Mikrobiyal enfeksiyonlarda olduğu gibi, mantar enfeksiyonlarının teşhisi, klinik gözlem ve laboratuvar araştırmasının bir kombinasyonuna bağlıdır.
Yüzeysel ve deri altı enfeksiyonlar sıklıkla tanıyı düşündüren karakteristik lezyonlar üretir, ancak durumun böyle olmadığı durumlarda, klinik belirtiler diğer koşullarınkileri taklit ettiğinden veya lezyonların görünümü önceki tedaviyle değiştirilmiş olduğundan laboratuvar testleri önemlidir.
Teşhis olarak sistemik mantar enfeksiyonunun düşünüldüğü çoğu durumda, klinik tablo spesifik değildir ve çok çeşitli enfeksiyonlardan, altta yatan hastalıklardan veya tedavi komplikasyonlarından kaynaklanabilir.
Mantar enfeksiyonlarının başarılı laboratuvar tanısı, büyük ölçüde araştırma için yeterli örneklerin toplanmasına bağlıdır. Ayrıca uygun mikrobiyolojik, serolojik ve histopatolojik test prosedürlerinin seçimine de bağlıdır.
Bunlar bir hastalıktan diğerine farklılık gösterir ve enfeksiyonun bulunduğu yerin yanı sıra mevcut semptomlara ve klinik belirtilere bağlıdır. Laboratuvar araştırmalarının sonuçlarının yorumlanması bazen güvenle yapılabilir, ancak bazen bulgular yardımcı olmayabilir ve hatta yanıltıcı olabilir. Bu durumlarda klinisyen ve laboratuvar arasındaki yakın ilişki özellikle önemlidir.
Mantar enfeksiyonlarının teşhisine yönelik laboratuvar yöntemleri, üç geniş yaklaşıma dayanmaktadır: klinik materyalde etiyolojik ajanın mikroskobik tespiti; kültürde izolasyonu ve özdeşleşmesi; ve bir mantar hücresi bileşeni veya metabolik ürün gibi patojene veya varlığının başka bir belirtecine karşı serolojik bir yanıtın saptanmasıdır.
Klinik materyalde fungal DNA’nın saptanmasına dayanan yeni tanı prosedürleri şu anda geliştirilmektedir, ancak klinik laboratuvarlarda henüz önemli bir etkisi olmamıştır. Takip eden bölümlerde, mantar enfeksiyonları için mevcut tanı prosedürlerinin değeri ve sınırlamaları gözden geçirilmiştir.
Mikroskobik Muayene Nedir
KBB muayene aletleri isimleri
KBB endoskopi Cihazı
Boğaz endoskopisi neden yapılır
Endoskopik muayene yöntemleri nelerdir
Makroskobik Muayene
Burun endoskopisi neden yapılır
Kbb muayenesi nedir
Mikroskobik Muayene
Klinik materyalin doğrudan mikroskobik incelemesi, genellikle mantar enfeksiyonlarının laboratuar tanısında yardımcı olur. Çeşitli yöntemler kullanılabilir: boyanmamış ıslak preparasyonlar açık alan, karanlık alan veya faz kontrastlı aydınlatma ile incelenebilir veya kurumuş smearler boyanabilir ve incelenebilir.
Bazı durumlarda, doğrudan mikroskobik inceleme, kültürde büyüme belirginleşmeden çok önce, geçici veya kesin bir teşhisin yapılmasına izin verecektir. Diğer durumlarda, bir klinik örnekte fungal elementlerin gözlemlenmesi, özellikle organizma yaygın bir kontaminant ise, kültürde mantarın izole edilmesinden daha önemlidir.
Mantar hücreleri bakteri hücrelerinden daha büyük olmasına rağmen, bu organizmalar genellikle klinik örneklerde çok daha az sayıda bulunur. Bu nedenle, incelenmeden önce bir numunedeki mantar elementlerinin konsantrasyonunu artırmak genellikle gereklidir.
Sıvılar ve salgılar santrifüjlenmeli ve birikinti mikolojik araştırma için saklanmalıdır. Balgam gibi diğer örnekler santrifüjden önce sindirilmelidir.
Doğrudan mikroskobik inceleme için numune hazırlamanın birkaç yöntemi vardır. Gram lekeli yaymalar genellikle sıvı ve salgılardaki mantar hücrelerini tespit etmek için kullanılır. Hindistan mürekkebi, kapsüllenmiş Cryptococcus neoformans hücrelerini ortaya çıkarmak için beyin omurilik sıvısı (BOS) tortusunun negatif boyanması için yararlıdır.
Hem Giemsa boyası hem de Wright boyası, kemik iliği preparatlarında veya kan yaymalarında Histoplasma capsulatum hücrelerini saptamak için kullanılabilir. Papanicolaou boyası, mantar elementlerini tespit etmek için balgam veya diğer solunum yolu numunelerinde kullanılabilir.
Deri kazıntıları ve diğer dermatolojik numuneler, mantar hücrelerine zarar vermeden numuneyi temizleyen %10-20 potasyum hidroksit solüsyonu ile sindirimden sonra incelenmelidir. Bu numuneler ıslak bir preparasyon olarak lekesiz olarak incelenebilir.
Kalkoflor beyazı gibi kimyasal parlatıcıların eklenmesi, bir floresan mikroskobu altında incelendiğinde, bunların ve balgam gibi diğer klinik materyallerin ıslak preparasyonlarında mantar elementlerinin ortaya çıkarılmasına yardımcı olur. Mantar unsurları, koyu bir arka plana karşı parlak bir şekilde boyanmış görünüyor.
Bazı durumlarda, sıvıların veya diğer klinik materyallerin doğrudan mikroskobik incelemesi, deri altı veya sistemik mantar enfeksiyonu tanısını koyabilir. Örnekler, CSF’de kapsüllenmiş Cryptococcus neoformans hücrelerinin veya periferik kan yaymalarında Histoplasma capsulatum hücrelerinin saptanmasını içerir.
Bununla birlikte, daha sıklıkla, mikroskobik inceleme temelinde yalnızca derin mantar enfeksiyonunun geçici bir teşhisi yapılabilir. Bununla birlikte, bu, kültürde daha sonra elde edilen bir organizmanın bir kontaminant mı yoksa bir patojen mi olduğunu belirlemeye yardımcı olabilir ve doğrudan yaymada görüntülenen organizmaları kurtarmak için en uygun kültür koşullarının seçilmesine yardımcı olabilir.
Doku kesitlerinin histopatolojik incelemesi, deri altı ve sistemik mantar enfeksiyonlarının tanısını koymada en güvenilir yöntemlerden biridir.
Bununla birlikte, bir mantar patojeninin dokuda kolaylıkla tanınabilmesi, sadece bolluğuna değil, aynı zamanda görünüşünün ayırt ediciliğine de bağlıdır. Birçok mantar, hematoksilen ve eozin ile zayıf boyanır ve bu yöntem tek başına dokudaki mantar elementlerini ortaya çıkarmak için yetersiz olabilir.
Metenamin-gümüş (Grocott veya Gomori) ve periyodik asit-Schiff dahil olmak üzere mantar organizmalarını tespit etmek ve vurgulamak için bir dizi özel boya vardır. Mukikarmin, Cryptococcus neoformans kapsülünü boyamak için kullanılabilir.
Bu boyama yöntemleri, dokudaki fungal elementlerin varlığının ortaya çıkarılmasında faydalı olmasına rağmen, nadiren ilgili kesin mantar cinsinin tanımlanmasına izin verir. Örneğin, pigmente olmayan dallanma, septat hifinin tespiti, Aspergillus enfeksiyonunun tipik bir örneğidir, ancak aynı zamanda, Fusarium ve Scedosporium türleri de dahil olmak üzere çok sayıda daha az yaygın organizmanın karakteristiğidir.
Benzer şekilde, küçük, tomurcuklanan mantar hücrelerinin tespiti nadiren spesifik bir teşhise izin verir. Örneğin Histoplasma capsulatum ve Blastomyces dermatititidis’in doku şeklindeki hücreleri benzer görünebilir ve kapsüllenmemiş Cryptococcus neoformans hücreleriyle karıştırılabilir.
Bu problemin üstesinden gelmek için dokudaki mantar organizmalarının spesifik tanımlanması için bir takım yöntemler geliştirilmiştir. Hem monoklonal hem de poliklonal immünoperoksidaz ve immünfloresan boyama reaktifleri bazı mantarlar için mevcuttur ve atipik mantar elementlerinin tanımlanmasını ve az sayıda organizmanın saptanmasını kolaylaştırabilir.
Şu anda araştırılmakta olan bir dizi teknik, DNA problarının mantar ajanının nükleik asidine, ya doğrudan lam üzerinde (in situ hibridizasyon) ya da bir test tüpü içinde spesifik bağlanmasını içerir.
Kültür
Kültürde izolasyon, çoğu patojenik mantarın tanımlanmasına izin verecektir. Bu organizmaların çoğu beslenme gereksinimlerinde titiz değildir ve klinik örneklerden bakteri izolasyonu için kullanılan besiyerinde büyüyecektir.
Bununla birlikte, bu ortamlarda büyüme yavaş olabilir ve mantar tanımlamada kullanılan sporların ve diğer yapıların gelişimi zayıf olabilir. Bu nedenlerle çoğu laboratuvar, mantarları izole etmek için Sabouraud dekstroz agar gibi belirli bir besiyeri kullanır.
Mantar kültürü için gönderilen birçok klinik örnek bakteri ile kontaminedir ve mantar kültürü ortamına antibakteriyel antibiyotiklerin eklenmesi esastır. Dermatofitler veya dimorfik mantarlar izole ediliyorsa, daha hızlı büyüyen mantarların aşırı üremesini önlemek için besiyerine sikloheksimid (actidion) da eklenmelidir.