Bağışıklık Dışı Mekanizmalar
Bunlar anormal kırmızı hücrelere neden olabilir (bu nedenle daha kısa bir ömre sahiptir). Sızdıran bir mekanik kalp kapağından geçmek gibi normal kırmızı hücrelere yönelik fizikomekanik travma, parçalanmaya ve ya intravasküler lizise ya da dalak tarafından erken geri dönüşüme yol açabilir.
Paroksismal noktural hemoglobinüri (PNH) nadir görülen bir kazanılmış hematolojik hastalıktır. Hasta tipik olarak intravasküler kompleman aracılı hemolizden muzdariptir, bu da hemoglobinüri, demir eksikliği, aplastik krizler ve venöz tromboza yatkınlık ile sonuçlanır.
Bu, kompleman düzenleyici proteinlerde eksik hücreler üreten ve kırmızı hücre zarının kompleman yoluyla parçalanmaya karşı artan duyarlılığına yol açan bir kök hücre bozukluğudur. Geleneksel olarak tanı çeşitli testler kullanılarak konulmuştur.
En duyarlı olanları asitlendirilmiş serum testi (Hams testi) ve sakaroz lizis testidir. Bu testler şimdi büyük ölçüde CD 55 (bozunma hızlandırıcı faktör-DAF) ve CD 59 [homozigot kısıtlama faktörü-HRF/C8-bağlayıcı protein (C8bp)] yüzey moleküllerinin saptanması için akış sitometrisinin eklenmesiyle değiştirilmiştir.
Bu antijenler PNH'de azalır veya yoktur ve akış sitometrisi şu anda teşhis için mevcut olan en hassas ve spesifik araçtır. Anormallik, bu durumda beyaz ve kırmızı hücrelerde tespit edilebilir.
Mikroanjiopati Nedir
Tma nedir Tıp
Trombotik mikroanjiopati
TTP mekanizması
Trombotik trombositopenik purpura
Şiştosit Nedir
Hemolitik üremik sendrom
Trombotik mikroanjiopati nedir
Mikroanjiyopatiler
Mikroanjiyopatiler, küçük damarlardaki fibrin şeritlerinde kırmızı hücre kesilmesine neden olur ve çok sayıda parça, bazı kask hücreleri ve birkaç mikrosferosit içeren karakteristik bir kan resmi ile ilişkilidir.
Trombositopeni ve hemoliz belirteçleri (anemi, artmış retikülositler ve bilirubin) genellikle mevcuttur. Tablo 34.5'te özetlenen bir dizi mikroanjiyopati nedeni vardır. Aralarında ayrım yapan tanılama göstergeleri gösterilmiştir.
Teşhisi koymaya değer, çünkü bu koşulların tümü ciddidir ve aksi takdirde genç, formda hastaları öldürebilir, ancak çoğu zaman tedavi edilebilir. Aralarındaki doğru ayrım önemlidir, çünkü bazı kan ürünleri bazılarında potansiyel olarak tehlikelidir, bazılarında değildir ve steroidler bazılarında faydalıdır, bazılarında ise değildir.
Ek intravasküler hemoliz kanıtı Tablo 34.7'de gösterilen araştırmalardan elde edilebilir.
Tablo 34.5 Mikroanjiyopatinin Nedenleri
Bu üç geniş grup, olası tüm nedenleri içerir:
Dissemine intravasküler koagülasyon (DIC) (obstetrik problemlerde, septisemi, kanser vb. durumlarda)
Sistemik lupus eritematozus (SLE) ve diğer böbrek ve bağ dokusu bozuklukları
Trombotik trombositopenik purpura (TTP) ve hemolitik üremik sendrom (HUS)
Tablo 34.7 İntravasküler hemoliz laboratuvar araştırması
Hemoliz sırasında hemoglobin plazmaya salınır. Bu, karaciğer tarafından dolaşımdan temizlenmeden önce haptoglobin ve hemopeksin plazma proteinlerine hızla bağlanır. Hemoliz şiddetli ise haptoglobin ve hemopeksin konsantrasyonları hızla tükenir ve hemoglobinüri/emi ve methemalbuminemi saptanabilir hale gelir.
Fotometrik olarak ölçülebilen 'çamurlu-kahverengi' görünümü ile methaemalbumin, 624 nm'lik karakteristik bir absorpsiyon zirvesine sahiptir.
Serum haptoglobin ve hemopeksin seviyeleri, jel filtrasyonu ve elektroforetik, fotometrik ve immünolojik yöntemler dahil olmak üzere çeşitli yollarla ölçülebilir. Günümüzde en yaygın olarak kullanılanlar, anti-haptoglobin veya anti-hemopeksin kullanan, radyal immünodifüzyon veya Laurell roket teknikleri ile gösterime izin veren immünolojik yöntemlerdir.
İdrarda hemosiderin gösterimi Perl's Prussion mavi demir lekesi yöntemiyle yapılır. Bir idrar numunesi santrifüjlenir ve tortu bir cam lam üzerine yayılır, metanol içinde sabitlenmeden önce havada kurutulur. Tortuda bulunan ferrik demir, mikroskopta mavi lekeli granüller olarak görünen ferrik ferrosiyanür üretmek için asitleştirilmiş potasyum ferrosiyanür ile reaksiyona girer.
NOT: Kırmızı hücre etiketlemesi. 76 yaşındaki Bayan ID, çarpıntı, nefes darlığı ve bitkinlikle ilişkili tekrarlayan anemi atakları çekiyordu. Kalbi dinlerken sızıntıya işaret edebilecek üfürümler olan aort kapak replasmanı da dahil olmak üzere karmaşık kalp kapak hastalığı olduğu biliniyordu. Varfarin kullanıyordu ve kırmızı hücre allo-antikorlarına sahip olduğu biliniyordu, bu da çapraz eşleşmeyi zorlaştırıyordu.
Bir demir eksikliği resmi kırmızı hücre kaybını gösterdi, ancak kan filminde çok az parçalanma ile haptoglobini azalttı, ancak hemosiderinüri yoktu, intravasküler yıkımın önemli olup olmadığı belirsizdi. Bağırsak semptomları yoktu ve gastrointestinal sistemin tam muayenesinde kan kaybının anatomik bir nedeni yoktu. Hastanın kırmızı hücreleri bu nedenle 51Cr ile etiketlendi ve yeniden enjekte edildi.
İzotopik aktivite için günlük kan örnekleri ve gösterildiği gibi aktivite için dışkı toplandı. 1. Gün, alakasız erken kayıplara izin vermek için %100 olarak alınır. Çalışma sırasında Hb'sini korumasına rağmen, krom yarı ömrünün (T50Cr) 15 günde (normal 25-33 gün) azaldığı görülebilir.
Bu mütevazi azalma, dışkı izotop sayımlarıyla gösterilen gastrointestinal sistemden kaydedilen kayda değer kayıpla açıklanmaktadır. Kayıp açıkça değişkendir ve kalın bağırsaktaki bir anjiyodisplaziden geldiği varsayılmıştır (bunlar anatomik olarak gösterilemez).
İlk yıl boyunca birkaç elektif ve acil transfüzyona ihtiyacı vardı, ancak daha sonra hiç gerekmedi. Kan kaybının durduğu görüldü. Kalp kapakçığının değiştirilmesine gerek yoktu
Son Parça
Her zaman açıklanması zor olan bazı durumlar olacaktır ve kırmızı hücrelerin izotop etiketlemesi ile doğrudan ölçüm gerekli olabilir. Son olarak, açıkça hemolize olan ancak hiçbir neden bulunamayan bazı hastalar olacaktır. Bunların çoğu, henüz tanımlanmamış bir kırmızı hücre anatomisi veya fizyolojisi bozukluğuna sahip olacaktır.
Hemostaz laboratuvar araştırması
Vasküler bölme içindeki kan akışı, prokoagülan ve anti-oagülan aktivite arasındaki dengeye bağlıdır. Normal şartlar altında antikoagülan aktivite baskındır; bununla birlikte, kan damarlarını kaplayan endotelyal hücrelerde hasar olduğunda, lokal pıhtı oluşumu başlatılarak subendotel açığa çıkabilir.
Lokal pıhtılaşma sıkı bir fibrin pıhtısı üretirken, ilk trombosit agregasyonu bir trombosit tıkacı oluşturur. Ardından, bir pıhtı sindirim sistemi (fibrinoliz) pıhtı genişlemesini önler ve açıklığı geri kazandırır.
Artmış trombotik veya hemorajik riski olan hastaları değerlendirmek için laboratuvar incelemesi rutin olarak kullanılır. Birçok akut tıbbi durumda, normal hemostaz dengesi bozulur ve düzeltilmesi gerekir.
Ayrıca, antikoagülan aktiviteyi teşvik eden terapötik ajanların veya normal hemostazı sağlayan ajanların izlenmesi, hematoloji laboratuvarında yürütülen rutin araştırmaların bir parçasını oluşturur.
İki Gauss şeklindeki tepe için, eğer çözünürlük R, = 1 ise, tepe noktaları etkili bir şekilde ayrılacak ve yalnızca% 2’lik bir örtüşmeye sahip olacaktır. 1.5 veya üzeri bir çözünürlükle, üst üste binme olmadan mükemmel bir ayrım vardır.
Bununla birlikte, tepe şeklinde herhangi bir bozulma varsa, bu, bitişik tepeler arasında örtüşme olasılığını artıracaktır. Yukarıdaki denklemde, W, plaka numarası (N) ile ikame edilebilir; daha sonra çözünürlüğü üç temel faktör açısından ifade eden bir denklem ortaya çıkarır; seçicilik a, kapasite faktörü k ‘ve plaka numarası N olur.
Bu nedenle:
RS = (1/4) X [(a-l) / a] X [k’B / (l + k’B)] XN.
Bu üç faktör bağımsız olarak optimize edilebilir. Seçicilik faktörü, çözünürlüğün belirlenmesinde en önemli faktördür ve daha önce tanımlandığı gibi, iki bileşen için kapasite faktörlerinin oranıdır. Açıkçası a, 1’e eşit olmamalıdır, yoksa çözüm olmayacaktır.
Seçicilik, sıcaklığın (difüzyon süreçlerini etkileyen) veya mobil veya sabit fazların bileşiminin değiştirilmesiyle değiştirilebilir.
A’nın optimizasyonu genellikle deneme yanılma yoluyla elde edilir ve en iyi yöntem, kapasite faktöründe küçük bir değişiklikle iyileştirmeye izin veren mobil fazın doğasını değiştirmektir. Durağan fazı değiştirmek pratik değildir.
Sıcaklığın değiştirilmesinin iyon değişim kromatografisinde diğer kromatografik modlara göre daha belirgin bir etkisi vardır. A’daki büyük değişiklikler, kimyasal kompleksleşme gibi ikincil yollarla elde edilebilir.
K’B / (l + k r B) terimi, tutma faktörü derecesi olarak adlandırılır ve esas olarak k ’küçük olduğunda dikkate alınması gerekir. Çözünen maddelerin güçlü bir şekilde tutulduğu durumlarda, terim yalnızca küçük bir ölçüde değişir ve sonunda çözüm üzerinde göz ardı edilebilir bir etkiye sahiptir.
Laboratuvarda yapılan testler
Biyokimya laboratuvarında yapılan testler
Laboratuvar Testleri
Laboratuvar numuneleri toplama taşıma ve saklama Talimatı
Biyokimya Laboratuvarı
Dış laboratuvar sonuçları ne zaman çıkar
Yeni örnek gönderilmesi uygundur ne demek
15 günde çıkan kan tahlili nedir
Sonuç olarak, iki yakın zirveyi çözmek için elde tutma oranını artırmanın pek bir anlamı yoktur. Benzer şekilde, k ‘1’den küçükse çözünürlük hızla azalır.
Plaka numarası N, daha uzun bir kolon kullanılarak, partikül boyutunu azaltarak veya akış oranını optimize ederek (
Knox arsa). Bununla birlikte, çözünürlük (N) ‘ye bağlı olduğundan, tek başına bununla çözünürlüğü önemli ölçüde artırmak pratik olmayabilir.
Ayrılma Zamanı
Değişik parametrelerin ayırma süresi üzerindeki etkisini gözlemlemek kromatografi için değerlidir, böylece minimum sürede optimum bir ayırma elde edilebilir (ek olarak, bu yaklaşım çözücü tüketimini en aza indirecektir). Son pikin elüe edilmesi için geçen sürenin şu şekilde verildiği gösterilebilir:
t, = 16X RTx [a / (. – l)] X [(1 + k ’) 3 / kr2] X [H / u]
Bu formda denklem, diğer terimler sabitken çözünürlüğün iki katına çıkarılmasının ayırma süresinde dört kat artışa neden olduğunu göstermektedir. Denklem ayrıca k ‘1,26 olduğunda ayırma süresinin en kısa olduğunu, ancak pratik amaçlar için 1.5-5.0 aralığının optimum çözüm süresini verdiğini gösterir.
Karmaşık bir çözünen karışımı için, maksimum k ‘değeri 5 olan tüm bileşenler arasında iyi bir çözünürlük elde etmek genellikle mümkün değildir.
Tipik olarak 10’a kadar k ‘değerleri pratik bir çözüm sunar. Kapasite faktörlerini içeren terim bu denklemde önemli bir rol oynadığından, k ‘değerlerinin yayılması, gradyan elüsyonu veya birleşik sütunlar kullanılarak en aza indirilebilir.
Hazırlayıcı Ayırmalar
Analitik bir ayırmanın ölçeğini büyütmek, belirli bir bileşenin bir çözünen madde karışımından izole edilmesine ve saflaştırılmasına izin verir. Kromatografik koşullar oluştururken dikkatli olunursa, kolon performans parametrelerini düşürmeden hazırlayıcı ayırmalar gerçekleştirilebilir.
Hazırlayıcı HPLC, basitçe, ayrıştırılan bileşenlerin toplandığı herhangi bir kromatografik ayırmayı tanımlar, ancak daha çok, daha yüksek numune yüklemelerinin veya daha büyük sütunların kullanıldığı ayırmaları ifade eder. Hazırlayıcı ölçek ayırmaları için kullanılan sütunlar, boyuta göre sınıflandırılmıştır.
Örneğin, 25 X 0,46 cm’ye kadar olan kolonlar PLC-1 kategorisi olarak sınıflandırılmıştır ve bu grup, ekstra büyük numunelerin (3 mg’a kadar) uygulanabileceği analitik boyutlu kolonları içerir. Analitik cihazlarla hala kullanılabilen biraz daha büyük kolonlar (50 X 0.6-1.0 cm) PLC-2 olarak sınıflandırılmıştır ve ayırmaya bağlı olarak kapasitelerinin 25 mg’a kadar çıkacağı tahmin edilmektedir.
Daha büyük sütunlar, uzun ve dar veya kısa ve geniş olmalarına bağlı olarak PLC-3 ve PLC-4 olarak sınıflandırılır ve tipik olarak 10 g’a kadar miktarları ayırır. Analitik HPLC’de, belirli bir sabit ve hareketli faz, belirli bir akış hızı ve sıcaklığa sahip belirli bir numune için sabit bir plaka numarası (N), alıkoyma (k ‘) ve çözünürlük (R,) verecektir.
Hazırlık amaçları için, basitçe numune konsantrasyonunun arttırılması, sonunda, sütunda kurulan dengeyi bozarak bu parametreler üzerinde ciddi etkilere sahip olacaktır. Mobil faz hızının ve çözünen ağırlığın bir fonksiyonu olarak bir kolonun çözünürlüğünü göstermektedir.
Yükleme artırılarak çözünürlük azaltılır; bu, a ve k ‘değerlerinin azalmasının bir sonucu olarak ortaya çıkar. Örnek tepe noktaları için k ‘değerleri% 10’dan fazla azalma gösterdiğinde, sütunun aşırı yük durumunda olduğu kabul edilir.
Daha yüksek yüklemelerde, akış hızının çözünürlük üzerinde çok az etkisi vardır (akış hızının doğrusal olması ve türbülans oluşmaması koşuluyla). Bu önemli bir gözlemdir çünkü birim zamandaki verimi iyileştirmek için akış hızının artırılabileceği anlamına gelir.
Üretim hızı olarak da adlandırılan bu ikinci faktör, ayırmanın gerçekleştirildiği koşulları optimize ederken önemli bir husustur.
Klasik Knox grafiğinden, aşırı yüklü olmayan bir durumda bant genişlemesine katkıda bulunan kütle transfer teriminin artan akış hızı ile arttığı zaten gösterilmiştir. Sonuç olarak, üretim hızının önemli olduğu hazırlayıcı ayırmalar için, akış hızının çözünürlük üzerindeki etkisi, kütle transferinin etkisinin daha az belirgin olduğu benzer parçacıklar kullanılarak daha da azaltılabilir.
Açıktır ki, daha yüksek basınç gereksinimleri ile bağlantılı pratik problemler nedeniyle partikül boyutundaki küçültmenin bir sınırı vardır. Maksimum yükleme en iyi deneysel olarak belirlenir ve tabii ki gerekli bileşenlerin çözünürlüğüne bağlı olacaktır. Üretim hızı ile temel parametrelere ilişkin denklemler türetilmiştir.