Kapiler Elektrokromatografi – Farmasötik Analiz İçin Kapiller Elektroforez Yöntemleri – Ayırma Teknolojisi –FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Sifonlanmayı önlemek için kılcal giriş, kılcal çıkış ile aynı yükseklikte olmalıdır. Kılcal çıkış uçları, karıştırmayı en aza indirmek ve elektrospreyi stabilize etmek için genellikle oyulmuş konik kılcal uçlardır. Elektrosprey kaynağı kullanılırken, tipik CE tamponları uçucu değildir ve elektrosprey kaynağı ile istikrarsızlığa neden olabilir.
Ek olarak, CE2MS’nin performansı, daha düşük iyonik kuvvete ve yüzey aktif madde konsantrasyonuna sahip tamponların çalıştırılmasıyla artar. Yüksek tuzlar iyon yoğunluğunu azaltabilir (iyon çifti oluşumu yoluyla) ve tuz kristallerinin MS girişini kirletmesi veya tıkaması mümkündür. Sulu veya organik çözücüler içinde 52100mM amonyum asetat (pH 3.525.5) veya asetik veya formik asit bazlı uçucu reaktiflerin CE2ESI2MS için çok uygun olduğu kanıtlanmıştır.
Uygun bir kılıf akışı olduğu sürece 0,1 M tuz kadar yüksek akan tamponlar kullanmak mümkündür. CE2MS’nin performansı, kılcalın ID’si düştükçe artar, yaklaşık 25 mm veya daha az optimumdur; bununla birlikte, daha küçük kapiler iç çaplarda tıkanma daha büyük bir sorundur.
CE2MS yükseltmelerine izin veren ticari arayüzler mevcuttur. Örnek olarak, Thermo Finnigan bir Elektrosprey Arabirimi (ESI) yükseltme kiti ve ESI kütle spektrometresi için talimatlar sunar. CE adaptörü, bir kılcal mikrometre adaptörü ve yardımcı sıvı ve gaz kılıfları içerir.
Bir MS ile arayüzlenen bir CE örneği Şekil 9’da gösterilmektedir. Kararsız bir elektrospreyin önlenmesi için, kılıf sıvılarının kullanımdan önce tamamen gazının alınması tavsiye edilir. Üretici, kılıf sıvılarının İzopropanol (IPA) / H2O,% 1 asetik asit veya H2O / MeOH,% 1 asetik asit olmasını önerir.
Kılıf sıvısının akış hızı 1 ila 3 mL / dakika arasında değişebilir ve CE kapilerinin kılıf tüpüne göre konumuna ve kılıf sıvısının viskozitesine bağlı olarak değişecektir. İdeal olarak, kılcal, kılıf sıvısından hafifçe çıkıntı yapmalıdır, ancak optimum kılcal çıkıntının çalışma tamponunun viskozitesine bağlı olacağı bulunmuştur.
Kapiler çıkıntı yaptığında sıvıların daha yüksek viskozitesi optimize edilirken, daha düşük viskoziteli sıvılar, kılcal ESI nozülünün ucuna göre girintili olduğunda optimize edilir. Bir kılıf gazının kullanılması spreyin stabilitesini artırabilir, ancak kullanıcıya ve uygulamaya bağlıdır.
CE2MS için örnek bir yeterlilik testi, iki küçük pentapeptidin basit bir şekilde ayrılmasını içerir; Leu-enkefalin (m / z 556) ve Met-enkefalin (m / z 589). Numune karışımı,% 100 H2O,% 1 asetik asit içindeki her bileşenin 100 pmol / mL’sinden oluşur.
CE kolonu, 0.1 M NaOH ve H20 ile önceden yıkanmış ve daha sonra% 100 su,% 1 asetik asit içeren akan tampon çözeltisi ile önceden yıkanmış 50 mm ID-65280 cm çıplak erimiş silikadır. Enjeksiyon yöntemi 10 sn için 50 mbar basınç ve 2 mL / dk 60/40 IPA / su,% 1 asetik asit oranında bir ESI kılıf sıvısıdır. Spektrumlar, 35023000 m / z taramada her 3 saniyede bir toplanır.
Bir CE çalışması ayrıca bir matris destekli lazer desorpsiyon iyonizasyon (MALDI) plakasında, LC Packings tarafından bir probot mikrofraksiyon toplayıcı kullanılarak tespit edilebilir. % 50 h / h asetonitril ve% 0.1 Trifloroasetik asit (TFA) içinde 2 mg / mL alfa-siyano-4-hidroksisinnamik asit matris çözeltisi, 4 mL / dakikalık bir akış hızında ilave edilir. Her 15 saniyede bir nokta yerleştirilir ve ardından kütle spektrometresi tarafından analiz edilir. Tüm bir CE2MS çalışmasının hesaplanması, 5 dakika içinde toplanan 100021500 tekli spektrumdan oluşabilir.
Kromatografi nedir
Kromatografik yöntemler ne demek
Partisyon kromatografisi nedir
Kromatografik analiz nedir
Adsorpsiyon kromatografisi nedir
Elektroforez Nedir
Kolon kromatografisi nedir
Kapiler Elektrokromatografi
Kapiler elektrokromatografi (CEC), CE’de en son geliştirilen yöntemlerden biridir. CEC, CE ve HPLC arasında melez bir tekniktir. İlk kapsamlı CEC çalışması 1987’de ortaya çıktı.22 CEC’de iki ana ayırma mekanizması vardır: tek / bağlı faz etkileşimleri ve elektroforetik hareketlilik. Nötr türler için, yalnızca bağlı faz etkileşimi göç oranlarında farklılıklara neden olurken, yük türlerinin kılcal damar yoluyla hareketi her iki ayırma mekanizmasına bağlıdır.
CEC’de kullanılan kolonlar arasında açık tüpler, paketlenmiş kolonlar, monolitler ve mikrofabrike yapılar bulunur. İlk başarılı açık tübüler CEC ayırmalarından biri, oktadesil ile modifiye edilmiş 30 mm ID kapiler kullanılarak Tsuda ve arkadaşları tarafından açıklandı.
Açık boru şeklinde, sabit faz iç duvara sabitlenir. Difüzyonu azaltmak için, kaplamada kılcal damarın içine doğru yayılan uzun kimyasal bağlar varsa, o20 mm24 kapiler ID ve 50 mm’ye yakın ID’ler kullanılması tavsiye edilir.
Kapiler üstü pencereler bu teknikle kullanılabilir ancak iç kaplamaya zarar vermemek için pencerenin nazikçe hazırlanması gerekir. Kılcal iç çapın difüzyonu azaltmak için nispeten küçük olması gerektiğinden, optik sistemlerde örnek boyutunun yanı sıra yol uzunluğundaki sınırlar nedeniyle tatmin edici olmayan sonuçlar ortaya çıkar.
Diğer bir seçenek, 100 mm’den daha küçük kapiler ID’lerin kullanılabildiği paketlenmiş kolonlardır. Paketleme, 1.525 mm çapında ters fazlı HPLC küresel partiküller olabilir. Tutucu fritler, kromatografik materyali yerinde tutmak için kullanılır. Parçacıklardan ışık saçılması nedeniyle, optik algılama tipik olarak kılcal üzerinde yapılmaz.
Bu yöntemle, paketlenmiş bölüme karşı uçlu açık bir kılcal bölüme ihtiyacınız vardır. Bağlantılar politetrafloroetilen (PTFE) büzülerek sağlanabilir. Ambalaj malzemesinin her iki ucunda mekanik olarak güçlü olan ve kolonu paketlemek / durulamak için kullanılan basınçlara dayanabilen fritler veya sinterlenmiş silika hazırlanır.
Fritler, 12215s için tipik olarak 4301C’de ısı kullanılarak sinterlenmiş silika bazlı ambalajlardır. Paketlenmiş CEC kolonları ile geliştirilmiş ayırma ümidi şu anda gerçekleştirilememiştir ve bazı araştırmacılar, silanol bazlı cam hamurunun en yüksek artıma neden olduğuna inanmaktadır.
CEC’deki mevcut araştırma, kılcal duvara sabit fazı bağlanmış, camsız, paketlenmiş kılcal damarlar olan monolit kılcal damarların kullanımını içerir. Gözenekli polimer monolitler kullanılarak, paketlenmiş bir kolonun tutulması, açık bir boru şekilli kılcalda bulunabilir. Genel olarak, CEC kararsız kalır. Frit teknolojisi güvenilir değildir ve monolitik kılcal damarlara yönelik araştırmalar halen devam eden bir çalışmadır. CEC’deki son gelişmeler, Colon ve meslektaşlarının incelemelerinde bulunabilir.
Adsorpsiyon kromatografisi nedir Elektroforez Nedir Kolon kromatografisi nedir Kromatografi nedir Kromatografik analiz nedir Kromatografik yöntemler ne demek Partisyon kromatografisi nedir