Blog

Uygulamalı Biyosistemler İfade Dizisi Sistemi Applied Biosystems Expression Array System, tüm insan genomunu temsil eden, mevcut transkript verilerini kullanan ve tamamen insan küratörlüğünde uzmanlar tarafından doğrulanmış gen açıklamalarına dayanan bir mikrodizi tasarımına dayanmaktadır. Her araştırma, hem Celera Genomics ek açıklamalarını hem de kamuya açık olanları içeren ilişkisel bir veritabanının parçasıdır. Özel olarak geliştirilmiş kemilüminesan kimyalarla bir araya getirilen bu eksiksiz sistem, önceki nesil mikroarray sistemlerine göre daha fazla prob ve algılama hassasiyeti sunar. Ek olarak, mikrodizide temsil edilen 31097 insan geninin tümü için açıklama bilgileri, 1700 sistemiyle sağlanan bir Oracle1 veritabanına dahil edilmiştir. Üreticiler sonucun, gen ekspresyonu araştırması için mikrodizi verilerinin hızlı ve doğru analizini yapabilen eksiksiz bir sistem olduğunu öne sürüyorlar. Mikrodizilerden 'takip' deneyleri, mikrodizi veri doğrulamasını, transkript üretiminin mutlak nicelleştirilmesini ve alternatif ekleme olaylarının araştırılmasını sağlayan kantitatif gerçek zamanlı PCR TaqMan1 prob tabanlı tahlillere bağlanarak elde edilebilir. Applied Biosystems Expression Array System, dizileri kemilüminesansta görüntüleyebilen, çok düşük seviyelerde ve floresanda gen ifadesini araştırıp ölçebilen, özelliklerin yerini tespit edip otomatik ızgara yapabilen bir analiz cihazından (Applied Biosystems 1700 Chemiluminescent Analyzer) oluşur. Invitrogen Cellsway Biosystems Applied Biosystems TÜRKİYE Mikro akışkan sistemler Mikrosens Mikro akışkan sistemler nedir Nehir Biyoteknoloji Son teknoloji ürünü bir CCD kamerayı içerecek şekilde tasarlanan 1700 sistemi, etiketli transkriptler bir mikro diziye hibritlendiğinde ortaya çıkan kemilüminesan sinyali hassas bir şekilde görüntüler. Ayrıca 1700 sistemi, mikrodizi problarına bağlanan gen ekspresyon ürünlerinin yokluğunda bile, mikrodiziyi floresan modunda ızgaraya, normalleştirmeye ve belirlemeye yönelik kesin doğrulukla görüntüler. Yeni Applied Biosystems Expression Array System, kapsamlı gen ekspresyonu analizi sağlamak için hassas saptama kimyalarıyla birleştirilmiş en son genomik verileri kullanır. Aşağıdakiler dahil çeşitli ücretsiz kitler mevcuttur: Hücrelerden mRNA'yı digoksigenin etiketli cDNA'ya dönüştüren Kemilüminesan RT Etiketleme Kiti. mRNA'yı hücrelerden digoksigenin etiketli cRNA'ya dönüştürürken aynı anda ve lineer olarak giriş RNA'sını yükselten Kemilüminesan RT-IVT Etiketleme Kiti. Elde edilen digoksigenin etiketli cDNA veya cRNA, Applied Biosystems mikrodizisine özel olarak hibritlenir. Oligonükleotid problarına bağlı digoksigenin etiketli cDNA veya cRNA'ya sahip özellikleri görselleştirmek için kullanılan Kemilüminesans Tespit Kiti. Görüntüleme, mikrodizinin bir anti-digoksigenin alkalin fosfataz konjugatı ile inkübe edilmesiyle sağlanır. Alkalin fosfataz, kemilüminesan bir substratı hidrolize eder ve 458 nm dalga boyunda ışık yayar. Sinyal yoğunluğu, hücrelerde ifade edilen mRNA seviyesi ile orantılıdır. Üreticiler, mikrodizi üzerinde elde edilen kemilüminesan sinyallerin, önceki geleneksel floresan mikrodizilere göre daha yüksek hassasiyet ve daha büyük dinamik aralık sağladığını iddia etmekte ve ayrıca Applied Biosystems Expression Array System ile yüksek kaliteli verilerin mümkün olduğu kadar az miktarda elde edilebileceğini öne sürmektedirler. 100 ng toplam RNA başlangıç ​​materyali. Applied Biosystems İnsan Genom Araştırması Mikrodizileri, bilinen tüm genler için genel ve Celera verileri kullanılarak tasarlanmıştır (31 097). Bu mikrodiziler, özellik çapı 45 mm (kenardan kenara) boşluk olan oligonükleotidler içerir. Oligonükleotitler, insan genomunun her bir geni için transkriptleri hedefler. Oligonükleotid probları Applied Biosystems'de sentezlenir ve maksimum özgüllüğü sağlamak üzere tasarlanmıştır. Mikrodizi üretiminden önce, tüm problar kalite kontrol için kütle spektrometrisi ile analize tabi tutulur. Applied Biosystems mikrodizileri, etiketli cDNA veya cRNA örnekleri eklendikten sonra kolayca yeniden kapatılabilen bir yükleme portu içeren önceden monte edilmiş bir kartuşta kapatılır. Hibridizasyon tamamlandığında kartuş sökülür ve atılır. Mikrodiziler daha sonra partiler halinde işlenir ve bağlanmamış malzeme yıkanarak uzaklaştırılır. Applied Biosystems Expression Array System'in bir parçası olan hedef (gen ifadesi) notasyonu için Oracle Database, günümüzün gen ifadesi çalışmalarında yer alan tüm laboratuvarlar için gerekli olan en son gen açıklama verilerini içerir ve tüm laboratuvarlar için tam depolama ve sorgu erişimi sağlar. deneysel veri. Veritabanı, örneğin gen kısaltmalarını, gen adlarını, gen tanımlaması için çapraz referansları, genel (GO) ve Celera (PantherTM) gen ontolojilerini ve diğer ilgili bilgileri içerir. Ayrıca üreticiler, mikrodizi tarafından hedeflenen transkriptler hakkında en güncel bilgilerle açıklamaları sürekli olarak güncellemeyi taahhüt eder. Illumina "Diziler Dizisi"TM Illumina şirketi tarafından sunulan ifade dizileri, dizileri oluşturmanın temelde farklı bir yolunu oluşturur: boncukların desenli mikro kuyucuklu alt tabakalara rastgele kendi kendine montajı. Yüzeyleri boyunca binlerce kuyu içeren substratlar oluşturmak için hem fiber optik hem de mikro-elektromekanik sistem (MEMS) endüstrilerindeki teknolojik gelişmelerden yararlandılar. Kantitatif olarak havuzlanmış boncuk kitaplıkları daha sonra yüksek yoğunluklu bir dizi platformu elde etmek için kazınmış mikro kuyu alt tabakalarına kendiliğinden monte edilir. Şu anda iki farklı Array of ArraysTM formatı, SentrixTM Array Matrix ve SentrixTM BeadChip mevcuttur. Dizi Matrisi, her bir dizinin sonunda 3 mm'lik bir kuyu oluşturmak için kimyasal olarak kazınmış yaklaşık 50.000 ayrı ışık ileten fiber iplik içeren fiber optik demetler kullanır. Dizi demetleri, standart mikrotitre plakalarının kuyu aralığına uyan 96 dizili bir konfigürasyonda birlikte gruplanır. Bu benzersiz format, kullanıcıların aynı anda 96 dizi üzerinde basit ve hızlı bir şekilde deneyler yapmalarını sağlar. Ayrıca platform, standart robotik ekipman kullanılarak otomasyon rutinlerine kolayca dahil edilebilir ve bu da daha az hata, işçilik ve kaynak gereksinimleri sağlar. BeadChip formatı, aynı anda sekiz örneğin işlenmesine izin veren slayt boyutunda bir platformdur ve standart bir lazer tarayıcıda taranabilir. Dizi formatından bağımsız olarak, her dizideki her boncuk yüz binlerce kovalent olarak bağlanmış oligonükleotit probu içerir. Her bir boncuk tipi için ortalama 30 kat fazlalık ile her dizide farklı prob dizileri içeren 1500'e kadar benzersiz boncuk tipi temsil edilir. Boncuk montajından sonra, her bir kuyuda hangi boncuk tipinin bulunduğunu belirleyerek dizinin kodunu çözmek için hibridizasyon tabanlı bir prosedür kullanılır. Bu son işlem, her bir boncuk tipinin performansını doğrular.