Otomatik Örnekleyici – Farmasötik Analiz İçin Kapiller Elektroforez Yöntemleri – Ayırma Teknolojisi –FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Otomatik Örnekleyici
Örnekleme sistemleri, 4248 konumlu bir karuselden 96 oyuklu bir plakaya kadar herhangi bir şey olabilir. CE sistemleri, çok sayıda şekil ve hacimde çeşitli şişelerin mevcut olduğu otomatik örnekleyicide büyük ölçüde farklılık gösterir. Örnek ve tampon flakon hacimleri 100 mL ila birkaç mL arasında değişebilir.
Her durumda, giriş ve çıkış şişeleri ve solüsyonları herhangi bir sifonlamayı en aza indirmek için aynı yüksekliktedir. Bir flakon diğerinden daha yüksek olduğunda, sifonlama tekrarlanabilirliği ve verimliliği etkiler. Cihaz tasarımlarının çoğu, çok sayıda çalıştırma tamponu flakonu kullanır, böylece cihaz, tipik olarak 5210 gibi bir dizi çalışma gerçekleştirdiğinde “yeni” çözeltiler kontamine çalışma tamponlarıyla değiştirilebilir.
Çalıştırma arabelleğindeki hacim ne kadar büyükse, çalıştırma arabelleklerinin değiştirilmesi gerekmeden önce tamamlanabilen çalıştırma sayısı o kadar fazla olur. Çalıştırma tamponlarının değiştirilmesinin gerekmesinin çok çeşitli nedenleri vardır. Giriş tamponu, giriş şişesine kılcal durulamanın dış kenarlarında bir filmin neden olduğu numune veya çözücü kontaminasyonu yoluyla değiştirilebilir. Çıkış tamponu, girişten kılcalın çıkışına geçen iyonlardan kontaminasyona sahip olabilir.
Her iki tampon da tampon buharlaşmasına ve bakteri büyümesine duyarlıdır. Çözeltinin elektrolizinin çalışan tampon pH’ını değiştirebileceği ve daha sonra EOF’yi değiştirebileceği bilinmektedir. Bu olaylar, tampon tükenmesine neden olma eğilimindedir ve uzun süreli performans kararlılığı sağlayacak uzun örnek dizileri sırasında giriş ve çıkış tampon şişesini hızlı bir şekilde değiştirme yeteneğine sahip bir otomatik örnekleyici seçmek önemlidir. Genel olarak, birden çok hacim çözümünü işleyebilen bir otomatik örnekleyici tercih edilir.
Tipik olarak, giriş ve çıkış tamponları mililitre cinsinden numune hacimlerine sahipken, numune şişeleri mikrolitre ila mililitre hacim aralığındadır. Mikrolitre büyüklüğünde bir numune şişesi, numune boyutu sınırlı olduğunda avantajlı olabilirken, aynı numune birden çok kez enjekte edildiğinde büyük bir numune şişesi tercih edilir.
Tamponlar için birçok pozisyona sahip bir otomatik örnekleyici, kullanıcının çeşitli farklı tamponlar altında çoklu ayırma yapmasına izin verir, bu da bilim adamına yöntem geliştirmede yardımcı olur. Sofistike bir otomatik örnekleyici ile, tampon tipi ve konsantrasyonu, jel tipi ve konsantrasyonu, yüzey aktif madde konsantrasyonu ve pH gibi parametreler için gözetimsiz yöntem operasyonu araştırılabilir.
Anahtar bir gereklilik, otomatik örnekleyicinin sıcaklık stabilize edilmesi gerektiğidir, böylece tamponun viskozitesi zaman içinde tutarlı kalır. Numune veya tampon sıcaklığındaki değişiklikler, migrasyon süresi ile birlikte enjekte edilen numuneyi doğrudan etkileyecektir. Sıcaklık stabilizasyonu, fırın ve peltier soğutucu dahil olmak üzere çeşitli yollarla gerçekleştirilebilir.
HPLC cihazı kullanımı
HPLC sonuç değerlendirme
Mobil faz Nedir
Sıvı Kromatografisi
HPLC Avantaj ve dezavantajları
HPLC cihazı çalışma prensibi
HPLC pik yorumlama
Hplc cihazı ne ise yarar
Enjeksiyon Modları
CE için elektrokinetik ve basınç olmak üzere iki ana enjeksiyon stratejisi vardır. Her tip enjeksiyon modunun avantajları ve dezavantajları vardır. Uygulamaya bağlı olarak uygun mod seçilmelidir.
Elektrokinetik enjeksiyon, numuneyi kılcal damar üzerine enjekte etmek için voltaj kullanılmasını içerir. Numune bir tampon hazne görevi görür (Şekil 1). Bir voltaj uygulanır ve analit (ler) kapiler üzerine göç eder. Enjekte edilen materyal miktarı, analit (ler) in hareketliliğine bağlıdır. Enjekte edilen miktar şu şekilde verilir:
q enjekte edilen miktardır (konsantrasyon ile aynı birimlerde), ben analitin hareketliliğidir, meof EOF hareketliliğidir, V voltajdır, r kapiler yarıçaptır, C konsantrasyondur (g veya mol cinsinden) , t zamandır ve Lt toplam kılcal uzunluktur.
Elektrokinetik enjeksiyon, analit müdahale eden türlerin (farklı hareket kabiliyetlerine sahip) varlığında, kalitatif uygulamalarda veya viskoz tamponlar veya jeller kullanıldığında yararlıdır. İletkenlik, mikro ortamlar ve matris farklılıklarının neden olduğu değişkenlik yeniden üretilebilirliği önemli ölçüde azalttığı için genellikle kantitatif uygulamalar için uygun değildir. Numune tükenmesi önemli bir sorun olabileceğinden, tekrarlanan enjeksiyonlara ihtiyaç duyulduğunda farklı numunelerin kullanılması önerilir.
Basınçlı (veya hidrodinamik) enjeksiyon, numuneyi kılcal damar üzerine “itmek” için basınç kullanımını içerir. Kolona yüklenen numune hareketlilikten bağımsızdır ve kapiler üzerine neyin yüklendiğine göre fark gözetmez. Enjekte edilen miktar Hagen2Poiseuille denklemi tarafından verilir:
burada q enjekte edilen miktardır (Konsantrasyon ile aynı birimlerde), DP uygulanan basınçtır (veya basınç farkı), r kapiler yarıçaptır, C konsantrasyondur (g veya mol cinsinden), t zamandır, Z numune viskozitesi ve Lt toplam kılcal uzunluktur.
Basınçlı enjeksiyon, kantitatif uygulamalar için veya viskoz olmayan tamponlar ve jeller kullanıldığında faydalıdır. Sürenin uzunluğu bant genişlemesini etkileyecektir, bu nedenle bu en aza indirilmelidir, ancak süre çok kısa olursa değişkenlik ortaya çıkabilir. Modern enstrümantasyon, basınçlı enjeksiyon kullanılarak% 1’den daha iyi tekrar üretilebilirliğe izin verir (unutmayın, tipik enjeksiyon hacimleri 102100 nL’dir).
Kapiler
Jorgenson ve Lukacs’ın 1981’deki makalesine kadar, 2 serbest çözelti elektroforezindeki en büyük engel, elektriğin tampon ortamından geçişinin neden olduğu Joule ısısının oluşmasıydı. Isı üretimi, ortam boyunca tekdüze bir şekilde meydana gelir ve uzaklaştırma yalnızca kılcalın duvarları boyunca gerçekleşir, bu nedenle kılcalın merkezi ile tampon2 duvar arayüzü arasında bir sıcaklık gradyanı oluşur.
Merkezdeki daha sıcak sıvı, daha az viskoz olacak ve merkezi bölgelerde elektroforetik hareketliliklerin daha büyük olmasına neden olacaktır. Böylece, elektroforetik tıpa akışı, bölge merkezi kenarlardan daha hızlı hareket ederek eğimli bir şekil geliştirebilir. Kılcal iç çapın küçültülmesi, yüzey-hacim oranını artırmaya ve ısı dağılımını artırmaya hizmet eder.
İç çapı 100 mm’den az olan kapilerler kullanılarak tıpa akışı sağlandıktan sonra, tekniğin hayatta kalmasını sağlamak için ana engel aşıldı. Sonraki zorluk, mikro ölçekte üretim enstrümantasyonu oldu.
Bu nedenle, CE performansı göz önüne alındığında en önemli CE ekipmanının kapiler olduğu söylenebilir. Kapiler ID, OD ve uzunluğa dikkat edilmelidir. Diğer hususlar, pencerenin temizliğini ve kılcal uçların kesilmesini içerir. Kötü seçilmiş veya hazırlanmış bir kılcal damar kötü sonuçlara ve çok değerli zaman kaybına neden olur.
HPLC Avantaj ve dezavantajları HPLC cihazı çalışma prensibi HPLC cihazı kullanımı Hplc cihazı ne ise yarar HPLC pik yorumlama HPLC sonuç değerlendirme Mobil faz Nedir Sıvı Kromatografisi