Yüklü bileşikler, bir elektrik alanındaki elektrik kuvvetinin (Fel) ve Stokes sürtünme kuvvetinin (Fs) etkisine maruz kalır. Bu iki kuvvet (kgcms 2 cinsinden) kararlı durum koşullarında dengede olduğunda, aşağıdaki denklemler yazılabilir:

• Fel 1⁄4 Fs

Burada qi (C cinsinden) bir bileşiğin net iyonik yükü, E (V cm cinsinden elektrik alan kuvveti, Z (g cm1 s1 olarak) ortamın viskozitesi, ri (cm cinsinden) hidrodinamik yarıçap yüklü bileşiğin ve! vi (cms-1 cinsinden) bileşiğin göç hızı Denklem (10) ‘dan hareket hızı, sistemin özelliklerinin ve bileşene özgü olanın bir fonksiyonu olarak ifade edilebilir.

Denklem (11) ‘de görülebileceği gibi, hareket hızı bir bileşiğin iyonik yükü ve uygulanan elektrik alan kuvveti ile doğru orantılıdır. Ortamın viskozitesi ve bileşiğin hidrodinamik yarıçapı ile ters orantılıdır.

Elektrik alan kuvveti, aşağıdaki denklemde açıklandığı gibi uygulanan voltaj farkı (V olarak V) ve kılcalın toplam uzunluğu (L, cm olarak) tarafından belirlenir.

Kılcalın uzunluğu ve uygulanan voltaj belirli bir sistem için tipik olduğundan, göç hızı bir sisteme özgü bir özelliktir. Bu nedenle, farklı uygulanan gerilimlere sahip veya farklı uzunluklardaki kapilerlerle elde edilen çalışmalar arasında karşılaştırma yapmak mümkün değildir. Bu nedenle elektroforetik hareketlilik (cm2 V ,1 s1 cinsinden Mi) olarak adlandırılan normalleştirilmiş bir hız özelliği kullanılır.

Elektroforetik hareketliliğin özelliklerinden türetilebileceği gibi, bir bileşiğin yer değiştirmesi, yükün, ortamın viskozitesinin ve bileşiklerin dinamik yarıçapının değiştirilmesiyle etkilenebilir. Denklem (11) ‘de Denklem (13) eklendiğinde, elektroforetik hareketlilik, göç hızı ile elektrik alan kuvveti arasındaki doğrusal ilişkideki orantılılık faktörüdür:

• vi 1⁄4 mi 􏰂 E

Denklem (13) ve (14) ‘ten, bir bileşiğin yükünün CE’deki seçicilik ayarlamasının ana parametresi olduğu türetilmiştir. Bir bileşiğin yükü, asidik veya bazik fonksiyonel grupların iyonlaşmasını değiştirerek ayrışma derecesi (ai) ile ayarlanabilir.

Bu şekilde, göç hızı da doğrudan ai ile orantılıdır. Böyle bir durumda göç hızı ile elektrik alan kuvveti arasındaki orantılılık faktörüne etkin elektroforetik hareketlilik (! Meff) ve göç hızına etkin göç hızı (! Veff) denir:

• veff 1⁄4 ai 􏰂 mi 􏰂 E 1⁄4 meff 􏰂 E

Bir bileşiğin göç süresi (ti), göç hızı ve göç ettiği mesafeye göre belirlenir:

CE’deki migrasyon mesafesi (1), girişten (enjeksiyon bölgesi) tespit noktasına kadar kılcal damar uzunluğuna eşittir ve L, kılcalın toplam uzunluğudur. Geçiş süresi, kılcal uzunluğun artmasıyla artar ve bileşiklerin hareketliliği ve uygulanan voltajların artmasıyla azalır.

Elektroforez yöntemleri
Kağıt elektroforezi nedir
İki boyutlu elektroforez
Elektroforez yöntemi
Elektroforez pdf
Elektroforez uygulamaları
Poliakrilamid jel elektroforezi
Agaroz jel Elektroforezi sonucu yorumlama

C. Elektroforetik Göç

CE’deki genel göç, etkili ve elektroozmotik hareketliliğin birleşik etkisiyle belirlenir. Görünür elektroforetik hareketlilik (! Mapp) bu nedenle göç hızı ve elektrik alan kuvveti arasındaki ilişkide orantılılık faktörü olarak kullanılır. Benzer şekilde, göç hızı artık görünür göç hızı (! Vapp) olarak adlandırılmaktadır.

M uygulaması, M eff ve M eof toplamına eşit olduğundan, görünen şu şekilde ifade edilir:

• 1⁄4 m uygulama E 1⁄4 ð m eff þ m eof Þ / E

Bhere l, girişten (enjeksiyon bölgesi) tespit noktasına kadar kılcalın uzunluğuna eşittir ve L, kılcalın toplam uzunluğudur. Kaynaşmış silika kılcal damarları kullanan CE’de EOF katoda doğru yönlendirilir; bu nedenle, katyonların görünür göç hızı olumlu etkilenirken, anyonların yer değiştirmesi olumsuz etkilenir. Nötr bileşikler de EOF nedeniyle kapiler yoluyla katoda taşınır.

Elektroendosmotik hareketlilik yeterince yüksek olduğunda, tek bir seferde hem katyonları hem de anyonları ayırmak bile mümkündür.  M eof! M eff’den daha büyük olduğunda, başlangıçta anoda doğru hareket eden anyonlar, pozitif bir görünür hız nedeniyle hala katoda doğru taşınır. Nötr bileşikler, EOF hızıyla birlikte hareket eder, ancak elektroferogramda bir tepe altında çözülmez.

Elektroozmotik hareketliliğin etkisi tüm numune bileşenleri için eşit olduğu için seçiciliği belirleyen etkili hareketliliktir. Etkili hareketlilik,! Meof’un boyutu biliniyorsa, görünürdeki hareketlilikten çıkarılabilir. ! Meof’u belirlemek için çeşitli yöntemler1 uygulanır; ancak, genel olarak nötr bir markör uygulama prosedürü kullanılır.

Bir belirteç, yalnızca EOF (nötr) nedeniyle hareket eden bir bileşiktir. Nötr bir bileşiğin hızı, duvar adsorpsiyonu gibi başka rahatsız edici süreçler meydana gelmediğinde EOF’nin hızını temsil eder. Nötr işaretleyicinin (teof) pratik olarak elde edilen göç süresi kullanılarak, EOF’nin hızı hesaplanabilir.

Bir bileşiğin etkili hareketliliği şimdi, bu bileşiğin pratik olarak elde edilen göç süresinden ™ ve nötr işaretleyicinin yer değiştirme süresinden hesaplanabilir.

Burada l, girişten (enjeksiyon sahası) saptama noktasına kadar kılcal uzunluğuna eşittir ve L, kılcalın toplam uzunluğudur.

D. Verimlilik

Yakın hareket kabiliyetine sahip iki bileşik arasında iyi bir ayrım elde etmek için, her bir bileşiğin kılcal (kolon) boyunca dar bantlar (bölgeler) halinde göç etmesi önemlidir. Ayırma sütunundaki bu dar bantlar, son elektroferogramda dar pikler olarak yansıtılır.

Bir CE ayrımının elektroferogramındaki bantların genişliği, kapilerdeki (arka plan tampon elektrolitinde) yer değiştiren çözünen bölgelerin dağılımı ile belirlenir. CE dinamik bir süreçtir; bu nedenle dispersiyon etkilerinin ortaya çıkması kaçınılmazdır.

Dağılımın kapsamı, “Gauss” bölgelerinin standart sapması ile gösterilebilir ve elektroferogramda kolayca ölçülebilen maksimum yüksekliğin47,48 0.607’sindeki tepe genişliğine karşılık gelir. Toplam sistem varyansı (s2tot), dağılmaya yol açan çeşitli parametrelerden etkilenir.

Lauer ve McManigill49’a göre bunlar, radyal termal (sıcaklık gradyanı) varyansı (s2T), elektriksel alan pertürbasyonu (elektrodispersiyon) varyansı (s2E), duvar adsorpsiyon varyansı (s2W), EOF varyansı (s2F), enjeksiyon varyansı (s2I) ve boylamsal (eksenel) difüzyon varyansı (s2L) olur.

Birkaç yazar10,47,50252 bu bireysel varyansları daha ayrıntılı olarak tanımlamış ve araştırmış ve hatta algılama varyansı (s2D) ve diğerleri (s2O) gibi ek varyans kaynakları tanımlamıştır:

• s2tot 1⁄4s2T þs2E þs2W þs2F þs2I þs2L þs2D þs2O

The post Elektroforetik Hareketlilik (li) – Farmasötik Analiz İçin katiller Elektroforez Yöntemleri – Ayırma Teknolojisi –FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).

Son on yılda CE, farmasötik analiz için olgun bir ayırma tekniği haline geldi. Literatürde farmasötik Ar-Ge laboratuvarlarından ve akademiden çok sayıda onaylanmış yöntem bildirilmiştir. Bilgiler, kimlik, API testi, saflık belirleme, enantiyomerik ayırma ve stokiyometri belirlemeyi kapsar (Bölüm 7). Ek olarak, stabilite gösteren sıvı kromatografik yöntemlerin geliştirilmesi sırasında CE sıklıkla ortogonal bir teknik olarak uygulanmaktadır.

Sonuç olarak, CE, farklı ilaç şirketlerinin çeşitli düzenleyici sunumlarına dahil edilmiştir. Farmasötik analiz alanında gelişmiş bir ayırma tekniği olarak CE’nin artan ilgisi ve uygulaması, düzenleyici otoriteler tarafından kabul görmektedir. CE, Amerika Birleşik Devletleri Gıda ve İlaç Dairesi (FDA) ve Uluslararası Uyum Konferansı’ndan (ICH) farklı kılavuz belgelerde özel bir analitik teknik olarak dahil edilmiştir.

CE ile ilgili genel bir monografi, Avrupa Farmakopesi (EP), Birleşik Devletler Farmakopesi (USP) ve Japon Farmakopesi’ne (JP) dahil edilmiştir. Ek olarak, CE, örneğin kimlik doğrulama testi veya enantiyomerik saflık testi gibi birkaç ürün için bir dizi spesifik monografta yer alır. Analitik kapiler elektromigrasyon terminolojisine ilişkin isimlendirme önerilerindeki farklılıkları önlemek için, teknikler Uluslararası Saf ve Uygulamalı Kimya Birliği (IUPAC) tarafından yayınlanmıştır. Bir kayıt dosyasında CE yöntemleri kullanılıyorsa, düzenleyici onayı yerine getirirken ICH yönergeleri izlenmelidir.

VIII. KAPILLAR ELEKTROFOREZ ENSTRÜMANTASYONUNUN NİTELİKLERİ

CE enstrümantasyonunun yeterliliği, risk analizi aracı olarak arıza modu ve etki analizi kullanılarak gerçekleştirilir (bkz. Bölüm 8). Cihaz, bileşen modülleri açısından incelenir ve bu bileşenlerin olası arızaları belirlenir. Bu arızaların potansiyel etkisi tanımlanır ve risk karakterize edilir.

Bu arızalara ilişkin mevcut herhangi bir değerlendirme belirlenir ve riski azaltmak için önerilen eylemler tanımlanır. Satıcılar tarafından sağlanan yeterlilik dosyalarının yanı sıra, şu anda, CE araçlarının operasyonel yeterliliği hakkında yayınlanmış çok az bilgi var gibi görünmektedir. FDA tarafından Kalite Risk Yönetimi için Endüstri Rehberi’nde sağlanan en son düşünce, tüm yeterlilik faaliyetlerinin risk temelli bir yaklaşım kullanılarak gerçekleştirilmesi gerektiğini önermektedir. Risk göz önünde bulundurulduğunda, değerlendirilen araç ” hastanın korunması ” bağlamında incelenmelidir.

Analitik araçların, verilerin geçerliliği, ilaç ürünlerinin güvenliliği ve etkililiğinin belirlenmesi veya ilaç ürününün ürün kalitesi üzerinde etkisi olabilir. İlaç ürününün kimliğini veya gücünü de etkileyebilirler ve bu nedenle, aletin yaşam döngüsü boyunca risk yönetimi gerçekleştirmek önemlidir. Bazı durumlarda, gayri resmi risk yönetimi süreçlerinin kullanımı da kabul edilebilir.

IX. CE YÖNTEMLERİNİN SAĞLAMLIK TESTLERİ

Biyomedikal ve farmasötik analizde, özellikle ilaç endüstrisinde, düzenleyici kurumlar tarafından belirlenen katı düzenlemeler nedeniyle elde edilen analitik sonuçların kalitesine çok dikkat edilir (Bölüm 9). Sonuç olarak, sağlamlık testi giderek daha önemli hale geldi. ICH yönergeleri, sağlamlığı “Analitik bir prosedürün sağlamlığı, yöntem parametrelerindeki küçük ancak kasıtlı varyasyonlardan etkilenmeden kalma kapasitesinin bir ölçüsüdür ve normal kullanım sırasında güvenilirliğinin bir göstergesini sağlar.”

Sağlamlık testi, yöntemin sağlamlığını değerlendirmek için uygulanan deneysel düzendir. ICH kılavuzları ayrıca şunu da belirtmektedir: ” Sağlamlık değerlendirmesinin bir sonucu, her kullanıldığında analitik prosedürün geçerliliğinin sürdürülmesini sağlamak için bir dizi sistem uygunluk parametresinin (örneğin, çözünürlük testleri) oluşturulması olmalıdır. ” İkincisi Sağlamlık tanımı, en yaygın olarak uygulandığı için Bölüm 9’da kullanılmıştır.

ICH yönergelerinde henüz sağlamlık testleri zorunlu olmamakla birlikte, Amerika Birleşik Devletleri’nde ilaçların tescili için FDA tarafından talep edilmektedir. Böyle bir sağlamlık testinin sonuçlarının oluşturulması ve işlenmesi aynı Bölümde tartışılmaktadır. Ayrıca, CE yöntemlerinin sağlamlık testi uygulamalarının bir literatür taraması ve eleştirisi sağlanmıştır.

Elektroforez çeşitleri
Kağıt elektroforezi
Jel elektroforezi
PCR elektroforez yöntemleri
Elektroforez nasıl yapılır
Kağıt elektroforezi nedir
Elektroforetik yöntemler
Jel elektroforez tekniği nedir

X. ANALİTİK YÖNTEMLERİN DOĞRULANMASI

Doğrulama, bir yöntemin amaçlanan amacı için kabul edilebilir olduğunu kanıtlama sürecidir. Doğrulananların sonuçlar değil yöntem olduğuna dikkat etmek önemlidir (Bölüm 10). Herhangi bir analitik yöntemin en önemli yönü, sonuçta ürettiği verilerin kalitesidir.

Yeni bir analitik yöntemin geliştirilmesi ve doğrulanması bu nedenle yinelemeli bir süreç olabilir. Doğrulama çalışmalarının sonuçları, prosedürde bir değişikliğin gerekli olduğunu ve daha sonra yeniden doğrulama gerektirebileceğini gösterebilir. Bir yöntem rutin olarak kullanılmadan önce doğrulanması gerekir. Farklı performans özellikleri farklı doğrulama kriterleri gerektireceğinden, bir analitik yöntemi doğrulamak için bir dizi kriter vardır.

Dikkate alınması gereken çeşitli doğrulama özellikleri doğruluk, kesinlik, özgüllük, saptama sınırı, kantitasyon sınırı, doğrusallık ve resmi yönergelere uygun aralıktır. Doğrulama gereksinimleri, yöntemin amacına göre tanımlanmalıdır.

Analitik yöntemlerin doğrulanması, genellikle kalite güvence sistemlerinin içsel bir gerekliliği olarak kabul edilir. Kalite kontrol analitik yöntemleri için test performansının ve yeterlilik testinin gerçekleştirilmesi ve yorumlanması için çeşitli onaylanmış referanslar (öneriler ve kılavuzlar) vardır.

Farmasötik yöntemler için USP, ICH ve FDA tarafından belirlenen yönergeler, bu tür doğrulamaların gerçekleştirilmesi için bir çerçeve sağlar. Bu nedenle, elektroforetik prosedürleri değerlendirirken, dünyanın her yerinde kabul edilebilmesi için doğrulama, bu mevcut kılavuzlarla sıkı bir şekilde uyumlu olmalıdır. CE için, olgun ancak daha genç bir teknik olarak, doğrulama çalışmalarının belirli bir yöntemin uygunluğuna dair daha güçlü kanıt sağlaması gerekir.

XI. FARMAKOPÖYLERDE CE YÖNTEMLERİ İHTİYACI

Çeşitli uluslararası farmakopeler, dünya çapında ilaçların kalitesini sağlamaya yardımcı olur. Bu farmakopeler, monograflarını sürekli olarak gözden geçirir ve revize eder. Bir ilacın üretim süreci değiştirilirse farklı bir safsızlık profili beklenebilir; bu, farmakopelere dahil edilmesi gereken yeni analitik yöntemlerin geliştirilmesiyle sonuçlanır. Daha önceki baskılarda, tanımlama ve saflık değerlendirme amaçları için renk reaksiyonları gerçekleştirildi.

Günümüzde, farmakopeler kromatografik yöntemlerden yararlanmakta ve daha az duyarlı TLC yöntemlerini HPLC testleri ile değiştirmeye çalışmaktadır. Bununla birlikte, bir ilacın safsızlık değerlendirmesini belirlemek için bazen HPLC’den daha faydalı olsalar bile, CE yöntemleri nadiren kullanılmaktadır (Bölüm 11). CE şu anda, özellikle peptidler ve proteinler durumunda EP ve USP’de kullanılmaktadır. Yeni uygulamalar için bu yöntemler ve bakış açıları aynı Bölümde verilmiştir.

XII. İLAÇLARIN SAFLIK PROFİLİNDE CE

Bölüm 12, safsızlık profillemesinde CE’nin olası uygulamalarını göstermektedir. Tekniğin yüksek tepe kapasitesi nedeniyle CE, ana ilaç bileşiğini genellikle ilgili bir kimyasal yapıya sahip olan olası safsızlıklarından ayırmak için son derece uygundur. Dahası, elde edilen yüksek verimlilikler ve düşük reaktif tüketimi, birçok ilaç analizi durumunda CE’yi HPLC’ye uygun bir alternatif haline getirir.

Düzenleyici otoriteler, halk sağlığı ve eczacılık endüstrisi için safsızlık profillemesinin uygunluğuna kısa bir giriş yaptıktan sonra, çeşitli CZE, susuz CE, MEKC, mikroemülsiyon elektrokinetik kapiller kromatografi, CGE ve CEC uygulamaları sunulmaktadır.

The post ELEKTROFOREZ YÖNTEMLERİ – FARMASÖTİK ANALİZ İÇİN KAPILLER ELEKTROFOREZ YÖNTEMLERİ – Ayırma Teknolojisi –FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).