Algılama
Kullanılan algılama modları CZE ve MEKC’ye benzer. Organik çözücülerin kullanımı nedeniyle, CEC, MEKC ile karşılaştırıldığında, yaygın olarak kanıtlanmış olan MS ile arayüz oluşturmak için daha uygundur. Duyarlılık, CEC’de numune zenginleştirmesi ile artırılabilir; bu, numuneyi mobil fazdan daha az organik değiştirici içeren bir çözücü içinde basitçe çözerek elde edilebilir. Bu nedenle, enjeksiyon sırasında analitler tutulur ve kolonun başlangıcına odaklanır, böylece verimlilik kaybı olmadan daha büyük enjeksiyon süreleri kullanılabilir.
Düşük UV absorbansları nedeniyle düşük seviyede tespit edilemeyen desogestrel, tibolon ve bunların safsızlıklarının profillenmesi için benzer bir strateji uygulanmıştır. Analitlerin mobil fazdan önemli ölçüde daha az ACN içeren bir çözücü içinde çözülmesi, plaka numaralarını etkilemeden 60 saniyeye kadar enjeksiyon sürelerine izin verdi.
Elektrokinetik enjeksiyon, analitler arasındaki potansiyel ayrımından dolayı safsızlık profillemede daha az yararlıdır, ancak CEC’de, ekipmanın CEC kolonunun akış direncinin üstesinden gelmesine izin verdiği minimum enjeksiyon basıncı nedeniyle genellikle etkili hidrodinamik enjeksiyon mümkün değildir. Bu sorunun, CEC tarafından nicel safsızlık profili için çözülmesi gerekmektedir.
SON SÖZLER
Yukarıda açıklanan uygulamalardan, safsızlık profilleme alanında CE’nin gücünün, uygulanabilen çeşitli seçiciliklerde yattığı açıktır. Sadece elektroforetik olaylardan değil, aynı zamanda MEKC ve MEEKC gibi tekniklerde mevcut olan kromatografik ayırma ve bölümleme ilkesinden de yararlanılabilir.
Maddelerin CGE’de olduğu gibi boyut farklılıklarına göre ayrıştırılması da biyofarmasötikler alanında çok faydalıdır. CE, LC gibi yaygın olarak kullanılan diğer ayırma tekniklerine tamamlayıcı bir teknik olarak görülebilir ve çok sayıda bileşiği ayırma kapasitesi göz önüne alındığında, analitik bir problemin çözülmesi gerektiğinde kesinlikle her zaman akılda tutulmalıdır.
İyon kromatografi cihazı ne ise yarar
İyon kromatografisi çalışma prensibi
İyon kromatografisi nedir
Anyon analizi
3.grup katyonların analizi
3.grup anyonların analizi
5. grup katyonların analizi
2.grup katyonların analizi
KAPILLAR ELEKTROFOREZ KULLANILARAK İYON ANALİZİ
Çoğu ilaç, zayıf bazlar veya karşı iyonlu asitler olan yüklü moleküllerdir. Temel ilaçlar, karşı iyon olarak inorganik bir anyon veya organik asit ve asidik ilaçlar bir katyon içerebilir. Düzenleyici kurumlar (ABD FDA, Avrupa Farmakopesi, vb.), Farmasötik ürünlerin hem aktif hem de aktif olmayan bileşenler için kimliği, bileşimi, gücü, kalitesi ve saflığı açısından test edilmesini gerektirir. Bu, karşı iyonun belirlenmesinin, ilacın saflığının belirlenmesinin önemli bir parçası olduğu anlamına gelir.
2002 yılında Stockholm’de düzenlenen 15. Uluslararası Mikro Ölçekli Ayırma ve Analiz HPCE Sempozyumu sırasında bir tartışma grubu, ilaç şirketlerinde kapiler elektroforez (CE) kullanımına yönelik en önemli uygulamalardan birinin ilaç karşı iyonlarının belirlenmesi ve miktarının belirlenmesi olduğunu belirtti. Diğer bir uygulama, üretim sürecinden dolayı kalan izleri kontrol etmek için safsızlıkların belirlenmesidir.
Bu iyonların birçoğunun özelliklerinden biri UV geçirgen olmalarıdır, çoğu CE cihazı ise bir UV detektörü ile donatılmıştır. Bu nedenle, dolaylı UV algılama adı verilen özel bir teknik sıklıkla uygulanır.
Öncelikle dolaylı tespit ilkelerini, nasıl çalıştığını ve gereksinimlerinin neler olduğunu gözden geçireceğiz. Daha sonra, tampon bileşimi ve numune hazırlama ile ilgili hususlara odaklanacağız. Amaç, günümüzde birçok ilaç firmasında bulunan ticari olarak temin edilebilen enstrümanlar ile kullanılabilecek araçlar geliştirmektir. Ayrıca mevcut yayınları gözden geçireceğiz ve bir ek olarak, bir karşı iyon ve bir safsızlık olarak fosfat için tam bir tahlil açıklayacağız.
GİRİŞ
İyonlar, doğaları gereği oldukça yüklü türlerdir ve kapiler elektroforez (CE) ile analize kendilerini iyi verirler. Farmasötik analizlerde genellikle küçük organik ve inorganik anyonlar ve küçük katyonlar veya alifatik aminler ile ilgileniriz.
Bu teknik genellikle iyon kromatografisine (IC) alternatif olarak kullanılır. Bununla birlikte, CE, IC’ye göre bir dizi avantaj sunar: Basitlik, büyük ayırma verimliliği ve benzersiz seçicilik ile ilişkilidir. Galli1, CE’nin temel özelliklerini, küçük molekülleri karmaşık matrislerden ayırma yeteneği, 200 nm veya altında absorbansı ölçme imkanı ve düşük hacimde reaktif olarak tanımlar. Galli1 ayrıca sınırlı numune ön işlemi gerekliliğinden de bahseder: Birçok uygulama için bir seyreltme, santrifüjleme veya filtreleme adımı yeterlidir.
Altria ve ark.2, farmasötik analiz için CE’nin avantajlarının analizin hızı ve maliyeti, çözücü tüketiminde ve bertarafında azalma ve hızlı yöntem geliştirme olasılığı olduğuna işaret etmektedir. Birçok yazara göre, CE’de tespit edilebilirlik, IC veya yüksek performanslı sıvı kromatografisinde (HPLC) olduğu kadar düşük değildir.
Bu, hem optik yol uzunluğunu hem de enjekte edilen numunenin hacmini sınırlayan tipik olarak 20 ile 75 mm arasında bir iç çap ve 302100 cm bir uzunluğa sahip kılcal damarların küçük boyutundan kaynaklanır. Optik yol uzunluğu, daha büyük kılcal damarlar veya daha uzun yol uzunluğuna sahip kılcal damarlar kullanılarak artırılabilir.
Bununla birlikte, duyarlılıktaki iyileşme, ayırma verimindeki bir kayıptan etkilenir. Hassasiyet, bazı uygulamalar için bir sorun olabilir, ancak çoğu farmasötik uygulama için durum böyle değildir. IC ile karşılaştırıldığında, CE ayrıca daha küçük bir dinamik aralık ile karakterize edilir; bu nadiren farmasötik uygulamalar için bir sorundur çünkü hedef değer genellikle iyi tanımlanmıştır. Bazı yazarlar, yöntemin tekrarlanabilirlik ve sağlamlıktan yoksun olduğunu bildiriyor.
Deneyimlerimize göre, bu, özel bir tampon sistemi ve uygun yöntemler kullanılarak ve operatöre eğitim verilerek aşılabilir. CE’nin ek bir avantajının, aynı cihaz üzerinde sadece tamponları, yöntemi ve bazen de kapiler değiştirilerek farklı uygulamaların çalıştırılabileceğine inanıyoruz.
İyon analizine yönelik birçok uygulama, dolaylı algılamalı bir UV dedektörü kullanır, ancak diğer elektrokimyasal, lazerle indüklenen floresans (LIF) veya kütle spektrometresi dedektörleri açıklanmıştır.
UV saptamanın temel avantajı, ticari cihazlarda kullanılabilirliği ve hem UV emici hem de UV emici olmayan analitlerin tespit edilebilmesidir. Günümüzde elektrokimyasal dedektörler de mevcuttur; belirli arka plan elektrolitleri (BGE’ler) kullanılmalı ve dedektör mevcut CE cihazlarına uyarlanmalıdır.
Küçük iyonların analizi, farmasötik uygulamalar dışındaki birçok uygulama için yayınlanmıştır ve endüstriyel, çevresel, biyomedikal, klinik ve adli laboratuvarlarda giderek artan bir etkiye sahiptir. Örnek matrisler, basit musluk suyundan, nehir ve deniz suyu, bira ve şarap, çevresel su ve nükleer bitki suyu dahil olmak üzere Kraft siyah likörüne, ayrıca serum, idrar, plazma, beyin omurilik sıvısı ve diğerleri gibi vücut sıvılarına kadar çeşitlilik gösterir.