Enterokoklar – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Laboratuvarda, pnömokok kapsülleri, olağan boyama teknikleriyle kolayca gösterilmez, ancak “söndürme” reaksiyonu olarak bilinen serolojik bir teknikle mikroskop altında görünür hale getirilebilirler.
Quellung, “şişme” anlamına gelen Almanca sözcüktür ve polisakkarit antijenleri, bağışıklanmış bir hayvandan alınan bir test serumunda bulunan spesifik bir antikorla birleştikten sonra pnömokok veya diğer bakteri kapsüllerinin mikroskobik görünümünü tanımlar.
Bu kombinasyonun ve oluşan büyük, karmaşık molekülün çökelmesinin bir sonucu olarak, kapsül, artan yüzey gerilimi nedeniyle şişiyor gibi görünür ve ana hatları açıkça sınırlandırılır.
Kapsüler antijen ayrıca antikor kaplı lateks reaktiflerle de tespit edilebilir. Kanlı agar plakalarında üreyen şüpheli pnömokok kolonileri test edilebilir veya hastalığın ciddiyetine bağlı olarak, çözünür kapsüler antijen hastanın CSF’sinde, kanında ve idrarında bulunabilir (antijen, ancak organizmalar değil, vücuttan atılır)
Doğrudan antijen saptama testlerinin sonuçlarına bakılmaksızın, balgam, kan ve beyin omurilik sıvısı kültürleri (menenjit belirti ve semptomları olan hastalarda) her zaman yapılmalıdır. Bazı durumlarda, vücut sıvılarındaki antijen konsantrasyonu tespit edilemeyecek kadar düşüktür, ancak kültürler pozitiftir.
Pnömokoklar sıklıkla sağlıklı bireylerin üst solunum yollarının normal florasında bulunur. Balgam kültürlerindeki iyileşmeleri, tek başına pnömokok hastalığının kesin kanıtı değildir. Bu bulgu, hastanın klinik hastalığının genel tablosu ile ilişkilendirilmelidir.
Amaç
Kültürde pnömokokları tanımlamak için;
Malzemeler
% 10 sodyum desoksikolat veya sodyum taurokolat (safra çözeltisi) içeren damlalıklı şişe 1 ml besleyici sıvı içeren tüpler
Optochin diskler
Forseps
Kanlı agar plakası
Mum kavanozu
Pnömokokların ve diğer alfa-hemolitik streptokokların kanlı agar plak kültürleri
Enterococcus nedir
Enterococcus faecalis
Enterococcus faecalis nedir
Enterokok nedir
Enterococcus faecalis üredi ne demek
Enterokok gram
Enterokok hastalığı nedir
İdrarda enterokok üremesi
Prosedürler
1. Pnömokokların ve alfa-hemolitik streptokokların kanlı agar plak kültürlerini inceleyin ve koloni morfolojisindeki farklılıkları not edin. Her organizmanın bir Gram boyasını yapın.
2. İki besleyici broth tüpünün her birinde hafif fakat gözle görülür şekilde bulanık bir pnömokok süspansiyonu hazırlayın. Besin suyunda diğer alfa-hemolitik streptokoklardan iki süspansiyon yaparak tekrarlayın.
3. Süspansiyon halindeki her organizmanın bir tüpüne birkaç damla% 10 safra çözeltisi ekleyin. 15 dakikalık bir süre boyunca, süspansiyonun temizlendiğine dair kanıtlar (organizmaların parçalanması) için tüm tüpleri gözlemleyin ve her tüp için sonuçları kaydedin.
4. İşaret kaleminizle kanlı agar plağını ikiye bölmek için işaretleyin. Bir tarafa bir öze dolusu pnömokok, diğer tarafa eşit olarak alfa-hemolitik streptokok sürün.
5. Forsepsinizi hafifçe ateşleyin veya ısıtın ve bir optokin diski almak için bunları kullanın. Diski, pnömokok eklediğiniz kan plağı üzerindeki alanın ortasına yerleştirin. Forsepsi yeniden ısıtın ve alfa-hemolitik streptokok ile ekilen bölümün ortasına başka bir disk yerleştirin. Temas halinde olduğundan ve plaka ters çevrildiğinde düşmeyeceğinden emin olmak için, her diski forsepsin ucuyla agar üzerinde hafifçe bastırın (agara bastırmayın). Forsepsi yeniden ısıtın.
Not: Optochin, diske emdirilmiş bir yüzey reaktanı olan etilhidrokuprein hidroklorürün ticari adıdır. Pnömokokal hücre yüzeyleri üzerindeki etkisi safra ile benzerdir. Disk, duyarlı pnömokokları yüzey reaktanları tarafından parçalanmayan diğer streptokoklardan ayırt etmek için kullanıldığından genellikle “P-disk” olarak adlandırılır.
6. Plakayı ters çevirin ve bir mum kavanozuna koyun. Mumu yakın, kavanozun kapağını kapatın (sıkıca) ve mum alevinin yanmasını bekleyin. Kavanozu 24 saat 35 ° C inkübatörde yerleştirin. (Geniş ağızlı, vidalı kapaklı herhangi bir kavanoz, mum kavanozu görevi görebilir. Kapalı kavanozda yanan mum, oksijenin bir kısmını kullanır ve karbondioksit seviyesini artırır. Belirli bir noktada oksijen, mum için yeterli değildir.
Kavanozun içinde kalan atmosfer, vücuttan ilk çıkarıldıklarında ve yapay ortamda kültürlendiklerinde pnömokoklar gibi birçok bakteri türünün tercih ettiği artan karbondioksit gerilimini ve azaltılmış oksijen gerilimini içerir (Şekil 21.3.) Birçok klinik laboratuvarda. plakalar özel bir CO2 inkübatöründe inkübe edilir. Bir CO2 silindirinden inkübatöre akan gaz,% 5 ila% 7 CO2 düzeyini sabit tutar.
Sonuçlar
1. Pnömokokların kolonyal ve mikroskobik morfolojisine ve diğer alfa-hemolitik streptokoklara ilişkin gözlemlerinizi kaydedin.
2. Safrada çözünürlük testinin sonuçlarını tabloya kaydedin. 15 dakikalık testin sonunda her bir tüpün görünümünü burada tanımlayın.
3. Optokin disk testinin sonuçlarını tabloya kaydedin. Yorumunuzu gösteren disklerle plakadaki büyümenin görünümünü çizin.
DENEY : Enterokokların Tanımlanması
Enterokoklar, kültürde zincirler oluşturan gram pozitif koklardır ve yakın zamana kadar Streptococcus cinsinde sınıflandırılmıştır. Genetik materyallerinin bileşimi de dahil olmak üzere çeşitli özelliklerinde farklılık gösterdikleri için artık ayrı bir cins olan Enterococcus olarak sınıflandırılırlar.
Adından da anlaşılacağı gibi, enterokoklar, bebeklerin ve küçük çocukların üst solunum yollarında bulunabilmesine rağmen, esas olarak bağırsak yolunda bulunur. Hastalıktaki birincil rolleri idrar yolu enfeksiyonu, enfektif endokardit (viridans grubu streptokoklar gibi) ve yara enfeksiyonları, özellikle de testinal içerikle kontamine olanlar olarak rol oynamaktadır.
Laboratuvarda kolonileri bir şekilde B grubu streptokoklara benziyor. Bu organizmadan ayırt edilmeleri gerekir çünkü belirli vücut bölgelerinde bulunmalarının farklı bir anlamı vardır. Örneğin, hamile bir kadının genital sistem örneğinden termine yakın bir zamanda izole edilen enterokoklar basitçe bağırsak yolundan kontaminasyonu temsil edebilirken, aynı örnekten grup B streptokokların izolasyonu fetus için potansiyel bir tehlikeyi temsil eder.
Enterococcus faecalis, enterokok enfeksiyonu olan kişilerden izole edilen en yaygın türdür, ancak başka bir tür olan Enterococcus faecium, ciddi enfeksiyonları olan hastanede yatan hastalardan daha sık izole edilmektedir.
Bu organizma, bu türün bazı türlerini tedavi etmek için mevcut tek ilaç olan vankomisin de dahil olmak üzere hemen hemen tüm antimikrobiyal maddelere karşı oldukça dirençlidir. Bu ajana dirençli enterokok suşları, vankomisine dirençli enterokoklar veya VRE olarak adlandırılır. VRE ile kolonize olmuş veya enfekte olmuş hastalar, organizmanın başkalarına bulaşmasını önlemek için hastanede özel önlemlerle tedavi edilir.
VRE’nin neden olduğu enfeksiyonların tedavisi önemli bir klinik zorluktur. İlaç firmaları yeni, etkili ilaçlar geliştirmek için çalışsalar da, bunlara karşı mikrobiyal direnç hızla gelişmektedir. E. faecalis dahil diğer enterokok türlerinin bazı suşları da vankomisine dirençlidir, ancak henüz E. faecium suşları ile aynı ölçüde değildir.
Enterococcus faecalis Enterococcus faecalis nedir Enterococcus faecalis üredi ne demek Enterococcus nedir Enterokok gram Enterokok hastalığı nedir Enterokok nedir İdrarda enterokok üremesi