Doğal Antikoagülanlar
İn vivo olarak sürekli düşük dereceli pıhtılaşma aktivasyonu vardır ve aktifleştirilmiş pıhtılaşma faktörlerinin doğal inhibitörleri vardır. Bu faktörlerin eksikliği, protrombotik bir eğilim ile ilişkili olabilir.
Anti-trombin III
Anti-trombin III, in vivo trombinin ana düzenleyicisidir. İmmünolojik tekniklerle ölçüldüğü gibi normal niceleme üreten çeşitli moleküler formlar tanındığından, fonksiyonel deneyler tercih edilir. Çoğu fonksiyonel analiz, eklenen heparin varlığında faktör Xa'nın trombininin nötralizasyonunu ölçer.
Proteinler C ve S
Trombin oluşumunu takiben Protein C aktive olur. Trombin, endotel hücrelerinin yüzeyindeki trombomoduline bağlanır ve protein C'yi bağlar ve aktive eder. Bu durumda trombin prokoagülan aktivitesini kaybeder ve artık fibrinojeni fibrine dönüştüremez. Aktive protein C, faktör V ve VIII'i parçalayarak, daha fazla trombin oluşumunu sınırlayarak doğal bir antikoagülan görevi görür.
Protein S, aktive protein C için bir kofaktör görevi görür. Bir diğer önemli bulgu, faktör V molekülünün bir kusuru olan faktör V Leiden mutasyonu nedeniyle aktive protein C direncinin oluşabileceğidir.
Bu, artan venöz tromboz riski ile ilişkilidir ve bilinen en yaygın kalıtsal protrombotik risk faktörüdür. Bu faktörü dışlamak için protrombotik öyküsü olan hastalarda PCR taraması önerilir. G2020 protrombin mutasyonu için PCR taraması da trombofili taramasının bir parçası olarak rutin olarak gerçekleştirilir.
Fibrinoliz
Fibrinoliz, fibrin pıhtısının parçalanması ile sonuçlanır ve vasküler endotelden doku tipi plazminojen aktivatörü (tPA) ve ürokinaz tipi plazminojen aktivatörü (uPA) salınımı ile başlatılır. Bu aktivatörler, plazminojeni, fibrini parçalayan aktif enzim plazmine dönüştürür.
Ayrıca, plazmin için doğal bir inhibitör, II anti-plazmin ve endotel tarafından salınan, serbest tPA ve uPA'ya bağlanan ve bunları inaktive eden plazminojen aktivatör inhibitörü tip 1 (PAI-1) vardır.
Antikoagülan ilaçlar listesi
Antikoagülanlar
Antikoagülan ilaçlar hangileridir
Antikoagülan nedir
Antikoagülan ilaçlar nedir
Heparin
Antikoagülan ne ise yarar
Antikoagülan tedavi
Aktif pıhtılaşma belirteçleri
Son birkaç yılda hiper pıhtılaşabilirliğe ve tespiti için mevcut testlere artan bir ilgi olmuştur. Pıhtılaşma aktivasyon belirteçleri için tahlillerin, tromboza yatkın klinik durumları olan hastaları karakterize etmek, akut trombotik olayların teşhisine yardımcı olmak ve antikoagülan tedaviyi izlemek dahil olmak üzere çeşitli potansiyel kullanımları vardır.
Bu, pıhtılaşma aktivasyonu sırasında üretilen pıhtılaşma zimojenlerinin enzimatik formlarının ölçülmesiyle veya dolaylı olarak zimojenler aktive edildiğinde oluşturulan aktivasyon peptitlerinin ölçülmesiyle gerçekleştirilebilir. Ek olarak, doğal olarak oluşan plazma inhibitörleri tarafından enzim inaktivasyonundan kaynaklanan kompleksleri ölçerek başka bir yaklaşım da mevcuttur.
Faktör IX ve X aktivasyon peptitleri gibi pıhtılaşma faktörlerinin aktivasyonundan üretilen fragmanları ölçmek için bir dizi immünolojik test mevcuttur. Protrombinin trombin aracılı aktivasyonundan kaynaklanan protrombin fragmanı 1 + 2 ve fibrinojen zincirinden trombin tarafından ayrılan fibrinopeptit A, sırasıyla trombin oluşumunun ve aktivitesinin göstergeleridir.
Protein C aktivasyon peptitini veya aktive protein C'yi ölçmek için immünoanalizler, trombin ve trombomodulin fonksiyonunun indeksleri olarak kabul edilebilir.
Trombin, anti-trombin gibi enzim ile inhibe edilen komplekslerin ve aktive protein C'nin protein C inhibitörü ve anti-tripsin tarafından inhibisyonundan kaynaklanan diğer komplekslerin ölçümü için immünolojik testler de mevcuttur.
Şu anda, pıhtılaşma aktivasyon belirteçlerinin yararlılığı, hiper pıhtılaşmayı değerlendirmek için akut trombotik olayların teşhisinden daha iyidir. İkinci amaç için, D-dimer gibi fibrinoliz aktivasyon belirteçlerini ölçmek daha etkilidir.
Otomatik Pıhtılaşma
Teknolojideki son gelişmeler, pıhtılaşma taraması için otomatik aletlerin kullanıma girmesinin habercisi olmuştur. İş yükündeki artış, daha fazla özgüllük talebi ve el emeğindeki azalma, çoğu laboratuvarın artık yarı veya tam otomasyona sahip olmasını sağlamıştır.
Sonuçlar enstrümanlar arasında büyük farklılıklar gösterse de çoğu manuel yöntem enstrümantasyon için değiştirilebilir. Faktör testleri de dahil olmak üzere tüm rutin pıhtılaşma tarama testleri otomatik cihazlarda analiz edilebilir.
Daha gelişmiş cihazlar, özel pıhtılaşma testleri için kromojenik deneylere izin verir. İlk araçlar, fibrin pıhtısının elektrotlar aracılığıyla tespit edilmesini içeriyordu. Bir elektrot reaktifin/plazmanın içinde ve dışında hareket eder. Kalsiyum eklenir ve ilk fibrin pıhtısı oluşur oluşmaz elektrik devresi tamamlanır ve zamanlayıcı durdurulur.
Günümüz araçlarının çoğu, foto-optik uç nokta algılamayı içerir. Pıhtılaşma süreci gerçekleştikçe sabit bir ışından saçılan ışık artar. Pıhtılaşma süresi, örneğin saçılan ışık yoğunluğunun önceden ayarlanmış yüzdesine ulaşması için gereken süre olarak pıhtılaşma eğrisinden elde edilir.
Tam enstrümantasyon, robotik numune alma, numunelerin barkod okuması, otomatik reaktif dağıtıcılar ve bir veri yönetim sistemi içerir. Bununla birlikte, son nokta saptama yöntemine bağlı olarak farklı cihazlar arasında pıhtılaşma süreleri değiştiğinden, otomasyondan elde edilen sonuçlar kesin olarak karşılaştırılabilir değildir. Bu nedenle, manuel teknikler hala referans yöntemler olarak kullanılmaktadır.
SİTOGENETİK
Kromozom bantlama ve analizi
Sitogenetik, sağlık ve hastalıkta insan kromozomlarının incelenmesini içerir. İnsan çekirdeğinde genetik materyal (DNA), proteinlere kimyasal olarak bağlıdır ve kromozom adı verilen farklı yapılara paketlenir.
Tipik olarak, insan hücreleri, her bir kromozom çiftinin bir üyesi her bir ebeveynden kalıtılan toplam 46 kromozom veya 23 çift barındırır. Her hücrenin DNA'sı, her hücre bölünmesinde genetik materyalin her iki yavru hücreye doğru şekilde ayrılmasını kolaylaştırmak için kromozomlar halinde paketlenir.
İnsan gamet hücreleri, spermler ve yumurtalar üretildiğinde, mayotik hücre bölünmesi yoluyla kromozom sayısı 23'e yarıya indirilir, böylece bir sperm ve bir yumurtanın füzyonuyla yeni bir zigot oluştuğunda, hücreler doğru kromozom sayısına sahip olmalıdır.
Tarihsel olarak 1956, modern insan sitogenetiğinin başlangıcı olarak kabul edilir, çünkü bu zamandan önce normal insan hücresindeki kromozom sayısının 48 olduğu düşünülürdü.
Sitogenetik analiz, kromozom anormalliklerinin saptanmasını sağlar. Bu anormallikler sayısal (fazla veya eksik kromozomlar) veya yapısal (delesyonlar, duplikasyonlar, translokasyonlar vb.) olabilir. Kromozom preparatları, periferik kan, amniyotik sıvı, deri veya kemik iliği dahil olmak üzere çeşitli vücut dokularından hazırlanabilir ve analiz edilebilir.
“Küçük yuvarlak yapılı virüs” veya SRSV terimi, virüsün elektron mikroskobunda görünmesi ile ilgilidir. Virüs partiküllerinin çapı 30-35 nm’dir ve şekilsiz bir yüzeye ve düzensiz dış hatlara sahiptir. Norovirüsler, Caliciviridae ailesi içinde sınıflandırılır.
Pek çok farklı suş vardır ve bunlar iki geniş genogrup oluşturur. Ayrıca, Japonya’daki Sapporo’daki bir fidanlıktaki salgından adını alan, sapovirüs adı verilen, daha uzaktan ilişkili üçüncü bir genogrubu da var.
Sapovirüsler, virüs partiküllerinin yüzeyinde görülen fincan benzeri çöküntülerle klasik bir kalisivirüs görünümüne sahiptir. Bu kupa benzeri depresyonlar norovirüslerde yaygın olarak görülmez. Norovirüs, calicivirüs ve ayrıca astro-virüsün elektron mikroskobu ile ayrıştırılması zor olabilir ve deneyimli bir mikroskobu gerektirir.
Norovirüsler kültürlenemez ve çoğu teşhis elektron mikroskobu ile yapılır. Bununla birlikte, norovirüsler yalnızca semptomların başlamasından sonra yaklaşık 48 saat tespit için yeterli sayılarda atılır ve bu nedenle uygun örneklerin alınması genellikle zordur.
Noro-virüsler, rotavirüs ve adenovirüsler gibi büyük sayılarda atılmama eğilimindedir ve bu kadar ayırt edici morfolojik özelliklere sahip olmadıklarından, tespit edilmesi ve tanımlanması teknik olarak çok daha zordur. Bu nedenle, noro-virüsler büyük ölçüde eksik rapor edilmektedir. Elektron mikroskobu, gıda veya çevre örneklerindeki virüsü tespit edebilecek kadar hassas değildir.
Norovirüsler için PCR tahlilleri geliştirilmiştir, ancak şu anda yalnızca özel laboratuvarlarda mevcuttur. Bu tahliller çok hassastır: semptomların başlamasından sonraki bir haftaya kadar klinik numunelerde virüsü tespit edebilirler ve yiyecekleri ve çevresel numuneleri test etmek için kullanılabilirler.
Ancak norovirüsün tüm suşlarını tespit etmezler. 2003 yılında, çok çeşitli genogrup 1 ve genogrup 2 norovirüsleri tespit eden ticari ELISA kitleri kullanıma sunuldu. Bunlar elektron mikroskobuna benzer hassasiyete sahiptir, ancak kullanımı çok daha kolaydır, daha fazla sayıda örneği işleyebilir ve norovirüslerin test edilmesinde önemli bir etkiye sahiptir.
Norovirüs grubu içinde büyük bir farklılık vardır ve ELISA’lar tüm suşları tespit etmez. Böylelikle elektron mikroskobu tanıda rol oynamaya devam edecek.
Diğer Enfeksiyonlar
Elektron mikroskobu, diğer virüslerin, özellikle bazı hepatit virüslerinin, papovavirüslerin ve parvovirüs B19’un keşfinde önemli bir role sahipti. Diğer testler şimdi büyük ölçüde tanı için elektron mikroskobunun yerini almıştır.
Hepatit virüsleri Mikrobiyoloji
Hepatit A
Hepatit Çeşitleri pdf
Hepatit tedavisi
Hepatit D
Hepatit A virüsü
Kronik hepatit Nedir
Hepatit B
Hepatit Virüsleri
Hepatit A’ya neden olan virüs, 1972’de gönüllü çalışmalara katılan hastaların dışkı örneklerinin immün elektron mikroskobu ile keşfedildi. Bununla birlikte, virüs atılımının çoğunun hastalığın prodromal aşamasında meydana geldiği çabucak gösterildi ve tanı artık esas olarak hepatit A’ya özgü IgM antikorunun saptanmasıyla yapılmaktadır.
Tanı için kullanılmamasına rağmen, enterik olarak bulaşan diğer virüs olan hepatit E’nin bir kalisivirüs morfolojisine sahip olduğunu ortaya çıkaran elektron mikroskobiydi. Hepatit E Birleşik Krallık’ta yaygın olarak görülmez, ancak dünyanın gelişmekte olan bölgelerinde su kaynaklı büyük salgınlarla ilişkilendirilmiştir ve enfeksiyon hamile kadınlarda özellikle şiddetlidir.
Hepatit B enfeksiyonunun tanısında elektron mikroskobunun en yararlı olduğu yer. Viral partiküller ve viral antijenler, özellikle hepatit B yüzey antijeni, serumda uzun süre mevcuttur. Tam virüs partikülleri tespit edilirse teşhis kolaylıkla yapılabilir, ancak genellikle sadece 22 nm virüs kaplama proteini küreleri (yüzey antijeni) görülebilir.
Yüzey antijeninin serumdaki diğer arka plan materyalinden ayırt edilmesi zordur. Duyarlılığı artırmak ve tanımlamayı kolaylaştırmak için, hastanın serumu genellikle bir IEM testinde spesifik bir anti-serum ile karıştırılır, bu çok sayıda numuneyi test etmek için uygun değildir ve seçici olarak kullanılması gerekir.
Parvovirus B19
Serum parvovirüs B19 ilk kez IEM tarafından hepatit B aranırken keşfedildi. Daha sonra B19, sıklıkla ‘tokatlanmış yüz sendromu’ olarak da bilinen çocukluk çağı yaygın bir döküntü enfeksiyonu olan eritema infectiosum’un etiyolojik ajanı olarak tanımlandı.
Gebelikte enfeksiyon fetüse zarar verebilir. Orak hücreli anemi gibi hematolojik bozuklukları olan hastalarda ciddi aplastik krize de neden olabilir. B19 enfeksiyonunun laboratuar doğrulaması, bu hastaların yönetimini önemli ölçüde etkileyebilir.
Artık rutin tanı için kullanılmasa da, parvovirüs B19 enfeksiyonu testleri arasındaki çelişkili sonuçlar (örn. Pozitif PCR, ancak negatif IgM sonucu) elektron mikroskobu ile hızla çözülebilir.
Beyin
Herpes ensefalitinin tedavisi için antiviral ilaçlar ilk kez kullanıma sunulduğunda, beyin materyalinin negatif boyanmış süspansiyonlarında herpes virüsü tespit etmek için girişimlerde bulunuldu. Erken antiviral ilaçlar aşırı derecede toksik olduğu için hızlı ve doğru teşhis önemliydi.
Bununla birlikte, elektron mikroskobu özellikle hassas olmadı ve kısa süre sonra yerini floresan mikroskobu ve ardından PCR teknikleri aldı. Subakut sklerozan panensefaliti olan hastaların beyin dokusunun ince kesitlerinde kızamık virüsünün paramiksovirüs heliksi tespit edilmiştir.
İlk insan polimavirüsü JC, progresif multifokal lökoensefalopatili hastaların beyin dokusunun ince kesitlerinde keşfedildi. Elektron mikroskobu, bu koşulların her ikisinin de etiyolojisini belirlemek için yararlı olmasına rağmen, floresan teknikleri ve PCR tahlilleri, beyin materyalini incelemek için daha hassastır.
İdrar
İdrar örneklerinde virüs bulma girişimleri karışık başarıya ulaştı. BK virüsü olarak bilinen ikinci bir insan poliomavirüsünün keşfinden elektron mikroskobu sorumluydu. Bu virüs genellikle transplant hastaları enfekte eder ve idrarla atılır.
Hücre kültürlerinde çok yavaş büyür ve elektron mikroskobu tanı için son derece yararlı olmuştur. PCR tahlilleri geliştirilmiştir ve artık teşhis amacıyla kullanılan olağan yöntemdir. Herpesvirüs grubunun bir üyesi olan sitomegalovirüs (CMV) de idrarla atılır, ancak yalnızca çok büyük sayıda virüs partikülü mevcut olduğunda elektron mikroskobu ile tespit edilir.
Hem CMV hem de BK virüsü enfeksiyonlarının semptomları organ reddini taklit edebilir. Viral bir nedenin teşhisi, daha iyi hasta yönetimi ile sonuçlanır, çünkü bağışıklık sistemini baskılayıcı ilaçların uygunsuz kullanımı aslında virüs enfeksiyonunu uzatır.