CEC’deki tıkaç akışı, EOF’nin tahrik kuvvetinin (yani, kılcal duvardaki yük) kılcal boyunca düzgün bir şekilde dağılmış olmasından kaynaklanmaktadır, bu, herhangi bir basınç düşüşüyle ​​karşılaşılmadığı ve akış hızının kılcal boyunca tekdüze olduğu anlamına gelir. HPLC, bant genişlemesine ve dolayısıyla CE ve CEC ile karşılaştırıldığında daha düşük verimliliklere yol açan parabolik bir akış üreten, basınca bağlı bir akışa sahiptir. Dahası, HPLC, büyük miktarlarda paketleme malzemeleri, çözücüler ve analitler gerektirir.

Mikro-HPLC ile malzeme ve çözücü miktarı azaltılmaya çalışılsa da, düşük ölü hacimli bağlantılardan kaynaklanan teknik sorunlar yaşanmaktadır. CEC’de daha küçük kolon paketleme malzemeleri kullanılabilirken, HPLC’de parçacıkların boyutu karşı basınç oluşumu ile sınırlıdır. CEC’deki EOF, kolon boyunca bir basınç düşüşü oluşturmadığından, mikro partiküllerin kullanılması mümkündür. HPLC, CE ve CEC’deki operasyonel parametrelerin bir karşılaştırması Tablo 1’de özetlenmiştir.

CEC’nin CE’ye göre önemli bir avantajı, hem elektroforetik hem de kromatografik işlemlerin kombinasyonu nedeniyle nötr ve yüklü analitleri tek bir numune karışımında ayırma yeteneğidir. Bununla birlikte, nötr bileşikler, çalışan tampon fazına sodyum laurilsülfat (SDS) gibi yüzey aktif maddelerin eklenmesiyle misel elektrokinetik kromatografi (MEKC) ile CE’de ayrılabilir. Bununla birlikte, perflorlu olanlar hariç bu katkı maddelerinin çoğu, uçucu olmayan doğaları nedeniyle MS tespitine izin vermez.

CEC’nin CE ve HPLC’ye göre avantajlarına rağmen, partikül dolgulu kolonlar, sabit fazı korumak için fritlerin hazırlanmasındaki zorluk ve akım sızıntısı ve EOF bozulmasına neden olan kabarcık oluşumu gibi sorunlarla boğuşmaktadır.

Bu sorunlar, partikül dolu kolonlarla ilişkili problemlerin üstesinden gelmek ve karışımlardaki analitlerin ayrılma hızını iyileştirmek için kolon teknolojisinin gelişiminin hızını belirler. Kesintisiz gözenekli bir çubuğun (monolitler) imalatı, herhangi bir gözenekli malzeme gerektirmez ve kararlı bir EOF sağlamak için sabit ve tekdüze bir akım akışı sağlar, şimdiye kadar mikro ayırmalar için potansiyel bir gelişme olduğunu kanıtlamıştır.

Kromatografi nedir
Kolon kromatografisi
Partisyon kromatografisi nedir
Kromatografi SORULARI
Kromatografi pdf
İnce tabaka Kromatografisi
Alıkonma faktörü nedir
Kromatografi örnekleri

CEC Enstrümantasyonu

Tipik bir CEC ekipmanı, girişte yüksek voltajlı bir güç kaynağı, çözücü ve numune şişeleri ve kapiler kolonun çıkışında atık toplamak için bir şişe, aynı anda bir EOF oluşturan ve analitleri ayıran bir sütun ve bunu izleyen bir detektör içerir. Bileşen, kolondan ayrışırken pik yapar.

Temel yapı taşlarına ek olarak, aynı zamanda, CEC ile doldurulmuş kapiler sütunun hem giriş hem de çıkış uçlarında şişelerin yaklaşık 1.2 MPa’ya basınçlandırılmasını sağlayan bir modül içerir. Bu, gürültülü bir taban çizgisine ve kılcal damarın kurumasına neden olabilecek kabarcık oluşumunu önler.

Tipik olarak, basınç farkından kaynaklanan akıştan kaçınmak için CEC modunda her iki şişeye de nitrojen gibi inert bir gazın eşit basınçları uygulanır. Sadece kılcal kolonun giriş ucuna uygulanan hidrolik basınç, bazen basınç destekli elektrokromatografide (pCEC) 5,6 kullanılır ve bu da kabarcık oluşum eğilimini azaltır.55 Bununla birlikte, kabarcık oluşumunun sorun olmadığı monolitik kolonlarda, basınç genellikle sadece bir uçtan uygulanır.

Bununla birlikte, son on yılda tekniklerin hızlı gelişimi nedeniyle, çoğu ve potansiyel CEC uygulamalarının başlangıçta, uygulanabilecek maksimum dış basıncın 12’den fazla olmadığı paketlenmiş kolonlara sahip halihazırda mevcut olan CE cihazlarını kullandığını belirtmek önemlidir. Barlar.

Enstrüman üreticileri, mevcut aletleri hızla geliştirdi veya değiştirdi. CEC uygulamasına uyarlanabilen CE araçlarının ve ticari olarak temin edilebilen özel CEC araçlarının bir özeti sırasıyla Tablo 2 ve 3’te sunulmuştur. Bazı ev yapımı yapılandırmalar da CEC’de başarıyla kullanılmıştır. CEC cihaz donanım konfigürasyonları hakkında ayrıntılı bir tartışma için, Rapp ve Tallarek’e bakın.

 CEC’de Tutma Mekanizması

CEC bir hibrit teknik olduğu için, analitlerin sabit faz yatağından farklı göçü genellikle analitler ile sabit ve hareketli fazlar arasındaki lipofilik, elektrostatik ve elektroforetik süreçleri içerecektir. Sonuç olarak, uygulanan voltaj ve elektrik alan kuvveti ve pH, tampon konsantrasyonu, iyonik kuvvet, sıcaklık ve organik içerik gibi mobil faz özelliklerinin tümü, ayrımı etkileyecektir. Ayrıntılı bir tartışma için ayrıca referans 10’a bakın.

CEC’DEKİ ELEKTROFORETİK VE

KROMATOGRAFİK PARAMETRELERİ

ETKİLEYEN FAKTÖRLER

HPLC ve CE’ye benzer şekilde, CEC’de ayırma sürecini etkileyen bir dizi önemli değişken vardır. Bunlar, aşağıda açıklanan elektrik alan kuvveti, mobil faz parametreleri ve sabit faz yüzey kimyasını içerir.

A.Uygulamalı Voltaj ve Alan Gücü

Elektroforez ile ayırma, bir elektrik alanındaki çözünen hızdaki farklılıklara dayanır. Denklemler (1) ve (2), uygulanan voltaj ve alan arasındaki ilişkiyi belirler. Genel olarak, elektroozmotik hız, alan kuvvetiyle doğru orantılıdır; dolayısıyla E’ye karşı bir meof grafiği, geniş bir voltaj aralığı boyunca doğrusaldır.

Uygulamada, alan kuvvetini değiştirmek, akış hızının CEC ayrımlarında manipüle edilebilmesi için yararlı bir araçtır. Daha kısa analiz süreleri elde etmek için genellikle yüksek alan güçlerinde çalışmak yararlıdır. Bununla birlikte, Joule ısıtma etkileri ve genellikle 30 kV’u aşmayan güç kaynakları tarafından pratik sınırlamalar getirilmektedir. Gerilimin analitlerin doğrusal hızına etkisi rapor edilmiştir.

Belirli bir E için, farklı çaplara sahip parçacıklar için meof değerleri benzerdir (Şekil 3). Daha yüksek elektrik alan kuvvetlerinde küçük farklılıklar gözlenirken, ısının yayılması partikül çapına bağlı olan paketleme verimliliğine bağlı olduğundan, herhangi bir varyasyonun omik ısıtmanın ve sonuçta viskozitede meydana gelen değişikliklerin bir sonucu olması muhtemeldir.

Meof E’ye bağlı olduğundan, kolon uzunluğundaki bir artışa voltajdaki bir artış eşlik etmelidir. Şimdiye kadar çoğu CEC deneyi, 30 kV’a kadar uygulanan gerilimlerle gerçekleştirildi, ancak 90 kV’a kadar gerilimlere izin veren ekipman da bildirildi.

The post KROMATOGRAFİK PARAMETRELER – Ayırma Teknolojisi – FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).

Ek olarak, CE2MS’nin performansı, daha düşük iyonik kuvvete ve yüzey aktif madde konsantrasyonuna sahip tamponların çalıştırılmasıyla artar. Yüksek tuzlar iyon yoğunluğunu azaltabilir (iyon çifti oluşumu yoluyla) ve tuz kristallerinin MS girişini kirletmesi veya tıkaması mümkündür. Sulu veya organik çözücüler içinde 52100mM amonyum asetat (pH 3.525.5) veya asetik veya formik asit bazlı uçucu reaktiflerin CE2ESI2MS için çok uygun olduğu kanıtlanmıştır.

Uygun bir kılıf akışı olduğu sürece 0,1 M tuz kadar yüksek akan tamponlar kullanmak mümkündür. CE2MS’nin performansı, kılcalın ID’si düştükçe artar, yaklaşık 25 mm veya daha az optimumdur; bununla birlikte, daha küçük kapiler iç çaplarda tıkanma daha büyük bir sorundur.

CE2MS yükseltmelerine izin veren ticari arayüzler mevcuttur. Örnek olarak, Thermo Finnigan bir Elektrosprey Arabirimi (ESI) yükseltme kiti ve ESI kütle spektrometresi için talimatlar sunar. CE adaptörü, bir kılcal mikrometre adaptörü ve yardımcı sıvı ve gaz kılıfları içerir.

Bir MS ile arayüzlenen bir CE örneği Şekil 9’da gösterilmektedir. Kararsız bir elektrospreyin önlenmesi için, kılıf sıvılarının kullanımdan önce tamamen gazının alınması tavsiye edilir. Üretici, kılıf sıvılarının İzopropanol (IPA) / H2O,% 1 asetik asit veya H2O / MeOH,% 1 asetik asit olmasını önerir.

Kılıf sıvısının akış hızı 1 ila 3 mL / dakika arasında değişebilir ve CE kapilerinin kılıf tüpüne göre konumuna ve kılıf sıvısının viskozitesine bağlı olarak değişecektir. İdeal olarak, kılcal, kılıf sıvısından hafifçe çıkıntı yapmalıdır, ancak optimum kılcal çıkıntının çalışma tamponunun viskozitesine bağlı olacağı bulunmuştur.

Kapiler çıkıntı yaptığında sıvıların daha yüksek viskozitesi optimize edilirken, daha düşük viskoziteli sıvılar, kılcal ESI nozülünün ucuna göre girintili olduğunda optimize edilir. Bir kılıf gazının kullanılması spreyin stabilitesini artırabilir, ancak kullanıcıya ve uygulamaya bağlıdır.

CE2MS için örnek bir yeterlilik testi, iki küçük pentapeptidin basit bir şekilde ayrılmasını içerir; Leu-enkefalin (m / z 556) ve Met-enkefalin (m / z 589). Numune karışımı,% 100 H2O,% 1 asetik asit içindeki her bileşenin 100 pmol / mL’sinden oluşur.

CE kolonu, 0.1 M NaOH ve H20 ile önceden yıkanmış ve daha sonra% 100 su,% 1 asetik asit içeren akan tampon çözeltisi ile önceden yıkanmış 50 mm ID-65280 cm çıplak erimiş silikadır. Enjeksiyon yöntemi 10 sn için 50 mbar basınç ve 2 mL / dk 60/40 IPA / su,% 1 asetik asit oranında bir ESI kılıf sıvısıdır. Spektrumlar, 35023000 m / z taramada her 3 saniyede bir toplanır.

Bir CE çalışması ayrıca bir matris destekli lazer desorpsiyon iyonizasyon (MALDI) plakasında, LC Packings tarafından bir probot mikrofraksiyon toplayıcı kullanılarak tespit edilebilir. % 50 h / h asetonitril ve% 0.1 Trifloroasetik asit (TFA) içinde 2 mg / mL alfa-siyano-4-hidroksisinnamik asit matris çözeltisi, 4 mL / dakikalık bir akış hızında ilave edilir. Her 15 saniyede bir nokta yerleştirilir ve ardından kütle spektrometresi tarafından analiz edilir. Tüm bir CE2MS çalışmasının hesaplanması, 5 dakika içinde toplanan 100021500 tekli spektrumdan oluşabilir.

Kromatografi nedir
Kromatografik yöntemler ne demek
Partisyon kromatografisi nedir
Kromatografik analiz nedir
Adsorpsiyon kromatografisi nedir
Elektroforez Nedir
Kolon kromatografisi nedir

 Kapiler Elektrokromatografi

Kapiler elektrokromatografi (CEC), CE’de en son geliştirilen yöntemlerden biridir. CEC, CE ve HPLC arasında melez bir tekniktir. İlk kapsamlı CEC çalışması 1987’de ortaya çıktı.22 CEC’de iki ana ayırma mekanizması vardır: tek / bağlı faz etkileşimleri ve elektroforetik hareketlilik. Nötr türler için, yalnızca bağlı faz etkileşimi göç oranlarında farklılıklara neden olurken, yük türlerinin kılcal damar yoluyla hareketi her iki ayırma mekanizmasına bağlıdır.

CEC’de kullanılan kolonlar arasında açık tüpler, paketlenmiş kolonlar, monolitler ve mikrofabrike yapılar bulunur. İlk başarılı açık tübüler CEC ayırmalarından biri, oktadesil ile modifiye edilmiş 30 mm ID kapiler kullanılarak Tsuda ve arkadaşları tarafından açıklandı.

Açık boru şeklinde, sabit faz iç duvara sabitlenir. Difüzyonu azaltmak için, kaplamada kılcal damarın içine doğru yayılan uzun kimyasal bağlar varsa, o20 mm24 kapiler ID ve 50 mm’ye yakın ID’ler kullanılması tavsiye edilir.

Kapiler üstü pencereler bu teknikle kullanılabilir ancak iç kaplamaya zarar vermemek için pencerenin nazikçe hazırlanması gerekir. Kılcal iç çapın difüzyonu azaltmak için nispeten küçük olması gerektiğinden, optik sistemlerde örnek boyutunun yanı sıra yol uzunluğundaki sınırlar nedeniyle tatmin edici olmayan sonuçlar ortaya çıkar.

Diğer bir seçenek, 100 mm’den daha küçük kapiler ID’lerin kullanılabildiği paketlenmiş kolonlardır. Paketleme, 1.525 mm çapında ters fazlı HPLC küresel partiküller olabilir. Tutucu fritler, kromatografik materyali yerinde tutmak için kullanılır. Parçacıklardan ışık saçılması nedeniyle, optik algılama tipik olarak kılcal üzerinde yapılmaz.

Bu yöntemle, paketlenmiş bölüme karşı uçlu açık bir kılcal bölüme ihtiyacınız vardır. Bağlantılar politetrafloroetilen (PTFE) büzülerek sağlanabilir. Ambalaj malzemesinin her iki ucunda mekanik olarak güçlü olan ve kolonu paketlemek / durulamak için kullanılan basınçlara dayanabilen fritler veya sinterlenmiş silika hazırlanır.

Fritler, 12215s için tipik olarak 4301C’de ısı kullanılarak sinterlenmiş silika bazlı ambalajlardır. Paketlenmiş CEC kolonları ile geliştirilmiş ayırma ümidi şu anda gerçekleştirilememiştir ve bazı araştırmacılar, silanol bazlı cam hamurunun en yüksek artıma neden olduğuna inanmaktadır.

CEC’deki mevcut araştırma, kılcal duvara sabit fazı bağlanmış, camsız, paketlenmiş kılcal damarlar olan monolit kılcal damarların kullanımını içerir. Gözenekli polimer monolitler kullanılarak, paketlenmiş bir kolonun tutulması, açık bir boru şekilli kılcalda bulunabilir. Genel olarak, CEC kararsız kalır. Frit teknolojisi güvenilir değildir ve monolitik kılcal damarlara yönelik araştırmalar halen devam eden bir çalışmadır. CEC’deki son gelişmeler, Colon ve meslektaşlarının incelemelerinde bulunabilir.

The post Kapiler Elektrokromatografi – Farmasötik Analiz İçin Kapiller Elektroforez Yöntemleri – Ayırma Teknolojisi –FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).