Hatalardan kaçınmak için tüm sistemler, üreticinin talimatlarına sıkı sıkıya bağlı kalmayı gerektirir. Saf bir kültürle başlama başarısızlığı, yaygın bir hata kaynağıdır. Bu, kartı veya şeridi aşılamak için kullanılan süspansiyondan bir saflık plakasının aşılanmasıyla önlenebilir.
Plaka karışık bir büyüme gösteriyorsa, testler tekrarlanır. Deneyimsiz bakteriyologlar, klinik olarak ne kadar olanaksız olursa olsun, bu sistemlerin sonuçlarını çoğu kez sorgulamadan kabul ederler. Deneyimli çalışanlar, sonuçları klinik bağlamlarında yorumlayacak ve olası olmayan veya olağandışı tanımlamaları onaylayacak veya tekrarlayacaktır.
Yeni Gelişmeler
Moleküler Teknikler
Daha önce tartışıldığı gibi, moleküler yöntemler, klinik örneklerde yavaş büyüyen ve kültürlenemeyen patojenlerin saptanmasında faydalıdır. Ek olarak, bu yöntemler araştırma ve referans laboratuarları tarafından bakteri tiplendirilmesi ve yeni türlerin karakterizasyonu için yaygın olarak benimsenmiştir.
DNA çip teknolojisinin geliştirilmesi özellikle heyecan verici, örn. katı bir destek (çip) üzerine yerleştirilmiş binlerce oligonükleotidin üretildiği DNA mikroassayleridir. Bunlar, PCR ürünlerini sıralamak için kullanılabilir. Şaşırtıcı bir şekilde, geliştirilmekte olan biyoelektronik çipler, örnekleri bir çip üzerindeki farklı analitik alanlara taşımak için elektrik alanları kullanan ve “çip üzerinde laboratuvar” nihai amacını gerçekleştiren biyoelektronik çiplerdir.
Kütle spektrometresi PDF
Kütle spektrometresi Ders Notları
Kütle spektroskopisi çalışma prensibi
Kütle Spektroskopisi nedir
Kütle spektrometresi soruları
Kütle spektrometresi çeşitleri
Kütle spektrometresi konu anlatımı
Kütle spektrometresi kullanım alanları
Kütle Spektrometrisi
Kütle spektrometresi tekniklerindeki gelişmeler, bakteriyel tanımlama alanındaki uygulamalarına yönelik araştırmaları teşvik etmiştir. Örneğin, sağlam organizmaların matris destekli lazer desorpsiyon iyonizasyon uçuş zamanı kütle spektrometrisinin (MALDI-TOF-MS), bir koloninin bir kültür plakasından çıkarılmasından birkaç dakika sonra karakteristik kütle spektral parmak izlerini ürettiği gösterilmiştir. tanımlamaya izin veren. Bu tekniğin rutin klinik laboratuvara ulaşıp ulaşmadığını zaman gösterecek olsa da, kesinlikle ilginç bir gelişmedir.
Tıbbi önemi olan bakterilerin tanımlanması
Aşağıda, tıbbi öneme sahip bakterilerin tanımlanması için kısa bir giriş yer almaktadır.
Gram pozitif
Gram-pozitif bir kokun, katalaz üretme yeteneği, Staphylococcus ve Micrococcus gibi katalaz-pozitif cinsleri katalaz-negatif cinslerden ayıran yararlı ve hızlı bir testtir. Streptococcus ve Enterokok. Sonraki tanımlama aşağıdaki bilgilere göre ilerler.
Staphylococcus ve Micrococcus
Bu katalaz pozitif cins, sıvı ortamda büyütüldüğünde karakteristik olarak kümeler halinde düzenlenmiş hücreler üretir. Stafilokoklar, anaerobik koşullar altında gelişebilme yetenekleriyle mikrokoklardan ayırt edilebilir.
Deri, yara ve akciğer enfeksiyonunun yaygın bir nedeni olan Staphylococcus aureus, plazmayı koagüle etme ve ısıya dayanıklı bir DNAaz enzimi üretme kabiliyeti ile deri kommensalleri olan diğer stafilokoklardan ayırt edilebilir.
Koagülaz aktivitesi birkaç saat içinde tespit edilerek hızlı ve güvenilir bir tanımlama sağlar. Koagülaz negatif stafilokok suşları ticari kitlerde belirtilebilir.
Streptococcus ve Enterococcus
Sıvı ortamda bu katalaz negatif cinsler, çiftler veya zincirler halinde düzenlenmiş hücreler üretir. Kanlı agarda, 24 saatlik inkübasyondan sonra 0,1–1,0 mm çapında koloniler oluştururlar ve kolonilerin çevresinde gözlemlenen hemoliz tipi, yararlı bir başlangıç sınıflandırması sağlar.
Hemolitik streptokoklar en iyi anaerobik olarak yetiştirilen kültürlerde gösterilir. Koloni etrafındaki kan içeren büyüme ortamının tamamen temizlenmesini sağlayan suşlar (-hemoliz), Lancefield gruplamasıyla farklılaştırılan birkaç önemli patojenik türü içerir. Bu, 1 saatten daha kısa bir sürede ticari testlerle gerçekleştirilebilir. Şüphe durumunda ticari biyokimyasal test kitleri kullanılabilmesine rağmen, bu genellikle tanımlamayı tamamlamak için yeterlidir.
-Hemolitik streptokoklar, koloni etrafındaki kan içeren büyüme ortamının yeşilimsi bir rengi olan kısmi hemoliz (-haemoliz) üretir. En önemli patojenik tür, pnömokok olan Streptococcus pneumoniae’dir.
Kolonyal görünümü (ressam kolonileri), optokine duyarlılığı ve kolonilerinin safra tuzu çözeltisindeki çözünürlüğü ile diğer-hemolitik türlerden ayrılır. Diğer – hemolitik türler üst solunum yolunda kommensal olarak bulunur, ancak bazen ciddi sepsise neden olabilir, örn. subakut bakteriyel endokardit. Ticari kitlerle belirtilebilirler.
Enterokoklar tipik olarak kanlı agar üzerinde hemolitik değildir, ancak tek tek suşlar hemoliz gösterebilir – veya -. Çoğu streptokoklardan farklı olarak enterokoklar,% 40 safra içeren ortamda büyüyebilir ve aesculini hidrolize edebilir ve bu özellikler onları klinik laboratuvarda tanımlamak için kullanılır. Genellikle Lancefield grup D antijeni taşırlar ve gerekirse ticari kitler tarafından belirlenebilirler.
Gram Pozitif Basil
Tıbben önemli cinsler başlangıçta kolonyal morfolojileri, spor oluşturma yetenekleri ve aerobik veya anaerobik büyüme koşulları gerekliliği ile tanımlanır.
Bacillus ve Clostridium
Bu spor oluşturan cinsler, katalaz ve büyüme için gerekli koşullar ile farklılaştırılabilir. Clostridium türleri katalaz negatif ve katı anaeroblardır. Basiller katalaz pozitiftir ve tümü aerobik olarak büyür. Gaz kangreninin nedeni olan Clostridium perfringens, bu tür tarafından üretilen spesifik bir enzim olan lesitinazı saptayan Nagler testi ile geçici olarak tanımlanabilir. Her iki cins de biyokimyasal testlerle belirlenebilir.
Listeria ve Corynebacterium
Bu aerobik, spor oluşturmayan cinsler, birincil izolasyon ortamında birbirleriyle karıştırılabilir. Sepsis ve menegensefalitin bir nedeni olan Listeria monocytogenes, oda sıcaklığında et suyu kültüründe karakteristik “yuvarlanma” motilitesi gösterir ancak 37 ° C’de değildir, aesculini hidrolize edebilir ve genellikle kanlı agarda hemolitiktir.
Corynebacteria spp. cilt ortaklarını, fırsatçı patojenleri ve birkaç ana patojeni içerir. Çok az tür -haemolitiktir. En önemli patojen, tellürit içeren seçici besiyerindeki boğaz sürüntülerinden izole edilebilen Corynebacterium diphtheriae’dir. Toksijenik suşlar, Elektest tarafından tespit edilir.
Gram negatif
Bu grupta üç ana insan patojeni vardır: Belsoğukluğunun nedeni Neisseria gonorrhoea (gonokok); Neisseria meningitidis (meningokok), bir septisemi ve menenjit nedeni; ve göğüs ve göz enfeksiyonlarının bir nedeni olan Moraxella catarrhalis. Büyüme özellikleri ve biyokimyasal testlerle birbirlerinden ve ortak insan öğeleri olan diğer türlerden ayırt edilmelidirler. Oksidaz ve katalaz pozitiftirler.
Aerobik Gram Negatif Basil
Basit büyüme gereksinimleri
Ticari sistemler, bu grup için tanımlamayı büyük ölçüde basitleştirdi. Bununla birlikte, ortak florayı potansiyel patojenlerden ayırmak ve doğru test kartını veya şeridi seçmeye yardımcı olmak için birkaç basit test hala gereklidir.
Oksidaz testi, gerçekleştirilmesi saniyeler süren yararlı bir ön araştırmadır. Oksidaz negatif cinsler, gastrointestinal sistemin kommensalleri ve patojenleri olan birçok türü içerir (Enterobacteriaceae).