Doku İşleme ve Gömme – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri

Laboratuvar Dışı Yarı Nicel Testler – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Kabul Edilemez Performansın Belirlenmesi - Laboratuvar Dışı Yarı Nicel Testler Şu anda, yarı kantitatif kuru reaktif kullanımının ana klinik kullanım alanı idrar testidir. Sadece bir analiti (örneğin glikoz veya protein için) veya bir dizi analiti içerebilen çok çeşitli reaktif şeritleri mevcuttur; her reaktif pedinin renklerinin önceden basılmış bir renge katı bir zaman sıralamasında görsel olarak eşleştirilmesi gerekir. Kan şekeri ölçümlerinde okunan reaktif şeritlerinin kullanımı kan şekeri için yarı kantitatif testlerin yerini büyük ölçüde almış olsa da, bu testler benzer kalite kontrol sorunları ortaya çıkarmaktadır. Ek olarak, tam kan lipid fraksiyonlarının ölçümünden idrar veya tükürükte kötüye kullanılan ilaçların saptanmasına kadar uzanan birçok yeni laboratuvar dışı reaktif şerit testi yakın zamanda piyasaya sürülmüştür. Bu yarı niceliksel testler çok çeşitli ortamlarda gerçekleştirilebilir: servisler, klinikler, birincil vaka uygulamaları, okullar ve ev. Performansa çok az dikkat edilmiştir, çünkü bu tür tahlillerin hatasız olduğuna dair yaygın bir inanç vardır ve bir hastane ortamında bunlar genellikle, analitik kimya deneyimi olmayan ve bu tür tahlillerin en genç koğuş personeli üyesine devredilir. eğitim almayabilir. Hastane koğuşlarında idrar analizlerinin performansına ilişkin ilk anket, analizlerin yalnızca yaklaşık %50'sinde doğru sonucun (yani doğru renk pediyle eşleşme) elde edildiğini göstermiştir. Tüm ölçümlerin yaklaşık %5'i aşırı derecede anormal değerler verdi. O zamandan beri birçok farklı lokasyondan yapılan çalışmalarda benzer bulgular elde edilmiştir. Kantitatif tahlillerle, kabul edilebilir performansı, analitik ulaşılabilirlik [çoğu dış kalite güvence (QA) şemasının yaklaşımı] veya klinik fayda açısından sayısal olarak tanımlamak nispeten kolaydır. Yarı niceliksel testler, kendilerini kolay bir sayısal yaklaşıma ödünç vermezler. QA dağılımlarından elde edilen ortalama değer, gerçek değerin en iyi tahmini olarak kullanılamaz, çünkü bu genellikle ya en yakın renk eşleşmesine yaklaştırma yoluyla ya da teknik eksikliklerden kaynaklanan bir önyargıya sahiptir. Bu nedenle, bir anketin veya KG programının bir parçası olarak dağıtılan numuneler, gerçek değeri tanımlayan tartılmış bileşenlerle birlikte genellikle sentetiktir (bu, bilirubin veya kırmızı kan hücreleri gibi bazı analitler için zor olsa da). Nicel veri Analizi aşamaları Nicel veri analiz yöntemleri Nicel veri analizinde kullanılan yöntemler Hangi istatistiksel analiz nerede kullanılır Nicel Veri Analizi PDF Nicel araştırma örneği Nicel araştırma desenleri PDF Nicel araştırma desenleri nelerdir Tartılan değer, her bir analit için tam olarak bir önceden basılmış renk bloğunu eşleştirmek için gereken konsantrasyona karşılık geldiğinde, pratikte analizi yapan kişilerin yalnızca yaklaşık yarısı doğru eşleşmeyi elde eder: yaklaşık %95'i bir renk bloğu içinde bir eşleşme elde eder doğru rakamdan. Bu aralığın dışındaki sonuçlar kabul edilemez performans olarak alınabilir. Alternatif bir yaklaşım, iki renk bloğu arasında yarı yolda bir renk üreten bileşenlerin miktarlarını tartmaktır. Bitişik iki renk bloğundan herhangi birine karşılık gelen sonuçlar kabul edilebilir olarak kabul edilir: koğuş anketlerinde, daha sıkı kriter tarafından geri dönüşlerin %10-20'si kabul edilemez. Kabul edilemez performans belirlendiğinde, bir nedenin bulunması gerekir: olası nedenlerden bazıları Tablo 43.1'de listelenmiştir. Bunların neredeyse tamamı, anlayış, eğitim veya teknikteki eksikliklerden kaynaklanmaktadır (tümü yerel olarak giderilebilir). Bunun nedeni, nadiren reaktif şeridindeki üretim kusurlarından kaynaklanır, ancak bir bakım noktası test ortamında bu reaktif şeritlerinin olası doğruluğu için abartılı iddiaların bazen üreticiler tarafından yapıldığı söylenmelidir. NOT: İdrar proteini reaktif şeridi tahlillerinde sapma. Farklı bir renk bloğuna karşılık gelen protein konsantrasyonlarına sahip önceden hazırlanmış altı idrar numunesi, 11 hemşire analiste "kör" olarak dağıtıldı. Şekil, bilinen protein konsantrasyonlarını, her bir renk bloğunu bildiren analistlerin sayısıyla karşılaştırır. Beklenen sonuç dağılımının yanı sıra, sistematik bir önyargı mevcuttur, analistler gerçek protein konsantrasyonunu tek bir renk bloğu ile hafife alma eğilimindedir. Uzun Vadeli Eğilimlerin Değerlendirilmesi----Kantitatif Testler Kuru reaktif kimyalarını kullanan otomatik cihazlar birkaç yıldır mevcuttur. Bunlar, daha geleneksel ıslak kimya analizörleriyle eşleşen analiz verimi ve kesinliği ile küçük miktarlarda serum üzerinde birçok farklı analiz gerçekleştirebilir. Reaktif slaytları tipik olarak 6 aya yetecek kadar tek partiler halinde satın alınır. İdeal koşullarda saklanırsa, her seri kullanımdan önce sadece tek bir kalibrasyona ihtiyaç duyabilir, stabilite serinin ömrü boyunca kaliteyi korumaya yetecek kadar iyidir. Ancak pratikte, saklama koşulları ideal olmayabilir (soğuk odanın zemini ve tavanı arasındaki sıcaklık farkları, stabiliteyi değiştirmek için yeterlidir) ve reaktif şeritlerinin çok yavaş bozulması, seriden seriye aynı değildir. Bu nedenle kalite kontrol, ilk kalibrasyonun yeterli olmasını sağlamayı, ardından ikinci bir kalibrasyonun gerekli olduğu veya kullanılmayan slaytların atılması gereken noktayı belirlemek için yavaş kaymayı izlemeyi amaçlar. Konvansiyonel kalite kontrol serumları her iki amaç için de kullanılabilir, ancak dezavantajları vardır. Onlar pahalı; özellikle viskozite ile ilgili matriks etkileri ve bir slaytın katmanları boyunca müteakip difüzyon, davranışlarını hastalardan alınan numunelerden farklı kılabilir ve bazı analitlerin sonuçları, sulandırmayı takip eden ilk birkaç saat içinde önemli ölçüde değişebilir. Hasta örneklerinden elde edilen sonuçların daha güvenilir KK bilgisi verebileceğini bulduk. Hastaların sonuçları, geleneksel bir QC serumunun sonuçlarından açıkça daha dağınık olsa da, istatistiksel analiz için daha fazla veri mevcuttur. Çoğu analit için, ortalama hasta sonucu (uç değerlerin hariç tutulmasından sonra) ve önceden belirlenmiş bir sınırın dışında kalan sonuçların sayısı (serum sodyum konsantrasyonu için otomatik bir 'telefon sınırı' gibi) gibi parametreler yeterince hassastır ve hemen hemen tüm gerekli QC bilgilerini sağlayın. İlk kalibrasyon, önceki kalibrasyonları takiben hastanın günlük ortalamasının karşılaştırılabilirliği ile değerlendirilebilir. Günlük ortalamadaki bir sapma, yeniden kalibrasyonun veya yeni slaytların gerekli olduğu noktayı değerlendirmek için kullanılabilir.  Yeniden kalibrasyondan önceki ve sonraki süreyi gösteren serum sodyum analizleri için günlük hasta ortalama grafiğini gösterir.

Doku İşleme ve Gömme – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri

Dokuya dayanıklılık ve sonraki işlemlere olanak sağlar. Formalin karbonhidratları sabitlemez ancak sabit bir proteine ​​tutulduğunda glikojeni sabitler. Karmaşık lipidler için iyi bir fiksatiftir.

Isı ve çalkalama, fiksasyon sürecini hızlandırır. Dokuların formalin içinde fiksasyonu için önerilen süre 24-48 saattir, optimum süre 7-10 gündür. Modern kapalı doku işleme makineleri, işleme sırasında reaktiflerin ısıtılmasına (40-45 C) izin verir ve böylece sabitleme işlemi hızlandırılabilir. Laboratuvara alınan dokular, fiksatif hacminin 5-10 katı kadar tamamen suya batırılmalıdır.

Hiçbir fiksatif ideal değildir, ancak% 10 formalin geniş bir doku yelpazesini koruma avantajına sahiptir. Formalin toleranslıdır ve daha sonra yeterli histokimya yapılabilir. Doku, çekirdek, sitoplazma veya dokunun genel morfolojisi üzerinde zararlı etkiler olmaksızın uzun süre saklanabilir. İmmünohistokimya veya moleküler biyoloji için tercih edilen fiksatif değildir, ancak birçok problem dokuya uygun ön işlemlerle aşılabilir.

Yaygın Olarak Kullanılan Diğer Fiksatifler

Gluteraldehit, hücrenin ince yapısının iyi korunmasını sağladığı için elektron mikroskobu gerektiren dokular için genellikle tercih edilen fiksatiftir. Solunum yolları hassaslaştırıcıdır ve endüstriyel astımla güçlü bir şekilde bağlantılıdır. Glutaraldehyde ile çalışırken uygun güvenlik önlemleri alınmalıdır. Hastanelerde dezenfektan olarak kullanımı esas itibariyle yasaklanmıştır.

Osmiyum tetroksit, genellikle glutaraldehitte birincil fiksasyondan sonra, elektron mikroskobunda ikincil fiksatif olarak kullanılır. Lipitleri sabitler ve ayrıca hücrenin ince yapısını korur. Osmiyum tetroksit toksiktir ve kullanım sırasında uygun güvenlik önlemleri alınmalıdır.

Potasyum dikromat, adrenal medüller tümörleri hem makroskopik hem de mikroskopik olarak tanımlamak için kullanılabilir. Adrenal medüller katekolaminlerle reaksiyona girerek suda çözünmeyen siyah veya kahverengi bir çökelti oluşturur. Dokuya yavaş nüfuz etmesi ve büzülmeye neden olması nedeniyle genel fiksatif olarak uygun değildir.

Alkol, dokuya hızla nüfuz eder ve fiksasyon hızını artırmak için diğer fiksatiflerle birlikte kullanılabilir. Mutlak etanol, glikojeni korur ancak nükleer ayrıntıda bozulmaya ve sitoplazmanın küçülmesine neden olur. Carnoy fiksatifi, nükleik asitler için iyi bir fiksatiftir ancak dokunun küçülmesine ve kırmızı kan hücrelerinin parçalanmasına neden olur. Mutlak etanol, kloroform ve buzlu asetik asitten oluşur.

Fiksatiflerde çeşitli katkı maddeleri kullanılabilir. Örneğin, penetrasyon oranını artırmak, korumayı iyileştirmek veya sonraki boyama prosedürlerini geliştirmek için formaline tanik asit, fenol veya ağır metal çözeltileri eklenebilir.

Uçucu fiksatifler kullanılarak buhar fiksasyonu, çözülebilir maddelerin çözücülerle temas etmeden önce çözülmeyen ürünlere dönüştürülerek in situ retenasyonunu sağlar. Bu yöntem genellikle dondurarak kurutmayla birlikte kullanılır. Bu teknik için uygun sabitleyiciler arasında formaldehit, osmiyum tetroksit ve alkol yer alır.

Mikrodalga fırınlar, ısının kendisinin etkisiyle dokuyu korumak veya daha önce açıklandığı gibi fiksasyon sürecini hızlandırmak için fiksasyonda kullanılabilir.

Doku gömme işlemi
Doku Gömme Cihazı
Doku takibi işlem basamakları
Doku takibi aşamaları
Mikrotom ile kesit ALMA
Doku takip Cihazı
Doku takibinde kullanılan çözelti serileri ve doku takip Yöntemleri
Doku işlenmesi süreci

Kireç Giderme

Kalsifiye malzeme içeren kemik veya dokular, standart mikrotomiyi mümkün kılmak için işlemden önce dekalsifikasyon gerektirir (kalsiyum miktarının gerekli olduğu dokularda, kalsifiye edilmemiş kemik kesitlemesi yapılabilir). Asitler, ör. nitrik asit, kenetleme maddeleri, ör. etilen diamino-tetraasetik asit (EDTA), her ikisinin bir kombinasyonu veya ticari olarak üretilmiş solüsyonlardır.

Mikrodalga fırın veya inkübatör kullanılarak kireç giderme solüsyonlarına uygulanan ısı, kireç giderme sürecini hızlandırmak için kullanılabilir. Kireç çözücü bir sıvıda, özellikle asidik solüsyonlarda uzun süre, dokunun morfolojisine zarar verebilir ve sonraki tekniklerin kalitesini olumsuz etkileyebilir.

Dekalsifikasyonun son noktası, solüsyonun kimyasal testiyle, dokunun röntgeniyle veya daha yaygın olarak manuel değerlendirmeyle bulunabilir.

Doku İşleme ve Gömme

Sabitlenmiş, stabilize edilmiş doku daha sonra mikroskobik inceleme için 1-6 mm kalınlığında doku kesitlerinin hazırlanmasını içeren mikrotomiye tabi tutulacaktır. Bu süreci kolaylaştırmak için dokunun içten ve dıştan desteklenmesi gerekir.

Hem sabitlenmiş hem de sabitlenmemiş doku numuneleri için dondurma protokolleri bulunmasına rağmen, bu yöntemler normal olarak sabitlemeye dayanıksız bileşenlerin gösterilmesi için veya hızlı teşhis teknikleri için kullanılır. Genel histopatolojik tanı için, dokular genellikle bir dizi reaktife tabi tutulur, infiltrasyonla sonuçlanır ve ardından sert bir destek ortamı ile sarılır.

En yaygın olarak kullanılan fiksatifler,% 10 sulu formalinin varyasyonlarıdır ve bu nedenle doku işlemenin amacı, numune içindeki sulu fiksatifi suyla karışmayan parafin balmumu ile ikame etmektir.

Bunu başarmak için numune aşağıdaki aşamalara tabi tutulur:

  • 1. Dehidrasyon — alkol, doku içindeki sulu fiksatifin yerini alır.
  • 2. Temizleme — ksilen gibi bir ön-ortam alkolün yerini alır.
  • 3. Sızma — parafin mumu, temizleme maddesinin yerini alır ve dokuya sızar.
  • 4. Gömme — sızmış doku, mikrotomiye sert bir destek sağlamak için parafin balmumu ile kapsüllenir.

İyi doku işlemeyi sağlamak için aşağıdakiler çok önemlidir:

doku dilimleri, hızlı / acil işleme programları için 2-3 mm’den daha kalın değildir ve rutin gece ve hafta sonu programları için 3-5 mm kalınlığındadır.

Reaktiflerin yeterli dolaşımını engelleyerek doku işleme kasetine sıkışırsa kötü işlem meydana gelecektir. Küçük biyopsiler, ticari olarak temin edilebilen biyopsi torbalarına veya ağ biyopsi kasetlerine yerleştirilebilir ve bunlar da işleme kasetinin içine yerleştirilebilir.

Doku İşlemeyi Etkileyen Faktörler

Sıcaklık

Düşük sıcaklıklarda işleme reaktifleri daha viskozdur ve bu nedenle doku difüzyon hızları daha yavaştır. Yüksek bir işlem sıcaklığı, reaktif moleküllerinin kinetik enerjisini artırır, reaktif viskozitesini azaltır ve reaktifin dokuya difüzyon oranını artırır. Dehidrasyon ve temizleme reaktiflerinin 37-45 ° C aralığında nazikçe ısıtılması, işleme sürelerini önemli ölçüde azaltacaktır ancak ısının kolajen üzerindeki etkisine bağlı olarak doku büzülmesini artırabilir.

İnfiltrasyon aşamasındaki yüksek sıcaklıklar dokuda aşırı büzülmeye ve sertleşmeye neden olabilir. Bu etkileri en aza indirmek için infiltrasyon ortamının erime noktasının 2–3 C üzerinde sıcaklıklar kullanılarak çözülebilir. Bununla birlikte, infiltrasyon sırasında kan ve kas yine de kırılgan hale gelebilir ve fiksasyon rejiminin, dehidrasyon ajanının ve doku tipinin birleşik etkisi de dikkate alınmalıdır.

Etiketler: , , , , , , ,