Bilgisayar destekli mikroskopi cihazları, sitologların eğitimine yardımcı olarak ve kalite kontrol verilerini kaydetmek için kullanılmıştır, ancak henüz çoğu laboratuvarda rutin olarak kullanılmaya başlanmıştır. Telepatoloji ve telekonferans, coğrafi olarak uzak birden çok kullanıcı arasındaki gerçek zamanlı bağlantılardan yararlanarak eğitim, meslektaş veya uzman incelemesi ve kalite değerlendirmesi için etkileşimli istişarelere olanak tanır.
Yardımcı Teknikler
Sitomorfolojik değerlendirme bazen oldukça öznel bir süreçtir ve bu nedenle gözlemci içi ve gözlemciler arası yeniden üretilebilirlikteki farklılıklara duyarlıdır. Bunu daha titiz bir şekilde rafine etme ve nicelendirme girişimleri, değişen derecelerde başarı ile gerçekleştirildi.
Akış sitometrisi, genellikle DNA analizi veya immünofenotipleme amaçları için süspansiyon içindeki hücrelerin otomatik olarak değerlendirilmesini içerir. Mikroflorimetri, etiketli çekirdeklerdeki floresan aktivite miktarını değerlendirmek için bir alandaki tek tek hücrelere odaklanmayı sağlar.
Sitogenetik analiz, bazıları belirli tümörlerin karakteristiği olan kromozomal anormallikleri tespit eder, örn. sinovyal sarkomda t (x: 18), Ewing tümöründe t (11). Bununla birlikte, neoplazmaların çoğu, bu tür tipik tutarlı translokasyonlar göstermez.
Gümüş lekeli nükleolar düzenleyici bölgeler (AgNOR’lar) çoğu malign çekirdekte artmıştır. Maalesef, iyi huylu ve kötü huylu koşullar arasındaki örtüşme genellikle büyüktür.
Tarama ve transmisyon elektron mikroskobu, ışık mikroskobu ile ayırt edilemeyen yararlı ultrastrüktürel detayları belirleyebilir, bu da hücre farklılaşmasının daha hassas bir şekilde sınıflandırılmasını sağlar, örn. yoğun çekirdek nörosekretor granülleri, sıkı bağlantılar, tonofilamentler, vb.
“In situ hibridizasyon teknikleri”, viral nükleer materyali tanımlamak ve tümörlerde onkojen aktivasyonunu saptamak için kullanılabilir. Konfokal lazer tarama mikroskobu, hücrelerin üç boyutlu mikrotopografisini yeniden yapılandırmak için daha fazla manipüle edilebilen dijital görüntüleri işler. Özellikle kalın preparatlar için uygundur ve floresan ürünler ölçülebilir.
Lazer tarama sitometrisi, akış sitometrisinin özelliklerini çok renkli florokromlarla etiketlenmiş hücrelerin statik görüntü analiziyle birleştiren hibrit bir tekniktir. Hem geleneksel hem de sıvı bazlı sitopreparasyonları kullanarak DNA ploidisini değerlendirebilir ve floresan in situ hibridizasyon (FISH) yöntemlerini birleştirebilir.
Lazer yakalama mikrodiseksiyon teknikleri, bir sitoloji veya histoloji slaydından seçilen hücrelerin nispeten saf bir alt popülasyonunun seçilmesini sağlar. Düşük enerjili bir kızılötesi lazer, özel bir plastik yapıştırıcıyı ilgilenilen seçilen hücrelere yaymak için kullanılır ve daha sonra daha fazla çalışma için nazikçe kaldırılır.
Mikroskop çeşitleri ve kullanım alanları
Mikrobiyoloji Ders Notları Tıp
Işık mikroskobu
Mikroskop Çeşitleri
Histolojide kullanılan mikroskop türleri
İşık mikroskobu nedir
Genel mikrobiyoloji nedir
Hangi mikroskop almalı
Teşhis Sitolojisinde Kalite Güvencesi
Bir kalite güvence programının amacı, uygulandığı gibi teşhis sürecini değerlendirmektir. İç kalite kontrolü, belirli bir laboratuvardaki bir dizi prosedürü gösterir. Bu, devam eden eğitimi, eğitimi, laboratuvar prosedürlerinin gözden geçirilmesini ve bunların uygulanmasını, yeniden taramayı, çift taramayı ve denetimi kapsar.
Dış kalite güvencesi, bölgesel veya ulusal olarak harici bir akran grubuna karşı performans değerlendirmesini gösterir ve bu, gönüllü veya zorunlu bir akreditasyon planının parçası olabilir.
Bakteriyolojide Mikroskopi: Uygulama ve Numune Hazırlama
On yedinci yüzyılın sonlarında, Hollandalı draper ve amatör bilim adamı Antonie van Leeuwenhoek, olağanüstü kalitede küçük lensler öğüttü ve ilk kez mikroorganizmaları görselleştirdi. O zamandan beri mikroskopi klinik bakteriyolojide temel bir rol oynamaya devam etti.
Klinik bir örneğin mikroskobik incelemesi, numunelerin yeterliliğini değerlendirmeye yardımcı olabilir (aşağıdaki Balgamla ilgili bölüme bakın) ve tek başına, beyin omurilik sıvısı (BOS) gibi normalde steril olan bölgelerde bakteriyel patojenin olası doğasını hemen gösterebilir veya kan kültürleri. Tanı amaçlı bir klinik laboratuvardaki yöntemler arasında hem ışık hem de floresan mikroskopisi; Uygulamaya bağlı olarak numuneler lekesiz veya lekeli olabilir.
Işık Mikroskobu
Işık mikroskobu, üç şekilde normal iletilen ışık (parlak alan), karanlık alan ve faz kontrast mikroskobu ile kullanılabilir; bunlardan ilki açık ara en yaygın kullanılanıdır. Modern bir mikroskop, 1000 kat büyütme ve yaklaşık 0,2 mm’lik bir çözme gücü elde edebilir.
Çoğu mikroskop, gözlemcinin uygun bir açıyla eğimli göz merceklerinden, görüntülenecek nesnenin bulunduğu sahneye bakması için tasarlanmıştır. Alternatif bir düzenleme (ters çevrilmiş plak mikroskobu), konuyu aşağıdan incelemek için tasarlanmıştır. Karanlık alan aydınlatması, ışık mikroskobunun çözme gücünü etkili bir şekilde 0,2 mm’nin altına yükseltir.
Örnekler dolaylı olarak aydınlatılır, ışığı dağıtır ve karanlık bir arka plana karşı parlak görünür. Bu teknik kullanılarak, yaklaşık 0.1 mm çapa sahip spiroketler gibi bakteriler görselleştirilebilir. Faz kontrast mikroskobu, canlı lekesiz bakteri ve dokuların ince iç yapısının, çeşitli gri tonlarında görünen farklı yapıların incelenmesine izin verir.
Floresan Mikroskobu
Floresans, bir moleküle belirli bir dalga boyundaki ışık çarptığında ve daha uzun bir dalga boyunda ışık yaydığında meydana gelir. Florokromlar (floresan boyalar) görünmeyen UV ışığını emer ve görünür ışık yayar.
Bir flüoresan mikroskop, yüksek yoğunluklu ultraviyole ışık (uyarma ışığı) yayan bir cıva buharlı lambası kullanır ve bir ayna, bunu yukarıdan örneğe yönlendirir. Florokromla boyanan bakteriler bu kısa dalga boyundaki ışığı emer, daha uzun dalga boylu ışık yayar ve koyu bir arka plana karşı parlak sarı veya yeşil nesneler olarak görünür.
Floresan mikroskobu, daha düşük güç hedeflerinin kullanılmasına izin verir ve bu nedenle çok daha geniş bir numune alanı hızla taranabilir. Bu, örneğin çok yetersiz olabilecekleri bir örnekte mikobakteriler ararken önemlidir.
Mikroskopi İçin Örnekler
Bunlar iki ana tiptedir: (1) sıvı örnekleri veya swabların veya bakteri kültürlerinin kurutulmuş lekeleri, 1–2 cm çapında bir alana yayılmış standart 3 1 cam lamlar üzerine yayılır ve ısı ile sabitlenir (‘filmler’) ; ve (2) lamel altında veya özel bölmelerde incelenen sıvıların “ıslak müstahzarları”dır.
Taşıma besiyerinde bulunan swablar nemlidir ve doğrudan bir slaydın yüzeyine sürülebilirken, irin, aspiratlar, CSF, vb. gibi sıvı numunelerinin filmleri, bir öze dolusu alıp bunu ince bir şekilde yayarak yapılır. Doku örnekleri, baskı oluşturmak için slaytların yüzeyine bastırılır veya küçük hacimde pepton su içinde öğütülebilir.
Katı ortamda büyüyen bakteri kolonileri, koloniye bir öze ile dokunarak ve bunu slayt üzerinde bir damla salin içinde emülsifiye ederek incelenir, böylece tek tek hücrelerin net bir şekilde ayırt edilebilmesi için çok hafif bir süspansiyon hedeflenir.