Karmaşık reaktif şeritleri çok hassas bir manü-jelatin içindeki reaktiflerin konsantrasyonunun, jelatinin gözenek boyutunun, her katmanın kalınlığının ve her katmanın kuruma derecesinin dikkatli bir şekilde kontrol edilmesi gereken analitik katmanlar için kullanılır.
Bununla birlikte, üretildikten sonra her şerit, bir tahlili gerçekleştirmek için gereken tüm analitik adımları içerir. Önceden reaktiflerin yeniden yapılandırılmasına gerek yoktur, şerit taşınabilirdir ve haftalar veya aylarca stabil olabilir ve analistin analizi başlatmak için yalnızca numuneyi uygulaması yeterlidir.
Belirli bir süre sonra geliştirilen rengin önceden basılmış renk şemalarıyla eşleştirilmesiyle yarı nicel sonuçlar elde edilebilir. Gün ışığında veya iyi bir yapay ışıkta, normal renk görüşüne sahip deneyimli bir analist, gerçek değerin %25’i içinde sonuçlar üretmelidir.
UV veya floresan algılama ile izlenen reaksiyonlar için ve daha doğru nicelemenin gerekli olduğu durumlarda, rengi veya diğer sinyali ölçmek için bir metre gereklidir. Çoğu kuru reaktif kimyası, yaygın yansıma fotometrisi ile izlenir (Kortum, 1969); ön yüz floresansı da kullanılabilir.
Reaksiyonların İzlenmesi
Yansıtılan ışığın özelliklerinin, analistlerin aşina olduğu iletilen ve soğurulan ışığın özelliklerinden farklı olduğu, bir sanatçı, fotoğrafçı veya fizikçi dışında açık olmayabilir. Ancak boyaların ve diğer pigmentlerin (kırmızı, sarı ve mavi) ana renkleri olarak adlandırılanlar, iletilen ışığınkilerle (kırmızı, sarı ve yeşil) aynı değildir.
Bir sanat galerisinde, bir tabloya genellikle önden bakarız, tablo yukarıdan aydınlatılır. Bir tablo doğrudan önden aydınlatılırsa, yüzeyinden saçılan renksiz yansıyan ışık nedeniyle renk ve detay gözlemciye kaybolur. Yansıma fotometrisi yasalarıyla uğraşıyoruz.
Farmakovijilans ne demek
Advers reaksiyon nedir
Reaksiyon derecesi nedir
Farmakovijilans süreci
Unimoleküler tepkime Ne Demek
2. dereceden reaksiyon kinetiği
Farmakovijilans neden gereklidir
Advers etki BİLDİRİM FORMU doldurulmuş örneği
Bir reaktif şeridine düşen bir miktar ışık, yüzeyinden yansıyacaktır (speküler yansıma). Bu, analitik katmanlardaki kromoforlarla etkileşime girmediğinden, orijinden gelen ışıkla aynı özelliklere sahiptir ve bir reaksiyonu izlemek için kullanılamaz.
Bir miktar ışık analitik katmanlara girer ve şeritteki yansıma katmanı tarafından döndürülmeden önce kromoforlarla etkileşime girebilir. Analitik katmanlar içinde kromofor etkileşimi olmadan ışık saçılması ve yansıma da gerçekleşebilir.
Etkileşen ve saçılan ışığın bir karışımını içeren analitik katmanlardan (yaygın yansıma) iletildikten sonra geri dönen ışık, bir reaksiyonu izlemek için kullanılır. Ana aynasal yansıma ışınından bir açıyla döndürülen ışığın ölçülmesiyle tespit edilir.
Reaksiyondan sonra, bir numunedeki analitin konsantrasyonu, bir standardınki ile dağınık yansıyan ışığın miktarı karşılaştırılarak hesaplanabilir. İlişki şu denklem tarafından yönetilir:
- Ru 1⁄4 Rs Iu=Is
burada Ru, örneğin yüzde yansıtma, Rs, standardın yüzde yansıtma, Iu, örnekten yansıyan ışığın yoğunluğu ve Is, standarttan yansıyan ışığın yoğunluğudur.
Geçirgenlik gibi yüzde yansıtma ölçümleri konsantrasyona göre doğrusal değildir ve pratikte Williams ve Clapper (1953) gibi doğrusallaştırma algoritmaları yüzde yansıtma ölçümünü konsantrasyona dönüştürmek için kullanılır.
Bir reaksiyonun floresan ürünleri, ön yüz florimetrisi kullanılarak izlenebilir. Monokromatörler, analitik katmanlar tarafından yayılan floresan ışığı yansıyan ışıktan ayırmak için kullanılır. Reaktif şeridi içinde söndürme ihmal edilebilirse, ölçülen floresans florofor konsantrasyonuna göre doğrusaldır.
Özel Örnekler
Kuru reaktif kimyaları, yüzlerce idrar analiti, kan metaboliti ve proteini ölçmek için kullanılabilir. Bazıları tek bir analitik katman kullanılarak gerçekleştirilebilir, diğerleri birden fazla katman ve/veya fiziksel yapıların analitik katmanlara dahil edilmesini gerektirir.
Analitik katmanlar içinde immunoassay teknikleri kullanılarak hormonlar ve ilaçlar gibi analitlerin eser miktarları bile ölçülebilir. Monoklonal antikorlar ve immünometrik tahlil sistemleri kullanan sonraki gelişmeler artık yaygın olarak kullanılmaktadır.
Bunların çoğu ticari şirketler tarafından geliştirilmiştir ve patent değerlendirmeleri aynı sorunlara birçok farklı çözümün geliştirilmesini zorunlu kılmıştır: tipik olarak, antikorları katı desteklere bağlayan bağlantılarda; ve son renkli bir sinyal geliştirmek için reaktiflerin seçimi. Spesifik örneklerin bir seçimi aşağıda açıklanmıştır.
Glikoz
Glikoz, nispeten yüksek konsantrasyonda bulunması, kullanılan reaksiyonun göreceli basitliği ve diabetes mellituslu hastaların izlenmesindeki önemi nedeniyle kuru reaktif teknikleri kullanılarak ölçülen ilk biyolojik analitti. Modern glikoz yöntemleri, genellikle glikoz oksidaz enzimini kullanan enzimatik deneylere dayanır.
Tipik bir örnek, gösterilen üç katmanlı Dextrostix1 reaktif şerididir. Yüzey tabakasına, hem yayma tabakası görevi gören hem de kan hücrelerini plazmadan ayıran yarı geçirgen bir zar olan bir kan örneği uygulanır.
Numuneden gelen plazma, plazma suyu ile aktive edilen tamponlu enzim reaksiyon sistemini içeren kağıt analitik tabakasına yayılır. Analitik katman içinde, glikoz ve atmosferik oksijen, hidrojen peroksit ve glukonik asit üretmek için glikoz oksidaz tarafından harekete geçirilir.
Analitik katmanda da bulunan peroksidaz varlığında, hidrojen peroksit, görünür bir renk değişikliği üretmek için bir redoks göstergesini oksitler.
Plastik destek katmanı aynı zamanda yansıtıcı bir katman görevi görür ve kan hücreleri yüzeyden silindikten sonra oluşan renk, görsel olarak (önceden basılmış bir renk şemasıyla karşılaştırarak) veya bir şeker ölçer kullanılarak üstten okunabilir. .
Glikoz için bu basit reaktif şeridine birçok alternatif geliştirilmiştir, örn. Fuji1 şeridi, yayılan ve analitik katmanlar arasında beyaz pigment titanyum dioksit içeren maskeleyici ve yansıtıcı bir katman içerir.
Destek tabakası yansıtıcı plastikten ziyade şeffaftır ve renk değişimi aşağıdan okunur. Bu, kan hücrelerini şeritten silme ihtiyacını ortadan kaldırır.
Alanin Aminotransferaz
Analitik sistemler daha karmaşık olmasına rağmen, birçok plazma enzimi kuru reaktif teknikleri kullanılarak ölçülebilir, çünkü enzimler matrislerden kolayca yayılmayan büyük moleküllerdir.
Ayrıca, enzimlerin ölçümü sıklıkla kendileri enzimatik olan çok aşamalı reaksiyonlara dayanır. Bu nedenle, hem enzim reaktiflerinin hem de kofaktörler gibi diğer katılan reaktiflerin dikkatli üretim kontrolü gereklidir.
Enzim analizi için bazı kuru reaktif katmanları, serum enzimlerinin bir şeridin reaktif katmanlarına girmesine izin veren açık kafeslere sahiptir, örn. Walter ve ark. (1983a, 1983b), diğerleri ise enzimleri bir slaytın yüzey tabakasında tutan kapalı kafeslere sahiptir.