Çalışma şişelerindeki sıvı seviyelerini sabit tutmak için, yöntemin voltaj ayırma adımı sırasında kullanılan şişelere ön koşullandırma yapılmamalıdır. Bu nedenle, farklı flakonlardan yıkama adımlarını programlamanın yanı sıra, bir ön koşullandırma prosedürü, farklı ön koşullandırma adımları sırasında çıkıştaki flakonları da kontrol etmelidir.
Atık flakonu boş olmamalıdır, ancak kılcal damardan aşağı sarkmasını önlemek için bir miktar sıvı içermelidir. Sıra çok uzunsa veya ön koşullandırma prosedürü kapsamlıysa, atık şişesinin taşmadığını kontrol edin. Bir voltaj adımı programlandığında, giriş ve çıkış şişeleri BGE içermelidir.
Ön koşullandırma prosedürünüzü oluşturmaya başlamadan önce, hangi etkinin gerekli olduğunu düşünün.
Örneğin:
tekrarlanabilir ve tekrarlanabilir hareketlilikler yoluyla hassasiyet,
sabit EOF (elektroozmotik akış) veya EOF’nin bastırılması,
tampon tükenmesinin önlenmesi,
duvar etkileşimlerinde tekrarlanabilir azalma,
yüksek konsantrasyonlu numune bileşenlerinden bulaşmanın önlenmesi ve
analiz için ilgi çekici olmayan geç taşınan bileşenlerin temizlenmesi.
Bazıları diğerlerinden daha yaygın olan birçok farklı ön koşullandırma adımı (Bölüm 4) vardır. En yaygın adımlar burada açıklanmaktadır.
BGE: En basit ön koşullandırma adımı, örnek bileşenlerini temizleyen ve tampon tükenmesi etkilerini önlemek için BGE’yi yenileyen BGE ile yıkamadır. Çoğu durumda, bir BGE yıkaması, taşınmayı azaltmak, analizin ilgisini çekmeyen geç göç eden numune bileşenlerini temizlemek için sabit bir EOF elde etmek için yeterlidir. BGE yıkaması yeterli olursa, duvar dengenizi bozmayın. diğer sıvıları yıkayarak. Bazı tampon bileşenlerinin, gerekli dengeleme süresini etkileyebilen fosfat gibi yüzeye adsorbe olduğu bilinmektedir.
Uygulanan voltaj: Bir BGE yıkama adımından sonra voltajın uygulanması EOF’yi stabilize edebilir. Çalışma sırasında voltaja zıt bir voltaj uygularsanız, kapiler veya elektrotlara yapışan örnek bileşikler çıkarılabilir. Bu şekilde, bulaşma veya diğer rahatsız edici etkiler azaltılabilir.
Su: Uyumlu olmayan çözücüleri birleştirmek için kısa su basamakları kullanılabilir; örneğin, bileşenlerin birbirleriyle temas etmesi durumunda çökelme riski olduğunda. Kılcal duvar için pH sıçramalarını hafifletmek için de kullanılabilir.
Sodyum hidroksit: Örnekler arasında kapiler duvarda daha sert işlem gerekiyorsa bir NaOH yıkaması uygulanabilir. Örneğin, yüksek düzeyde konsantre numuneleriniz (analit ve / veya matris) veya güçlü duvar etkileşimlerine sahip numune bileşenleriniz olduğunda. Ayrıca, bir sekansta yöntem geliştirme için birkaç farklı BGE bileşimini test ederken, bir NaOH yıkama adımı genellikle ön koşullandırmanın bir parçasıdır. Hidroksit yıkama tüm kapiler kaplamalarla uyumlu değildir. Düşük pH’lı tamponlar çalıştırılırken, bir asit veya organik çözücü yıkama tercih edilebilir.
Kuvvetli asitler: H3PO4 veya HCl gibi asitler de BGE veya sudan daha sert muamele verir, ancak duvardaki silanol gruplarının protonsuzlaşması olmaz. Asit yıkama tüm kapiler kaplamalarla uyumlu değildir.
Bazik veya asit ön koşullandırmanın EOF üzerindeki etkisine dair bazı raporlar vardır.17 Daha düşük bir pH’ta, kılcal duvarın yalnızca sınırlı sayıda silanol grubu hidrolize edilir ve kalan bağlar tarafından bir arada tutulan bir jel oluşur. yüzey. Asidik ön koşullandırma gerçekleşmişse, zeta potansiyeli büyük ölçüde azalır ve EOF, BGE’de aynı pH’ı kullanarak daha yavaştır.20,21 EOF baskılayıcı değiştiriciler kullanıldığında etki daha az belirgindir.
Enjeksiyon motor Nedir
Enjeksiyon Nedir
Araba enjeksiyon Fiyatları
Enjeksiyon ne Demek
Tıpta enjeksiyon nedir
Enjeksiyon Nedir sağlık
Tofaş enjeksiyon nedir
Plastik enjeksiyon Nedir
Organik çözücüler: Çözücüler, BGE ile veya başka bir basit işlemle temizlenemeyenleri temizlemek için veya susuz çalışırken ve su bazlı yıkama mümkün olmadığında kullanılabilir. Asetonitril (ACN) gibi bazı çözücülerin kılcal damarın dışındaki poliimid kaplamayı şişirebileceğine dikkat edin.
Bekleme adımı: Pahalı bir çözümle yıkamak her zaman gerekli değildir. Bazen ön koşullandırma prosedüründe bir bekleme adımı ile kılcal duvar ile temas halinde olmak yeterlidir.
Deterjan: BGE’de sodyum dodesil sülfat (SDS) gibi bir deterjanla ön koşullandırma gibi asinbiyolojik numuneler gibi karmaşık numune matrisleri için, kapsamlı kostik veya asit temizlemeden daha faydalı olabilir. Ekstra bir fayda, daha kısa bir yeniden denge süresidir. Çalışma tamponundaki az miktarda SDS, hassasiyeti daha da artırabilir.20 Başka bir rapor, biyolojik numuneler arasındaki bu ön koşullandırma için asetonitril ve sodyum dodesil sülfat (SDS) kombinasyonunu tanımladı.22,71 Deterjanın bir kısmının açık kalabileceğini unutmayın. kılcal duvar ve kalıcı değişikliklere neden olur.
Dinamik kaplama çözümleri: Dinamik kaplama bileşenlerinin her zaman BGE’ye eklenmesi gerekmez, bazen çalışmalar arasında yıkama yeterlidir.
Kılcal uç daldırma: Ön koşullandırmadan sonra ve numune enjeksiyonundan önce, kılcal enjeksiyon ucunun suya daldırılarak temizlenmesi, enjeksiyon hassasiyetini artırdığı bulunmuştur.
ENJEKSİYON
Enjeksiyon Hassasiyeti
CE’deki enjeksiyon hassasiyeti, enjeksiyon prosedürünü dikkatli bir şekilde kontrol ederken otomatik ticari ekipmanlarda% 1 veya daha iyi olabilir (örn. Referanslar 1 ve 25 ve burada belirtilen referanslar).
Dahili standart: Dahili bir standardın (IS) kullanılması şiddetle tavsiye edilir ve enjeksiyon hatalı olsa bile enjekte edilen miktardaki değişiklikleri telafi eder.
Dahili normalleştirme ile nicelleştirilirken veya azaltılmış sayıda önemli basamakla raporlama yapılırken, örneğin bir safsızlık seviyesi testinde bir IS gerekli olmayabilir. IS ayrıca göreceli geçiş süreleri aracılığıyla bileşiklerin tanımlama hassasiyetini artırmak için de kullanılabilir.
BGE fiş enjeksiyonu: Numune enjeksiyonundan sonra bir tampon tıpa enjeksiyonu, yüksek voltaj açıldığında termal genleşme ile numune kaybını önler.
Enjeksiyon modu: Hidrodinamik enjeksiyon genellikle elektrokinetik enjeksiyondan daha tekrarlanabilir. Elektrokinetik olarak enjekte edilen miktar, enjeksiyon süresi ile doğrusal olmayan bir ilişkiye sahiptir.
Enjeksiyon süresi: Çoğu modern alet, enjeksiyon süresi boyunca hidrodinamik enjeksiyon değişkenliğini otomatik olarak düzelten enjeksiyon basıncının bir kontrol fonksiyonuna sahiptir. Bunun düzgün çalışması için en az 3 saniyelik bir enjeksiyon süresine ihtiyaç vardır. Çok kısa enjeksiyon süreleri hassasiyeti azaltır ve çok uzun enjeksiyon süreleri bant genişlemesine neden olur. Mümkünse basıncı artırın.
Viskozite farklılıkları: Farklı numune şişesi sıcaklıkları farklı viskoziteler oluşturur ve dolayısıyla farklı miktarlarda enjekte edilir. Etkiyi azaltmak için cihaz sıcaklık kontrolünü kullanın.
Bununla birlikte, genellikle numune ve tampon şişeleri sıcaklık kontrollü alanın dışında bulunur. Bunun etkisi laboratuvarınızdaki iklim sistemine ve laboratuvar sıcaklığının yıl boyunca nasıl değiştiğine bağlı olarak değişebilir. Sıcaklık kontrolünün yanı sıra, viskozite ve iletkenlik açısından numunelerin ve standartların eşleşmesi önemlidir.
Flakon seviyeleri: Şişeler arasındaki sıvı seviyelerindeki farklılık hidrodinamik bir akış yaratacak ve enjeksiyon hassasiyetini bozacaktır. Numune şişelerini aynı seviyeye kadar doldurun ve cihazı programlarken, enjeksiyon sırasında kapiler çıkışında sabit bir BGE seviyesine sahip bir flakon olduğundan emin olun.
Numune konsantrasyonu: Daha yüksek numune konsantrasyonları veya daha büyük numune hacimleri, entegrasyon hatalarını azaltır ve böylece hassasiyeti artırır.
BGE daldırma: Numune enjeksiyonundan sonra, bulaşmayı azaltmak ve / veya pik simetriyi artırmak için kapiler girişini çalıştırma flakonu ile aynı olmayan bir BGE flakonuna daldırın. Bu daldırma şişesinin ne sıklıkla doldurulması gerektiğini kontrol edin.