar yalnızca birkaç düzine farklı ilaç sınıfından oluşur ve genellikle her sınıftan yalnızca bir temsili ajanı test etmek uygundur.
Çoğunlukla hastalar, kültür ve duyarlılık sonuçları alınmadan önce, ancak umarım yalnızca uygun örnekler işlenmek üzere laboratuvara gönderildikten sonra tedaviye deneysel olarak başlatılır.
Bununla birlikte, tedavinin kültür ve hassasiyet sonuçları ışığında değiştirilmesi gerekmesi durumunda, numunelerin olabildiğince hızlı işlenmesi yine de önemlidir, örn. daha güçlü veya daha az toksik bir madde. Benzer şekilde, tavsiyelerin kolayca alınmasını ve sonuçların hızlı bir şekilde yayılmasını sağlamak için örneklerin iyi taşınması ve iyi bir iletişimin olması önemlidir.
Laboratuvarın, doktorların uygun ampirik tedaviyi seçmelerine yardımcı olmak için çeşitli organizmaların hassasiyetlerinin özetlerini yayınlaması ve laboratuarların alışılmadık veya yeni direnç varyantlarının ortaya çıkması konusunda erken uyarı vermek için sentinel sürveyans şemalarında yer alması da faydalıdır.
Kan tahlilinde hangi değer kanseri gösterir
Normal kan testinde kanser belli olurmu
Kemoterapinin ise yaradığı nasıl anlaşılır
Kemoterapiye cevap veren kanser türleri
Kemoterapi neden 21 günde bir verilir
1 kür kemoterapi kaç seans
Kemoterapi ilacı içinde ne var
Kemoterapi çeşitleri
Bu, doktorların ve halk sağlığı görevlilerinin bilgileri hem uygun tedavi için hem de modern yüksek hızlı seyahat dünyasında ülkeden ülkeye ve kıtadan kıtaya hızla yayılabilen ve yayılabilen bu yeni dirençli varyantların yayılmasını kontrol altına almak için kullanmalarını sağlar.
Laboratuvarın antimikrobiyal tedaviyi faydalı bir şekilde yönlendirebileceği veya kontrol edebileceği başka yollar da vardır. Bunlardan en önemlisi, kritik hastalarda yeterli terapötik seviyelere ulaşılmasını sağlamak ve toksisitenin en aza indirilmesini veya önlenmesini sağlamak için kan ve ara sıra ilaçların doku seviyelerinin ölçülmesidir.
Bu ölçümler hastaların çoğunda gerekli değildir, sadece dar bir tedavi oranına sahip antimikrobiyallerin kullanılması gerektiği düşünülen hastalarda, yani hastaya toksik olabilecek dozlara etkili olması için gerekli olan ajanlar için. Aminoglikositler ve glikopeptitler, bu tür antibiyotik gruplarının en açık örnekleridir.
Bu tür özellikle toksik ilaçların kullanımı, genellikle direnç sorunları nedeniyle aktif ajan seçiminin sınırlı olduğu ciddi enfeksiyonlar için ayrılmalıdır.
Hastada antimikrobiyal aktivite ölçümü sıklıkla yapılmaz, ancak en kolay şekilde hastanın serumundaki anti-mikrobik maddenin inhibitör veya cidal aktivitesinin ölçülmesiyle gerçekleştirilir, genellikle bir doz uygulamasından önce (çukur seviyesi) ve yaklaşık 1 saat önce numuneler alınır. Bir dozun uygulanmasından sonra (en yüksek seviye) yapılır.
Antimikrobiyalin dokulardaki dağılımı genellikle o zamana kadar tamamlanmış olur. Antimikrobiyalin farmakodinamiğine ve hastalık durumuna bağlı olarak, pik numunede yüksek inhibitör veya cidal seviyelere ulaşmak önemli olabilir, örn. konsantrasyona bağlı aktiviteye sahip gentamisin gibi aminoglikozitler için.
Bunun aksine, laktamlar, birçok bakteriye karşı antibiyotik sonrası etkilerinin olmaması nedeniyle (zamana bağlı), genellikle tüm dozlama periyodu boyunca aktiviteye sahip olmanın önemli olduğu ilaçlardır.
Kritik hastalarda, en aktif rejimleri tahmin etmeye çalışmak için laboratuvarda kombinasyon tedavisinin potansiyel faydalarını değerlendirmek bazen yararlıdır.
Bu testler, özellikle kistik fibrozda ve bağışıklığı baskılanmış veya endokardit veya menenjit gibi enfeksiyonları olan hastalarda, hastayı konakçının yardımı olmadan iyileştirmek için antibiyotikler tarafından mikropların öldürülmesi gerektiğinde yararlı olabilir.
Duyarlılık Testi
Duyarlılık testi kavramı, yaklaşık 40 yıl önce geniş bir ölçekte ilk kez tanıtıldığından beri son derece sabit kalmıştır. 250.000 kişilik bir nüfusa hizmet veren ortalama bir klinik laboratuvar bu tür testleri yılda on binlerce organizma üzerinde gerçekleştireceğinden, testlerin uygulanması zorunludur.
Testlerin basitliğine rağmen, tedaviye rehberlik etmede yıllar içinde önemli ölçüde yararlı olduklarını kanıtladılar. Bu, mikrobun laboratuvardaki test durumundan görünüşte uzak bir dizi koşulda konakçı bağışıklık sistemi ile etkileşime girdiği bireysel vakaların karmaşıklığı düşünüldüğünde daha da şaşırtıcıdır.
Yaygın kullanımda dört duyarlılık testi yöntemi vardır: (a) agar difüzyonu; (b) agar birleşmesi; (c) et suyu makrodilüsyonu; ve (d) sıvı mikrodilüsyon. İlki, Birleşik Krallık'ta en yaygın kullanılan yöntemdir - laboratuvarların yaklaşık% 85'inde rutin yöntem olarak.
Bu yöntemde, dikkatlice kontrol edilen antibiyotik miktarları, test edilecek bakteri sayısı dikkatle kontrol edilerek önceden aşılanmış bir agar plaka yüzeyine yerleştirilen kağıt disklerde bulunur.
Normalde plaka başına altı antibiyotik test edilir. Plaklar, bakteri üreme hızına bağlı olarak 18–48 saat dikkatlice kontrol edilen koşullarda inkübe edilir. Yayılmış antimikrobiyalden kaynaklanan büyüme inhibisyon bölgeleri ölçülür ve bilinen hassas ve dirençli kontrol bakterilerininkilerle ilişkilendirilir.
Sonuçlar genellikle enfeksiyon bölgesinde ilacın elde edilebilir konsantrasyonları da dahil olmak üzere her bir antimikrobiyalin spesifik farmakokinetiği hakkındaki bilgilere dayanılarak basitçe "hassas" veya "dirençli" olarak rapor edilir.
Birleşik Krallık'taki pek çok laboratuvar, sürveyans amacıyla sonuçların daha kesin karşılaştırılabilirliğine izin vermek amacıyla son zamanlarda daha dikkatli bir şekilde standartlaştırılmış agar disk difüzyon yöntemlerine geçmiştir (İngiliz Antimikrobiyal Kemoterapi Derneği ve Klinik Laboratuvar Standartları Ulusal Komitesi)
Alternatif olarak, agar seyreltmede, bir antimikrobiyalin önceden belirlenmiş konsantrasyonları, dökülmeden önce agar plakalarına dahil edilir ve daha sonra katılaştıklarında bakteriler yüzeyde "lekelenir". Plaka başına tek bir maddeye kadar 30 mikrop test edilebilir. İnkübasyondan sonra bakterilerin görünür büyümesini inhibe eden en düşük antimikrobiyal konsantrasyonu, minimum inhibitör konsantrasyondur (MIC).
6. Daha fazla çalışmak istediğiniz bir alanı seçtiğinizde, yüksek kuru hedefi yerine getirin. Net odaklamaya yakınsanız, ince ayar düğmesiyle ayarlarınızı yapın. Yeni hedef yerine getirildiğinde slayt kötü bir şekilde odak dışındaysa,
vücut tüpüne bakın ve lensi slayta yakın ama dokunmadan aşağı indirin. Ardından, okülerden bakarak, merceği yavaşça, önce kaba ayarla, sonra da ince ayarla, keskin bir odak elde edene kadar ayarlayın. Bu hedefle gördüğünüz yapıların bir öncekine göre büyütmedeki farkına dikkat edin.
7. Slaydı hareket ettirmeden ve şimdi iki büyütmede gördüğünüz alanı değiştirmeden, eğitmenin yağa daldırma hedefinin kullanımını göstermesini bekleyin.
8. Yüksek kuru merdane hortumunu yan tarafa ve folyo slaydını doğrudan aşama açıklığının üzerine getirin. Gözleriniz yağa daldırma objektifi üzerindeyken, sahneye veya slayta değmediğinden emin olarak dikkatlice yerine getirin. Hala hedefe bakarken, merceğin ucu yağa batana ancak slaytla temas etmeyene kadar burunluğu nazikçe indirin (veya sahneyi kaldırın). Okülerden bakın ve ince ayar ile çok yavaşça yukarı doğru odaklanın.
Çoğu mikroskop artık ortak odaklıdır; yani, siz bir hedeften diğerine geçerken nesne odakta kalır. Bu durumda, tek başına ince ayar nesneyi keskin bir odağa getirecektir. Alanı bulmakta veya net bir görüntü elde etmekte sorun yaşıyorsanız, eğitmenden yardım isteyin. Keskin bir odağa sahip olduğunuzda, diğer ikisine kıyasla bu hedefle elde edilebilen büyütme farkını gözlemleyin. Yüksek güçlü objektifin sağladığından yaklaşık 212 kat daha büyüktür ve düşük güçlü lensinkinden yaklaşık 10 kat daha fazladır.
9. Gördüğünüz mikrobiyal yapıların birkaçını aşağıdaki dairelerin her birine çizerek, her bir hedefle görüntülendiğinde karşılaştırmalı boyutlarını belirterek gözlemlerinizi kaydedin.
10. Gözlemlerinizi bitirdiğinizde, slaydı sahneden çıkarın (yüksek kuru mercek üzerine yağ bulaşmamasına dikkat edin) ve yağ daldırma objektifindeki yağı bir kuru mercek kağıdı ile nazikçe temizleyin.
Her bir çizimin altında, okülerle birleştirilen her bir hedefle elde edilen toplam büyütmeyi (TM) belirtin.
Işık mikroskobu KULLANIMI
Işık mikroskobu kullanırken yapmamız gerekenler
Mikroskop temizliği
Mikroskop temizleme solüsyonu
Mikroskop Nasıl kullanılır
Mikroskop Çeşitleri
Mikroskop büyütme oranları
Mikroskop kullanımı PDF
Mikroskobun Bakımı ve Kullanımı
1. Mikroskobu taşımak için her zaman iki elinizi kullanın, biri kolu tutarak, biri tabanın altındadır.
2. Her kullanımdan önce mikroskobu dikkatlice inceleyin ve herhangi bir olağandışı durumu veya hasarı bildirin.
3. Gözleri, hedefleri ve yoğunlaştırıcı lensi temiz tutun. Yalnızca kuru lens kağıdı kullanın.
4. Mikroskobun kullanıldığı her laboratuvar döneminin sonunda slaytı sahneden çıkarın, yağı silin
yağ daldırma hedefine ve düşük güç hedefini dikey konuma yerleştirin.
5. Varsa toz kapağını değiştirin ve mikroskobu kutusuna geri koyun.
Sorular
1. Mikroskobun optik parçalarını listeleyin. Büyütmeyi nasıl başarır? Çözüm?
2. Kondansatörün işlevi nedir?
3. Kendi diyaframının işlevi nedir? İnsanınkiyle kıyaslanacak kadar?
4. Yağa daldırma hedefi ile incelenecek bir slaytta neden yağı kullanıyorsunuz?
5. Parfokal lenslerin avantajı nedir?
6. Şimdi mikroskobunuzda aynı hedeflerle 10 göz yerine 5 kullanılsaydı, hangi büyütmeler elde edilirdi?
7. Ders kitabınızda okuduktan sonra, iki tür mikroskop daha adlandırabilir misiniz? Büyütme aralıkları bileşik ışık mikroskobununkinden daha mı yüksek yoksa daha mı düşük?
Kültürleri Kullanma ve İnceleme
Mikroorganizmaların mikroskobik incelenmesi morfolojileri hakkında önemli bilgiler sağlar, ancak bize biyolojik özellikleri hakkında pek bir şey söylemez. Bu tür bilgileri elde etmek için kültürdeki mikroorganizmaları gözlemlememiz gerekir.
Onları laboratuvarda başarılı bir şekilde yetiştireceksek, onlara protein bileşenleri, karbonhidratlar, mineraller, vitaminler ve nem gibi uygun besinleri doğru bileşimde sağlamalıyız. Bu karışıma kültür ortamı (çoğul, ortam) denir. Sıvı formda, et suyu olarak hazırlanabilir veya deniz yosunundan ekstrakte edilen besleyici olmayan katılaştırıcı bir ajan olan agar ile katılaştırılabilir.
Agar besiyeri tüplerde katı sütun (derin olarak adlandırılır) veya daha büyük bir yüzey alanına sahip eğimli olarak kullanılabilir. Aynı zamanda petri kaplarında (onları tasarlayan Alman bakteriyologun adı) veya tabaklarda da sıklıkla kullanılırlar.
Katı ortam, örneğin idrar veya balgam gibi bir hastadan alınan bir örnekte birlikte büyüyen bakterileri izole etmek ve ayırmak için gereklidir. Bir bakteri karışımı bir agar plakasının yüzeyine şeritlendiğinde (yayıldığında), seyreltilir. böylece tek bakteri hücreleri plakanın belirli bölgelerinde birikir. Bu tek hücreler, koloni adı verilen görünür bir kümelenme oluşana kadar bu bölgelerde çoğalırlar.
Her koloni, bir bakteri türünün büyümesini temsil eder. Tek, ayrılmış bir koloni, saf bir kültür olarak büyüyeceği başka bir ortama aktarılabilir. Birkaç farklı türün kolonileri, belirli hasta örnekleri bunlara aşılandığında aynı agar plakasında düzenli olarak bulunur. Saf kültürlerle çalışmak, mikrobiyoloğun diğer türlerin müdahalesi olmadan bireysel türlerin özelliklerini incelemesine izin verir.
Saf kültürler elde etmek için plakaları sürme yöntemi ile bu uygulama hastane laboratuvarında kritik öneme sahiptir çünkü mikrobiyoloğun kaç tür bakteri bulunduğunu belirlemesine, hastanın hastalığına neden olması muhtemel olanları belirlemesine ve hangi antimikrobiyal ajanların test etmesine olanak tanır. tedavi için etkili olabilir. Egzersiz 9’da saf kültürler elde etmek için çizgi oluşturma tekniğini öğreneceksiniz.
Agar ortamında kolonyal büyümenin görünümü, tek tek türler için çok belirgin olabilir. Kolonilerin göze çarpan, kaba özelliklerinin, yani kolonyal morfolojilerinin gözlemlenmesi bu nedenle çok önemlidir. Kolonilerin rengi, yoğunluğu, tutarlılığı, yüzey dokusu, şekli ve boyutu gözlenmelidir, çünkü bu özellikler bir organizmanın kimliğine dair ipuçları sağlayabilir, ancak nihai tanımlama yalnızca morfoloji ile yapılamaz.
Sıvı ortamda, bazı bakteriler dağınık bir şekilde büyüyerek tekdüze bir bulutlanma oluştururken diğerleri çok granüler görünür. Et suyu tüpünün üstünde, ortasında veya altında gelişim katmanları, organizmaların oksijen gereksinimlerini ortaya çıkarır. Bazen kolonyal kümeler oluşur ve bakteri büyümesi, et suyunda yüzen küçük puf topları olarak görünür. Bu tür özelliklerin gözlemlenmesi, organizma türlerinin tanınmasında da yardımcı olabilir.
Kültürleri aseptik olarak nasıl idare edeceğinizi öğrenmelisiniz. Organizmaların işçiyi veya çevreyi kirletmesine izin verilmemeli ve kültürlere yabancı organizmalar bulaşmamalıdır. Bu alıştırmada, çevresel organizmalar veya düşük patojenik potansiyele sahip organizmalar içeren kültürleri kullanacaksınız.
Bununla birlikte, kendinizi ve komşularınızı kirletmekten kaçınmak için bunları dikkatli bir şekilde ele almalısınız. Ayrıca, kültürleri kirletirseniz, sonuçlarınız bozulacaktır. Başlamadan önce, güvenlik prosedürleri ve genel laboratuvar talimatları ile ilgili olarak Bölüm I’in açılış paragraflarını tekrar okuyun.