Elektroforetik Hareketlilik (li) – Farmasötik Analiz İçin katiller Elektroforez Yöntemleri – Ayırma Teknolojisi –FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Elektroforetik Hareketlilik (li)
Yüklü bileşikler, bir elektrik alanındaki elektrik kuvvetinin (Fel) ve Stokes sürtünme kuvvetinin (Fs) etkisine maruz kalır. Bu iki kuvvet (kgcms 2 cinsinden) kararlı durum koşullarında dengede olduğunda, aşağıdaki denklemler yazılabilir:
- Fel 1⁄4 Fs
Burada qi (C cinsinden) bir bileşiğin net iyonik yükü, E (V cm cinsinden elektrik alan kuvveti, Z (g cm1 s1 olarak) ortamın viskozitesi, ri (cm cinsinden) hidrodinamik yarıçap yüklü bileşiğin ve! vi (cms-1 cinsinden) bileşiğin göç hızı Denklem (10) ‘dan hareket hızı, sistemin özelliklerinin ve bileşene özgü olanın bir fonksiyonu olarak ifade edilebilir.
Denklem (11) ‘de görülebileceği gibi, hareket hızı bir bileşiğin iyonik yükü ve uygulanan elektrik alan kuvveti ile doğru orantılıdır. Ortamın viskozitesi ve bileşiğin hidrodinamik yarıçapı ile ters orantılıdır.
Elektrik alan kuvveti, aşağıdaki denklemde açıklandığı gibi uygulanan voltaj farkı (V olarak V) ve kılcalın toplam uzunluğu (L, cm olarak) tarafından belirlenir.
Kılcalın uzunluğu ve uygulanan voltaj belirli bir sistem için tipik olduğundan, göç hızı bir sisteme özgü bir özelliktir. Bu nedenle, farklı uygulanan gerilimlere sahip veya farklı uzunluklardaki kapilerlerle elde edilen çalışmalar arasında karşılaştırma yapmak mümkün değildir. Bu nedenle elektroforetik hareketlilik (cm2 V ,1 s1 cinsinden Mi) olarak adlandırılan normalleştirilmiş bir hız özelliği kullanılır.
Elektroforetik hareketliliğin özelliklerinden türetilebileceği gibi, bir bileşiğin yer değiştirmesi, yükün, ortamın viskozitesinin ve bileşiklerin dinamik yarıçapının değiştirilmesiyle etkilenebilir. Denklem (11) ‘de Denklem (13) eklendiğinde, elektroforetik hareketlilik, göç hızı ile elektrik alan kuvveti arasındaki doğrusal ilişkideki orantılılık faktörüdür:
- vi 1⁄4 mi E
Denklem (13) ve (14) ‘ten, bir bileşiğin yükünün CE’deki seçicilik ayarlamasının ana parametresi olduğu türetilmiştir. Bir bileşiğin yükü, asidik veya bazik fonksiyonel grupların iyonlaşmasını değiştirerek ayrışma derecesi (ai) ile ayarlanabilir.
Bu şekilde, göç hızı da doğrudan ai ile orantılıdır. Böyle bir durumda göç hızı ile elektrik alan kuvveti arasındaki orantılılık faktörüne etkin elektroforetik hareketlilik (! Meff) ve göç hızına etkin göç hızı (! Veff) denir:
- veff 1⁄4 ai mi E 1⁄4 meff E
Bir bileşiğin göç süresi (ti), göç hızı ve göç ettiği mesafeye göre belirlenir:
CE’deki migrasyon mesafesi (1), girişten (enjeksiyon bölgesi) tespit noktasına kadar kılcal damar uzunluğuna eşittir ve L, kılcalın toplam uzunluğudur. Geçiş süresi, kılcal uzunluğun artmasıyla artar ve bileşiklerin hareketliliği ve uygulanan voltajların artmasıyla azalır.
Elektroforez yöntemleri
Kağıt elektroforezi nedir
İki boyutlu elektroforez
Elektroforez yöntemi
Elektroforez pdf
Elektroforez uygulamaları
Poliakrilamid jel elektroforezi
Agaroz jel Elektroforezi sonucu yorumlama
C. Elektroforetik Göç
CE’deki genel göç, etkili ve elektroozmotik hareketliliğin birleşik etkisiyle belirlenir. Görünür elektroforetik hareketlilik (! Mapp) bu nedenle göç hızı ve elektrik alan kuvveti arasındaki ilişkide orantılılık faktörü olarak kullanılır. Benzer şekilde, göç hızı artık görünür göç hızı (! Vapp) olarak adlandırılmaktadır.
M uygulaması, M eff ve M eof toplamına eşit olduğundan, görünen şu şekilde ifade edilir:
- 1⁄4 m uygulama E 1⁄4 ð m eff þ m eof Þ / E
Bhere l, girişten (enjeksiyon bölgesi) tespit noktasına kadar kılcalın uzunluğuna eşittir ve L, kılcalın toplam uzunluğudur. Kaynaşmış silika kılcal damarları kullanan CE’de EOF katoda doğru yönlendirilir; bu nedenle, katyonların görünür göç hızı olumlu etkilenirken, anyonların yer değiştirmesi olumsuz etkilenir. Nötr bileşikler de EOF nedeniyle kapiler yoluyla katoda taşınır.
Elektroendosmotik hareketlilik yeterince yüksek olduğunda, tek bir seferde hem katyonları hem de anyonları ayırmak bile mümkündür. M eof! M eff’den daha büyük olduğunda, başlangıçta anoda doğru hareket eden anyonlar, pozitif bir görünür hız nedeniyle hala katoda doğru taşınır. Nötr bileşikler, EOF hızıyla birlikte hareket eder, ancak elektroferogramda bir tepe altında çözülmez.
Elektroozmotik hareketliliğin etkisi tüm numune bileşenleri için eşit olduğu için seçiciliği belirleyen etkili hareketliliktir. Etkili hareketlilik,! Meof’un boyutu biliniyorsa, görünürdeki hareketlilikten çıkarılabilir. ! Meof’u belirlemek için çeşitli yöntemler1 uygulanır; ancak, genel olarak nötr bir markör uygulama prosedürü kullanılır.
Bir belirteç, yalnızca EOF (nötr) nedeniyle hareket eden bir bileşiktir. Nötr bir bileşiğin hızı, duvar adsorpsiyonu gibi başka rahatsız edici süreçler meydana gelmediğinde EOF’nin hızını temsil eder. Nötr işaretleyicinin (teof) pratik olarak elde edilen göç süresi kullanılarak, EOF’nin hızı hesaplanabilir.
Bir bileşiğin etkili hareketliliği şimdi, bu bileşiğin pratik olarak elde edilen göç süresinden ™ ve nötr işaretleyicinin yer değiştirme süresinden hesaplanabilir.
Burada l, girişten (enjeksiyon sahası) saptama noktasına kadar kılcal uzunluğuna eşittir ve L, kılcalın toplam uzunluğudur.
D. Verimlilik
Yakın hareket kabiliyetine sahip iki bileşik arasında iyi bir ayrım elde etmek için, her bir bileşiğin kılcal (kolon) boyunca dar bantlar (bölgeler) halinde göç etmesi önemlidir. Ayırma sütunundaki bu dar bantlar, son elektroferogramda dar pikler olarak yansıtılır.
Bir CE ayrımının elektroferogramındaki bantların genişliği, kapilerdeki (arka plan tampon elektrolitinde) yer değiştiren çözünen bölgelerin dağılımı ile belirlenir. CE dinamik bir süreçtir; bu nedenle dispersiyon etkilerinin ortaya çıkması kaçınılmazdır.
Dağılımın kapsamı, “Gauss” bölgelerinin standart sapması ile gösterilebilir ve elektroferogramda kolayca ölçülebilen maksimum yüksekliğin47,48 0.607’sindeki tepe genişliğine karşılık gelir. Toplam sistem varyansı (s2tot), dağılmaya yol açan çeşitli parametrelerden etkilenir.
Lauer ve McManigill49’a göre bunlar, radyal termal (sıcaklık gradyanı) varyansı (s2T), elektriksel alan pertürbasyonu (elektrodispersiyon) varyansı (s2E), duvar adsorpsiyon varyansı (s2W), EOF varyansı (s2F), enjeksiyon varyansı (s2I) ve boylamsal (eksenel) difüzyon varyansı (s2L) olur.
Birkaç yazar10,47,50252 bu bireysel varyansları daha ayrıntılı olarak tanımlamış ve araştırmış ve hatta algılama varyansı (s2D) ve diğerleri (s2O) gibi ek varyans kaynakları tanımlamıştır:
- s2tot 1⁄4s2T þs2E þs2W þs2F þs2I þs2L þs2D þs2O
Agaroz jel elektroforezi sonucu yorumlama Elektroforez pdf Elektroforez uygulamaları Elektroforez yöntemi Elektroforez yöntemleri İki boyutlu elektroforez Kağıt elektroforezi nedir Poliakrilamid jel elektroforezi