Mikobakteriler – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Mikobakteriler
Mycobacterium cinsi, birçoğu insan hastalığına neden olabilen birçok tür içerir. Birkaçı toprakta ve suda ve ayrıca insan derisi ve mukoza zarlarında bulunan saprofitik organizmalardır. Bu gruptaki iki önemli patojen, tüberküloz ajanı olan Mycobacterium tuberculosis ve Hansen hastalığının (cüzzam) nedeni olan Mycobacterium leprae’dir.
Bununla birlikte, Mycobacterium kansasii ve Mycobacterium avium kompleksi, kronik akciğer hastalığı olan kişilerde hastalığa neden olur ve lösemi ve edinilmiş immün yetmezlik sendromu (AIDS) olan hastalarda daha sık fırsatçı patojenler olarak görülmektedir.
İnsan patojeni olan mikobakterilerin bazılarını neden olabilecekleri hastalık tipine göre özetlemektedir. Normalde insan hastalıklarıyla ilişkili olmayan ve kommensal olan mikobakteri türleri de listelenmiştir.
Tüberküloz ve diğer mikobakteriyel enfeksiyonların laboratuar tanısı, aside dirençli yaymalarda ve enfeksiyonun lokalize olabileceği vücudun herhangi bir bölgesinden klinik örneklerin kültürlerinde organizmaların tanımlanmasıyla yapılır. Akciğer hastalığında balgam örnekleri ve mide yıkamaları uygundur, ancak hastalık yayılırsa, organizmalar çeşitli alanlarda bulunabilir.
İdrar, kan, omurilik sıvısı, lenf düğümleri veya kemik iliği, özellikle bağışıklığı baskılanmış hastalarda tanısal değer taşıyabilir. Mikobakterilerin tanımlanması için toplanan herhangi bir örnek, özel bir dikkatle ve sıkı bir asepsi ile ele alınmalıdır.
Bu organizmalar, kalın balmumu tabakaları ile, olumsuz çevresel koşullar altında bile uzun süre hayatta kalabilirler. Kuru balgamda veya diğer bulaşıcı deşarjlarda uzun süre canlı kalabilirler ve birçok dezenfektana karşı dirençlidirler. Tüberkül basilinin kimyasal olarak yok edilmesi için uygun bir dezenfektan seçmek, dikkatli bir değerlendirme gerektirir.
Balgam gibi klinik örnekler mikobakteriler için kültürlenmeden önce sindirilmeli ve konsantre edilmelidir. Sindirim işlemi sırasında, kalın, viskoz balgam sıvılaştırılır, böylece mevcut mikobakteriler, özellikle az sayıda mevcutsa, numune boyunca eşit olarak dağıtılır.
Mikobakteri
Mikobakteri hücre duvarı
Mikobakteri nedir
Mycobacterium bovis
Tüberkülozun Mikrobiyolojik Tanısı
Mikobakteri bovis
Mycobacterium tuberculosis özellikleri
Mikobakteri Mikoplazma
Sindirimden sonra örnek, mikobakterileri santrifüj tüpünün altında yoğunlaştırmak için yüksek hızda santrifüjlenir. Süpernatan sıvı, uygun bir dezenfektan içine atılır ve santrifüjlenmiş peletin bir kısmının asitle hızlı boyanmış bir lekesi hazırlanır ve mikroskobik olarak incelenir.
Diğer kısım özel mikobakteriyel kültür medyasında kültüre alınmıştır. Sindirim ve konsantrasyon adımları, klinik örneklerde mikobakterinin mikroskobik tespitini ve kültürde geri kazanımını büyük ölçüde iyileştirir.
Kinyoun boyası, aside dirençli basilleri boyamak için yaygın olarak kullanılır. Organizmalar mavi bir arka plana karşı kırmızı boyarken, aside dirençli olmayan organizmalar mavidir. Tüberkül basilleri ince çubuklardır ve genellikle boncukludur.
Fluoresan boyalar auramine ve rhodamine kullanan başka bir leke, organizmaların karanlık bir arka plana karşı parlak nesneler olarak hızlı bir şekilde tespit edilmesine izin verir. Bu teknik günümüzde birçok laboratuvarda kullanılmaktadır çünkü floresan organizmaların tespit edilmesi basil ile boyanan basillere göre daha kolaydır.
Böylece, preparat 1000 yerine 400 büyütmede taranabilir. Çoğu mikobakteri, çikolata veya kanlı agar plakaları gibi geleneksel laboratuvar besiyerinde gelişmez.
Bu nedenle, kültür için yumurta, yumurta ve serum gibi kompleks besinler içeren özel katı besiyeri kullanılır. Lowenstein-Jensen besiyeri, eğimli olarak hazırlanmış katı bir yumurta besiyeri olup, yaygın olarak kullanılan birkaç besiyerinden biridir. Et suyu ortamı da mevcuttur.
Tüberkül basili ve diğer mikobakterilerin çoğu çok yavaş büyür. Görünür büyümenin ortaya çıkması için M. tuberculosis için en az birkaç gün ve 4 ila 8 haftaya kadar gereklidir.
Aerobik organizmalardır, ancak artan atmosferik CO2 ile büyümeleri bir dereceye kadar hızlandırılabilir. Mikobakteriler tarafından salınan CO2’yi algılayan otomatik cihazlar birçok laboratuvarda kullanılır ve görünür büyüme görülmeden önce tespit yapılmasına izin verir. Mikobakteriler broth kültür besiyerinde bulunan özel substratları metabolize ettiğinde CO2 salınır.
M. leprae (Hansen basili olarak da bilinir) laboratuvar ortamında yetiştirilemez. Hansen hastalığının laboratuar tanısı, lezyonlardan aside dirençli materyal yaymalarının doğrudan mikroskobik incelemesine dayanır.
Mycobacterium tuberculosis’in Mikroskobik Morfolojisi
Amaç
Smearlarda M. tuberculosis’i incelemek
Malzemeler
Aside dirençli hazırlanmış lekeler
Prosedürler
Yağa daldırma altında hazırlanan slaytları inceleyin. Gördüğünüz gibi renkli bir tüberkül basili çizimi yapın.
“Aside dirençli” terimine ilişkin yorumunuzu belirtin.
Mikobakteriler İçin Balgam Örneği Kültüre Alma
Amaç
Mikobakterileri kültürde incelemek
Malzemeler
Lowenstein-Jensen eğimleri
Simüle balgam kültürü (önceden sindirilmiş ve konsantre)
Prosedürler
1. Doğrudan balgam örneğinden aside dirençli bir leke hazırlayın (Egzersiz 6’yı inceleyin). Gözlemleri okuyun ve kaydedin.
2. Örneği Lowenstein-Jensen besiyerinde inoküle edin ve gelişim görünene kadar 35 ° C’de inkübe edin.
3. Görünür büyüme ve rekor görünüm açısından inceleyin.
Sonuçlar
1. Lekeli yaymanın diyagram gözlemleri.
2. Lowenstein-Jensen besiyerindeki büyümeyi tanımlayın. Büyüme ortaya çıkmadan kaç gün önce?
Sorular
1. İki saprofitik, kommensal Mycobacterium türünü adlandırın.
2. Hansen basili nedir?
3. Neden kültürden önce “sindirildiğini” ve konsantre olduğunu açıklayın.
4. Tüberkül basili aside neden hızlıdır?
5. Tüberkül basilinin kimyasal dezenfeksiyonla yok edilmesi neden zordur?
6. Tüberküloz hastalarından örneklerin alınması ve kullanılması için hangi özel önlemler gereklidir?
7. Asit-hızlı basilinin varlığı tüberküloz için yeterli kanıt mı?
8. Patojenik mikobakteriler için bazı kültür raporları neden veya daha fazla hafta gerektiriyor?
9. Tüberkülozlu bir hastaya bakıyorsanız, ne tür izolasyon önlemleri kullanırdınız?
10. Amerika Birleşik Devletleri’nde, AIDS’li bir hastadan aside dirençli bir izolat büyük olasılıkla hangi mikobakteriyel türdür?
Mikoplazmalar, Rickettsiae, Chlamydiae, Virüsler ve Prionlar
Mikoplazmalar, rickettsiae ve chlamydiae gerçek bakteriler olarak sınıflandırılır, ancak bunlar son derece küçüktür ve çeşitli nedenlerle sıradan bakteriyolojik yöntemlerle kültürlenemezler.
Virüsler, tüm mikroorganizmaların en küçüğüdür ve ayrı olarak sınıflandırılır. Virüsleri yaymak ve incelemek için uzun yıllardır geliştirilen teknikler, onların doğası ve patojenitelerinin anlaşılmasını sağlamıştır.
Elektron mikroskobu, son derece hassas biyokimyasal, fiziksel, moleküler ve immünolojik prosedürlerle birlikte, virüslerin yapısını ve hücresel düzeyde hastalıktaki rollerini ortaya çıkardı.
Prionlar, yavaş viral enfeksiyonlara neden olan proteinli bulaşıcı parçacıklardır çünkü gelişmeleri uzun yıllar alır. Prionların boyutu virüslerden daha küçüktür ve nükleik asit içermediğine inanılır.
Bu tür ajanların hastalığa neden olabileceği yollar bilinmemektedir, ancak devam eden moleküler çalışmalar cevabı çözebilir.
Mikobakteri Mikobakteri bovis Mikobakteri hücre duvarı Mikobakteri Mikoplazma Mikobakteri nedir Mycobacterium bovis Mycobacterium tuberculosis özellikleri Tüberkülozun Mikrobiyolojik Tanısı