CZE Metodu Yeterliliği – Farmasötik Analiz İçin Kapiller Elektroforez Yöntemleri – Ayırma Teknolojisi – FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Buffer’ı CZE’de Çalıştırın
Çalıştırma tamponundaki küçük değişiklikler, antikor profili üzerinde önemli bir etkiye sahip olabilir, bu etkiler aşağıda gösterilmiştir. Şekil 31, pH yalnızca 0,2 birim değiştirildiğinde ayırma ve göç süresi üzerindeki etkileri göstermektedir.
Çalışma tamponu pH’ı değiştiğinde IS’nin göç süresinin değişmediğini unutmayın; bununla birlikte, glikoprotein izoformlarının hareketliliği ve çözünürlüğündeki değişimler belirgin hale gelir.
Şekil 32’de gösterildiği gibi, çalışma tamponu konsantrasyonundaki değişiklikler, migrasyon süresini, çözünürlüğü ve detektör yanıtını da etkileyebilir (örn., UV olmayan şeffaf tuz kullanımından kaynaklanan artan bir arka plan, daha düşük tepe yanıtı ve daha büyük taban çizgisi kayması ile sonuçlanır). Son olarak, çalışma tamponu tuzu seçimi, Şekil 33’te gösterildiği gibi ayırmayı önemli ölçüde etkileyebilir.
Yukarıda sunulan verilere dayalı olarak, bu örnek için seçilen son çalıştırma tamponu koşulları, pH 3.8’de 30 mM Tampon X idi.
CZE’de Veri Analizi
Sağlam CZE ayırma kimyası geliştirmeye ek olarak, yöntem bir cGMP veya QC ortamında uygulanacaksa veri analizi eşit derecede sağlam olmalıdır. Bu nedenle, yöntem, analizler arası geçiş sürelerindeki küçük değişiklikleri hesaba katmak için geliştirilen tepe entegrasyon parametreleriyle, aşırı taban çizgisi dalgalanmalarından (örneğin, gürültü ve / veya sapma) arınmış olacak şekilde optimize edilmelidir. IS’nin geçişine bağlı olarak, QC analistinin toplu çalışmayı otomatik olarak işlemek için en yüksek entegrasyon parametrelerinde yalnızca küçük ayarlamalar yapması gerekir.
Transfer edilebilir sosyal beceriler
Sosyal beceriler etkinlikleri
İletişim ve sosyal beceriler
Sosyal beceri programları
Okul öncesi Dönemde sosyal beceriler
Ergenlerde sosyal beceri eğitimi
Sosyal beceri eğitiminde kullanılan stratejiler
Sosyal beceri özellikleri
CZE Metodu Yeterliliği
(a) Özgüllük:
Bölüm 9 ve 10’da tartışıldığı gibi, analiz edilecek tüm numune türleri (ilaç maddesi, ilaç ürünü, işlem içi, stabilite), müdahale edici zirvelerin olup olmadığını belirlemek için uygun tampon matrisine sahip olmalıdır. Şekil 34, ilgili tampon matrisiyle karşılaştırılan bir proses içi numunenin bir örneğini göstermekte ve ilgilenilen bölgede müdahale edici zirvelerin meydana gelmediğini göstermektedir.
(b) Doğrusallık ve Aralık:
Tablo 1’de gösterildiği gibi, doğrusallık ve aralık, enjeksiyonun doğrusallığı ve numune konsantrasyonunun doğrusallığı dahil olmak üzere çeşitli yollarla test edilebilir. Tipik olarak, istenen enjeksiyon parametresinin% 502150’lik bir aralığı test edilir (tüm numune türleri, değerlendirilen yöntem kullanılarak analiz edilecektir). Şekil 35, bir enjeksiyon doğrusallık değerlendirmesinden elde edilen sonuçları temsil etmekte olup, istenen enjeksiyon süresinin% 502150’sinin tekrar enjeksiyonlar için toplam pik alana göre grafiğini göstermektedir. Veriler, toplam pik alanı ve enjeksiyon süresi arasında geniş bir doğrusallık aralığı göstermektedir.
Doğrusallık verilerinin daha fazla analizi, tipik olarak artıkların doğrusal regresyon formuna uyum için incelenmesini ve veri noktalarının hat etrafındaki dağılımının rastgele olduğunu doğrulamayı içerir. Kalıntıların rastgele dağılımı idealdir; ancak rastgele olmayan modeller mevcut olabilir. Bir kalıntı grafiğinde görülen modelin dağılımına bağlı olarak, sonuçlar ayırma içindeki ideal olmayan koşulları ortaya çıkarabilir ve bu, daha sonra yöntemin aralığını tanımlamaya veya daha fazla geliştirmenin gerekli olduğu alanları göstermeye yardımcı olabilir. Kalan grafiğin bir örneği, Şekil 36’da gösterilmektedir. Enjeksiyon doğrusallık aralığında herhangi bir belirgin eğilim yoktu.
(c) Doğruluk:
Bir yöntemin doğruluğu, elde edilen değerin bilinen veya kabul edilen değerlere yakınlığı olarak tanımlanır. Doğruluk, CZE yönteminin doğasına ve sonuçları karşılaştırmak için ortogonal tekniklerin mevcudiyetine bağlı olarak bir dizi yolla belirlenebilir. Pratik ise, sivri uç geri kazanım çalışmaları (yani, geri kazanımın bilinen bir analit miktarı veya katışkıya eklenmiş safsızlık miktarıyla eşleşip eşleşmediğini belirlemek için test), ortogonal analiz karşılaştırmalarına iyi alternatiflerdir. ICH yönergeleri ayrıca, özgüllük, doğrusallık ve kesinlik sağlandıktan sonra yöntem doğruluğunun çıkarılmasına izin verir.
(d) Hassasiyet:
Yöntem hassasiyeti, aynı numunenin ölçümündeki değişkenliği ifade eder. Metot kesinliğinin üç ana bileşeni vardır: tekrarlanabilirlik (sistem veya test içi kesinlik olarak da bilinir), ara kesinlik (ayrıca analizler arası veya laboratuvar içi kesinlik olarak da bilinir) ve tekrarlanabilirlik hassasiyeti (aynı zamanda sağlamlık olarak da bilinir, genel veya arası laboratuar hassasiyeti).
Metot kalifikasyonu sırasında, yalnızca tekrarlanabilirlik ve ara kesinlik tipik olarak kaynak laboratuvarda ele alınır. Yöntemin cGMP laboratuvarı veya kalite kontrol laboratuvarı gibi başka bir laboratuvara aktarılması üzerine, metodun tekrarlanabilirliğinin hesaplanabileceği ek veriler üretilir. Analiz edilecek tüm numune türleri için tahlil kesinliği genellikle bu yöntemle belirlenir.
Kesinlik çalışmaları, birden çok analisti, günleri, kılcal damarları, tampon preparatlarını, cihazları vb. İçeren tam faktöryel matris tipi formatında planlanabilir. birden çok günlük dönem. Tipik olarak, kabul edilebilir kesinlik için yeterlilik hedefleri yöntem türüne, yeteneğine ve amaca göre önceden tanımlanacaktır. Kabul edilebilir hedefler, matematiksel olarak Horwitz yöntemiyle de belirlenebilir.
Ara hassasiyet testi sırasında gerçekleştirilen tek bir çalışma, tekrarlanabilirlik testi için önceden belirlenebilir (bkz. Tablo 9’daki çalışma 3), bu da daha az toplam çalışma ile sonuçlanır.
Kesinlik verileri oluşturulduktan sonra, ortalama, standart ve% RSD veya değişim katsayısı (CV) değerlerini belirlemek için özet olarak derlenmelidir. Metot gelecekte rutin olarak kullanılacaksa, ara kesinlik verileri başlangıçta tahlil trend veri tabanlarını doldurmak için de kullanılabilir.
(e) LOD / LOQ:
Yöntem türüne veya amaca bağlı olarak, LOD veya LOQ’nun belirlenmesi gerekebilir. ICH kılavuzları birkaç yaklaşımı tanımlar ve bilimsel olarak gerekçelendirilebilirse alternatif yaklaşımlara izin verir.24 Önerilen yaklaşımlar aşağıdakilere dayalı hesaplamayı içerir: sinyal-gürültü oranı (tipik olarak LOD için 3: 1 ve LOQ için 10: 1 olarak ayarlanır); yanıtın ve eğimin standart sapması; bir boş cevabın standart sapması veya bir kalibrasyon eğrisi.
(f) Sağlamlık:
Biyofarmasötik bileşikler için bir CZE yönteminin sağlamlık testi tipik olarak üç ana alana odaklanmalıdır: numune, kapiler ve çalışma tamponu. Tahlil geliştirme süreci boyunca, optimizasyon için yapılan belirli tedirginlikler muhtemelen geçiş zamanı ve çözünürlüğünde değişikliklere neden olacaktır. Her değişken, her pertürbasyonun etkilerine ilişkin daha kesin sonuçlar çıkarmak için izole edilebilir ve test edilebilir.
Ergenlerde sosyal beceri eğitimi İletişim ve sosyal beceriler Okul öncesi Dönemde sosyal beceriler Sosyal beceri eğitiminde kullanılan stratejiler Sosyal beceri özellikleri Sosyal beceri programları Sosyal beceriler etkinlikleri Transfer edilebilir sosyal beceriler