CGH uygulamaları kanser genetiğinden doğum öncesi tanıya kadar uzanır. Kanserde, delesyonlar ve amplifikasyonlar, tümör baskılayıcı genlerin ve onkogenlerin ekspresyonundaki değişikliklere katkıda bulunur. Yaygın DNA kopya numarası değişikliği, katı tümörlerde yüksek derecede kopya numarasına bağlı ekspresyon olduğu teorisini destekleyen, global gen ekspresyon paternleri üzerinde doğrudan bir etkiye sahiptir.

Diğerlerinin yanı sıra meme kanseri ve böbrek kanseri üzerine yapılan çalışmalar, anormalliklerin sayısının genel sağkalım oranları ve hasta sonuçları ile ilişkili olabileceğini göstermiştir, dolayısıyla genetik instabilite seviyesi prognozun yararlı bir göstergesi olabilir.

CGH, kanserle ilişkili bu kritik genlerin saptanması ve haritalanması için hassas bir tarama yöntemidir ve ayrıca birçok tümörde bulunan yaygın klonal genetik anormalliklerin kalıcı modellerini belirlemek için kullanılmıştır, örn. 13. kromozomda kayıp ve 8q kazancı vardır.

Gelişimsel anormallikler, örn. Down’s, Prader-Willi ve cri-du-chat sendromları, bir kromozomun veya kromozomal bölgenin bir kopyasının kazanılması veya kaybedilmesinden kaynaklanır ve bu bozukluklarda kromozomal anormallikleri tanımlamak için geleneksel sitogenetik kullanılmasına rağmen, CGH’nin katma değeri vardır. hastaların fenotipinden sorumlu olan yeni bölgelerin ve genlerin tanımlanmasına yol açabilecek bilinmeyen ekstragenetik materyalin veya dengesiz anormalliklerin tespiti.

Mikrodiziler

Mikrodizinin 1992 yılında Schena ve diğerleri tarafından geliştirilmesi. biyolojik araştırma yaklaşımında devrim yarattı ve 1992’den beri genetik tarama, proteomik, güvenlik değerlendirmesi ve teşhis gibi alanlarda geniş uygulamalarla birçok genomik araştırma laboratuvarında hızla standart bir araç haline geldi.

Son zamanlarda mikrodizi tabanlı CGH ilkesi tanıtıldı ve geliştirildi. Bu teknikte, klasik CGH tekniğinin metafaz kromozomları, katı bir yüzey üzerinde bakteriyel yapay kromozomlar (BAC’ler), maya yapay kromozomları (YAC’ler) veya kozmidler şeklinde yüksek yoğunluklu bir genomik klon dizisi ile değiştirilir. Bir çip üzerinde CGH’nin bu yeni kombinasyonu, geleneksel CGH’nin bazı sınırlamalarından kaçındı.

Birincisi, geleneksel CGH’nin uzamsal çözünürlüğünün olmaması nedeniyle, çözünürlük kromozomal bantlama düzeyinde kalır. Bununla birlikte, CGH ve mikro-dizi teknolojisini birleştirirken, bu sınırlamanın üstesinden gelinir, böylece çözünürlük iyileştirilir ve geleneksel CGH kullanılarak gözlemlenmeyen genomik dengesizliklerin tanımlanmasına izin verilir. Bununla birlikte, çözünürlüğün klonlanmış DNA ekinin boyutuna göre belirlendiği unutulmamalıdır, bu nedenle bu 100 KB ila 40 MB arasında değişebilir.

DNA hibridizasyonu
Hibridizasyon Nedir
Hibridizasyon Yöntemleri
Nükleik asit hibridizasyonu
İn situ hibridizasyon nedir
Hibridizasyon Nedir tıp
Dna hibridizasyonu nedir
İn situ Hibridizasyon

Yüzlerce genomik lokusun eşzamanlı analizi kapasitesi, verilerin kesinliğini büyük ölçüde artırır ve seri yöntemlere kıyasla maliyeti düşürür. CGH mikrodizileri, bize gelişmiş hassasiyet, geliştirilmiş çözünürlük, daha iyi tekrarlanabilirlik ve daha yüksek verime sahip sapma tespiti için bir platform sağlar.

Bir dizi, numunelerin düzenli bir şekilde düzenlenmesidir ve bir mikrodizi, genellikle 200 mm’den küçük çapta nokta boyutlarına sahiptir. Bunlar ısmarlama olabilir veya ticari olarak temin edilebilen tipler kullanılabilir.

Mikrodizi, dizi elemanlarının sabit bir şekilde bağlanmasına ve minimum arka plan sinyallerine izin vermesi gereken bir yüzey üzerinde yüksek hızlı robotik tarafından üretilir. Dizileme ve görüntüleme enstrümantasyonu şirket içinde monte edilebilir veya doğrudan çeşitli farklı satıcılardan satın alınabilir.

Vysis GenosensorTM Array 300 platformu bakteriyel yapay kromozomlar (BAC’ler) ve P1 yapay kromozomlar (PAC’ler) gibi 287 büyük ekleme klonunun krom kaplı bir yüzey üzerinde lekelenmesine izin veren benzersiz bağlantı kimyasını kullanır.

Üç nokta her bir klonu temsil eder ve bilinen onkogenleri, tümör baskılayıcı genleri, bilinen heterozigotluk kaybı alanlarını, yaygın mikrodelesyonları, alt telomerleri ve işaret klonlarını içerir. Çözünürlük klonun boyutuna bağlıdır ve 100 Kb ile 40 Mb arasında değişebilir.

Spectral Genomics SpectralChipTM, DNA parçalarının işlenmemiş cam yüzeylere benzersiz bir özel kimyasal bağlanmasına dayanır, böylece probların pozitif yüklü yüzeylere spesifik olmayan bağlanmasını ortadan kaldırır. Bu, arka plan gürültüsünü ve floresansı azaltır.

SpectralChip Microarray kiti, genomu yaklaşık 3 Mb aralıklarla kapsayan ve iki kopya halinde tespit edilen 1003 örtüşmeyen BAC klonuna sahip iki dizi içerir. Bu, 3 Mb’den daha büyük bir çözünürlük sağlar.

Literatürde “sonda” ve “hedef” terimleriyle ilgili bazı isimlendirme farklılıklarına dikkat etmek önemlidir. Phimister ve arkadaşlarının tavsiyelerine uyuyoruz, çünkü “sonda” bilinen diziye sahip bağlı nükleik asit anlamına gelirken “hedef”, kişinin tanımlamaya çalıştığı serbest nükleik asit örneğini ifade eder.

Başlangıç ​​Malzemesi

DNA’yı CGH analizi için izole ederken, DNA’nın yüksek kalitede olması zorunludur. Katı tümörlerden DNA, taze veya donmuş dokudan elde edilmelidir, böylece kapsamlı bozulmadan kaçınılmalıdır; ancak bu durumlarda doku alımı her zaman mümkün değildir.

Formalinle sabitlenmiş parafine gömülü dokudan ekstrakte edilen DNA çapraz bağlanacak ve yüksek oranda parçalanmış DNA’dan oluşacaktır ve bu nedenle etiketleme için optimal değildir. Bozunmayı en aza indirmek için, 24 saatten daha kısa bir formalin fiksasyon periyodu ve tercihen nötr pH’lı tamponlu formalin kullanılması tavsiye edilir.

Tümör DNA’sının çevreleyen “normal/kontamine edici” stromadan DNA ile seyreltilmesi, tümör DNA’sının normal DNA’ya oranında kaymalara yol açarak kromozomal anormalliklerin saptanamamasına neden olabilir.

Katı tümörlerde doku heterojenliği problemini iyileştirmek için DNA ekstraksiyonundan önce saf bir hücre popülasyonu elde etmek avantajlıdır. Bu, örneğin manuel diseksiyonla veya bir lazer yakalama mikrodiseksiyon (LCM) sistemi kullanılarak mikrodiseksiyonla elde edilebilir.

Arcturus PixCell1 2 sistemi ile, zarar vermeyen bir kızılötesi lazer, düşük erime sıcaklıklı bir polimeri seçilen hücreler üzerinde eriterek hücrelerin yapışmasını sağlar ve böylece morfolojik olarak tanımlanmış ilgili hücre popülasyonlarını izole eder.

Ancak bu değerli aracın saf tümör DNA’sının elde edilmesinde kullanılmasının bazı sınırlamaları vardır. Teknik, yeterli DNA izolasyonuna izin vermek için yeterli sayıda hücre toplamak için birden fazla bölümden hücrelerin lazerle yakalanmasını gerektiren zaman alıcıdır.

Çoğu CGH çalışması, ticari olarak mevcut DNA ekstraksiyon kitlerinin, afinite kolonlarına dayalı DNA izolasyon kitlerinin ve fenol/kloroform ekstraksiyonlarının kullanımını içerir. Başlangıç ​​materyali olarak formalinle sabitlenmiş parafine gömülü numuneler kullanıldığında, genel ekstraksiyon protokollerinde değişiklikler yapılması gerekecektir.

Kapsamlı çapraz bağlanma nedeniyle, hücre lizis solüsyonunda 3 güne kadar uzayan inkübasyon periyodu ve bu periyot sırasında tekrar tekrar proteinaz K ilavesi tavsiye edilir.

The post Mikrodiziler – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).

FISH deneylerinde problar için en sık kullanılan etiketler, modifiye edilmiş deoksiüridin trifosfatlardır. Modifikasyonlar, pirimidin halkasının 5 pozisyonuna uzun bir aralayıcı kol ile bağlanan haptenlerin, digoksigenin veya biotin gibi immünoreaktif grupların eklenmesini içerir.

Bunlar dolaylı immünofloresan teknikleriyle tespit edilebilir. Alternatif olarak, problar, floresan gibi doğrudan kendi floresansıyla saptanabilen florokrom içeren nükleosit trifosfatlarla etiketlenebilir.

Problar, moleküler biyolojinin başka yerlerinde sıkça kullanılan sistemlerden herhangi biri kullanılarak etiketlenebilir. Bunlara polimeraz zincir reaksiyonu (PCR), nick translasyonu ve rastgele primer etiketleme dahildir. Bunlar arasında, küçük boyutlu etiketli DNA parçaları üreteceğinden, nick çevirisi muhtemelen en popüler olanıdır.

Büyük prob molekülleri hedef DNA’larına ulaşmak için sitolojik materyalden difüze olmakta zorlandığından ve kullanımları sıklıkla yüksek arka plan floresansıyla sonuçlandığından, probun boyutu önemlidir. Optimum prob boyutu 200 ile 500 baz arasındadır. PCR ile üretilen problar, daha sonra detaylı olarak anlatılacak olan kromozom boyama ve fiber FISH tekniklerinde giderek daha fazla önem kazanmaktadır.

FISH yöntemi PDF
Fish yöntemi nasıl uygulanır
İn situ hibridizasyon nedir
Nükleik asit hibridizasyon Yöntemleri
Hibridizasyon Yöntemleri
İn situ hibridizasyon yöntemi
İn situ hibridizasyon aşamaları
Fish yöntemi ne kadar güvenilir

Hibridizasyon

Burada prosedürler genel olarak diğer moleküler nükleik asit hibridizasyon protokollerininkileri takip eder. Farklılıklar, sitolojik preparasyonun morfolojisini iyi durumda tutmaya ve probun genom boyunca dağılmış tekrarlanan dizilere bağlanmasını önlemeye yönelik girişimlerle ilgilidir.

Sitolojik preparasyonun bütünlüğünü korumak için, hibridizasyon genellikle %50 formamid içinde tipik olarak 35-42 C gibi düşük sıcaklıklarda gerçekleştirilir. Çoğu ökaryot genomu, büyük miktarlarda dağılmış tekrarlanan DNA dizileri içerir. Bu nedenle, sonda olarak genomik materyal kullanılırsa, genomun başka yerlerinde tekrarlanan DNA dizilerini içermesi muhtemeldir.

Bu, kromozomların tüm bölgelerinde bir flüoresans düzeyi ile sonuçlanacak ve bu da probun özgüllüğünü azaltacaktır. Bunu önlemek ve böylece nihai görüntünün kalitesini ve hassasiyetini iyileştirmek için, genomun tekrarlayan fraksiyonundan (Cot 1 DNA) etiketlenmemiş DNA genellikle hibridizasyon sırasında proba eklenir.

Hibritleştirilmiş Probun Tespiti

Problar doğrudan floresan nükleotidlerle etiketlendiğinde, saptama için uygun filtrelerle bir floresan mikroskobu kullanılarak malzemenin gözlemlenmesi yeterlidir. Sinyal amplifiye edilmediğinden, bu yöntem daha az yoğun floresan ile sonuçlanacaktır, ancak arka plan floresan seviyesi düşüktür.

Düşük seviyeli floresansı tespit etmek için birleştirilmiş şarj cihazı (CCD) kameralarının kullanılması, bu yöntemi küçük DNA hedefleriyle kullanım için yeterince hassas hale getirebilir. Problar haptenlerle etiketlendiğinde, bunların varlığı florokromlara konjuge edilmiş antikorlarla tespit edilir.

Digoksigenin ve biyotin etiketli probların her ikisi de bu şekilde saptanabilir, ancak biyotinin yumurta beyazı proteini olan avidin için son derece yüksek bir afiniteye sahip olması gibi ek bir avantajı vardır.

Bu, tespitte kullanılmak üzere florokromlarla konjuge avidin kullanımına izin verir. Bu tekniğin tek dezavantajı, hedef dokunun arka plan floresansına yol açacak kadar biyotin içermesidir. Sitogenetik durumunda bu büyük bir sorun değildir.

Bir hedeften gelen flüoresan sinyali, tespit sürecinde sıklıkla birden fazla antikor katmanı kullanılarak yükseltilir.
FISH teknolojisinin en büyük avantajlarından biri, farklı haptenlerle etiketlenmiş bir dizi prob ile birlikte farklı florokromların aynı anda kullanılabilmesidir.

Sonuç, iki renkli bir FISH görüntüsüdür. Örneğin, iki prob aynı kromozom preparasyonuna hibridize edilebilir. Biri biotin ile etiketlenmiş ve floresan konjuge antikorlar ile tespit edilmişse ve diğeri digoksigenin ile etiketlenmiş ve Teksas kırmızısı kullanılarak tespit edilmişse, o zaman her iki lokus yeşil veya kırmızı floresan alanları olarak aynı anda tespit edilecektir.

Bu yaklaşım, aynı deneyde doğrudan etiketlenmiş problar kullanılarak veya iki hapten karışımı ile etiketlenmiş problar kullanıldığında da genişletilebilir. Bu tür problar, iki farklı florokroma konjuge edilmiş antikorlar tarafından tespit edilirse, sonuç bir ara renk sinyalidir; Texas kırmızı floresansı floresandan gelen kırmızı ve yeşil floresan turuncu bir sinyal verecektir.

Bir dizi sonda, aynı iki haptenin farklı oranlarıyla etiketlenebilir. Ortaya çıkan floresan, bir CCD kamerada dijital bir sinyale dönüştürülebilir ve özel yazılım, floresandaki ince farklılıkları tanıyacaktır. Bunlara daha sonra sahte renkler tahsis edilecektir. Bu yaklaşım, daha sonra açıklanacak olan spektral karyotiplemenin geliştirilmesine yol açmıştır.

Probların saptanmasından sonra, probun hibridize olmadığı kromozomların veya çekirdeklerin kalan alanlarını saptamak gerekir. Bu, florokromlar 4,6-diamino-2-fenil-indol (DAPI), Hoechst 33258 veya propidyum iyodür kullanılarak yapılır.

DAPI ve propidium iyodür kombinasyonları, kromozom tanımlamasında yardımcı olabilecek bir bantlama modeli üretecektir. Ancak propidium iyodür, birden fazla dalga boyu tarafından uyarılması ve birkaç farklı dalga boyunda floresan yayması nedeniyle, monokrom CCD kameralar kullanılarak görüntülerin çekildiği durumlarda sorunlara neden olabilir.

Temel araştırmalarda uygulamalar

Bu teknoloji potansiyel olarak tüm ökaryot türleri ile kullanılabilse de, bu bölüm insan genetiğindeki kullanımlara odaklanacaktır. FISH, spesifik kromozomal bölgelerden gelen genleri veya diğer DNA dizilerini saptamak için kullanılabilir.

Deneyin gerektirdiği kesinlik, kullanılacak yaklaşımı belirler. En basit düzeyde, süreç, ‘kromozom boyama’ olarak bilinen bir teknik olan tüm kromozomları tanımlamak için kullanılabilir. Bu durumda, bir prob yapmak için DNA’yı tek bir insan kromozomundan izole etmek gerekir.

Bu iki yoldan biriyle gerçekleştirilir. Başlangıçta, kemirgen insan somatik hücre melezleri bir DNA kaynağı olarak kullanılmıştır. Bu hücre melezlerinde sadece tek bir insan kromozomu içeren klonları izole etmek mümkündür.

DNA, bu tür klonlardan izole edilir ve insan DNA’sı, alu dizilerine tamamlayıcı primerler kullanılarak spesifik olarak amplifiye edilir. Bunlar, insanda bulunan ancak kemirgen DNA’sında bulunmayan oldukça tekrarlanan bir diziyi temsil eder.

Floresanla aktive olan hücre sınıflandırması (FACS) kullanılarak spesifik insan metafaz kromozomlarını doğrudan izole etmek artık mümkün. Saflaştırılmış kromozomların peletinden elde edilen DNA, dejenere primerler kullanılarak PCR ile amplifiye edilir. Bu, artık kromozom boyalarının ticari tedarikçileri için tercih edilen yöntemdir.

The post Probların Etiketlenmesi – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).

Bu çalışmanın son baskısından bu yana, tanısal moleküler bakteriyoloji alanında önemli gelişmeler meydana geldi. Bu tekniklerden çok azının araştırma ve referans laboratuvarından klinik bakteriyoloji laboratuvarına geçiş yaptığı hala doğru olsa da, ticari olarak temin edilebilen test kitlerinin sayısındaki artış, bunu yakın gelecekte, özellikle de nispeten yüksek maliyetli ise, belirgin bir olasılık haline getirmektedir. bu moleküler yöntemlerden biri ele alınabilir. Bazı örnekler aşağıda verilmiştir.

Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ve gen probları, klinik örneklerde Mikobakteri tüberkülozunun hızlı bir şekilde tanımlanmasında umut vaat etmektedir. Bu yavaş büyüyen organizmanın geleneksel yöntemlerle tanımlanması genellikle birkaç hafta sürer.

Benzer şekilde, genital Chlamydia trachomatis enfeksiyonunun teşhisi için PCR veya ligaz zincir reaksiyonu gibi nükleik asit amplifikasyon testleri önerilir. Dışkı örneklerinde PCR, verotoksin üreten Escherichia coli (VTEC) tarafından üretilen verotoksinleri kodlayan genleri tespit etmek için kullanılır, örn. E. coli O157.

Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae ve Haemophilus influenzae DNA’sının BOS veya tam kanda multipleks PCR ile eşzamanlı tespiti, bakteriyel menenitisin hızlı teşhisinde paha biçilmezdir. Gerçek zamanlı PCR (Roche Diagnostics, Mannheim, Almanya) kullanılarak metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) ve vankomiye dirençli Enterococcus spp olur.

Bu yöntemler, etkili antimikrobiyal kemoterapi ve enfeksiyon kontrol önlemlerinin erken başlatılmasını sağlamalı ve böylece klinik sonuçları iyileştirmelidir. Yöntemlerin daha kapsamlı bir tartışması için diğer bölümlere bakın.

Mikrobiyolojide kullanılan moleküler yöntemler
Moleküler tanı yöntemleri nelerdir
Moleküler genetik tanı yöntemleri nelerdir
Mikrobiyolojide kullanılan moleküler yöntemleri nelerdir
Moleküler Teknikler
Moleküler Biyolojide kullanılan yöntemler pdf
Moleküler mikrobiyoloji PDF
Hibridizasyon yöntemleri

Kültürü Takip Eden Kimlik

Saf Kültür

Bir bakteri tanımlamanın ilk adımı saf bir kültür oluşturmaktır. Bunun yapılmaması, gecikmiş veya yanıltıcı laboratuvar raporlarına yol açan yaygın bir hatadır.

Klinik materyal, gelişimin çoğu iyi izole edilmiş kolonilerden oluşacak şekilde birincil izolasyon besiyerine plakalanmalıdır. Bu şekilde elde edilen koloniler, iyi aydınlatma altında büyüteçli bir el merceği ile dikkatlice incelenmeli ve inceleme için tekli koloniler seçilmeli ve düz bir tel ve sabit bir el kullanılarak seçici olmayan bir ortama aktarılmalıdır.

Bu işlem, saf kültürün yeterli büyümesini sağlayamazsa, tekrarlanmalıdır. Bu aşamada atılan kısa yollar, tanımlamayı geciktirecek, reaktifleri israf edecek ve muhtemelen yanıltıcı sonuçlar doğuracak, bakteriyolog ve klinisyenin hayal kırıklığına ve ağırlaşmasına ve muhtemelen hasta için yanlış tedaviye yol açacaktır.

Seçici veya inhibe edici birincil izolasyon ortamı genellikle sonraki biyokimyasal ve diğer tanımlama tekniklerine müdahale ettiğinden, bu aşamada seçici olmayan bir ortamın kullanılması gerektiğine dikkat edin.

Kimlik Sanatı

Acemi bakteriyolog, bir düzine kadar farklı türde komensal bakteri içerebilen birincil izolasyon plakası ve hemen hemen her bakterinin hastalığa neden olabileceği bilgisiyle karşı karşıya kaldığında, emekli olmadan önce anlamlı bir rapor hazırlamaktan çaresiz kalmalıdır!

Bununla birlikte, örneklenen alan bilgisi, klinik tablo, olası patojenler ve komensal flora bilgisi ile birlikte bu plakaların incelenmesindeki deneyim, tanımlama ve duyarlılık testi gerektiren organizmalar hakkında makul ölçüde doğru bir fikir verecektir. Bu yaklaşım, bakteriyologun, patojenin hızlı bir şekilde tanımlanmasına yol açması muhtemel olan ilk test aralığını seçmesine izin verir.

Bu, en olası nedensel organizmayı doğrulayamazsa, araştırmacı açık fikirli hareket etmeli ve araştırmaları genişletmelidir. Aşamalı yöntem olarak adlandırılan bu yöntem, organizmanın birkaç temel özelliğinin oluşturulmasını gerektirir ve bunlardan organizma tanımlanana kadar tablolara göre sonraki testler seçilir.

Son olarak, her şey başarısız olursa, blunderbuss yöntemi, akla gelebilecek her testin yapıldığı ve sistematik bakteriyolojinin standart metinlerinde listelenenlerle karşılaştırıldığı yerde benimsenebilir. Bu nadiren gereklidir, ancak örneğin yeni bir türü doğrulamak için gerekli olacaktır.

Ön Tanımlama

Bakterilerin aerobik veya anaero-bisik koşullar altında büyüme yeteneği, büyüme gereksinimleri, koloni morfolojisi, besiyeri üzerindeki etkisi (örn. Kanlı agar üzerinde hemoliz), sıvı ortamda hareketlilik, spor oluşturma yeteneği ve Gram üzerinde görünüm ve reaksiyon boyama, bir ön tanımlamanın yapılmasına izin verir. Birkaç basit, hızlı testin müteakip uygulanması, tanımlamayı tamamlamak için hangi başka testlerin (varsa) gerekli olduğunu gösterecektir.

Gram boyaması

Usta bir zanaatkar gibi, yetenekli bakteriyolog kolonyal morfoloji ve Gram boyama sonuçlarına göre tanımlamayı tamamlamak için gereken araçları seçer. Bu testler, aşağıda listelenen geniş kategorilere göre gruplandırılabilir. Tanımlanacak organizmaya bağlı olarak sırayla veya aynı anda gerçekleştirilebilirler. Her gerçekleştirildiklerinde dikkatlice kontrol edilmeleri gerekir, örn. bilinen reaksiyonlara sahip kontrol suşları kullanılarak yapılır.

Enzim Tespiti

Bir bakterinin bir enzim üretme yeteneği, onu bir substrata maruz bırakarak ve ortaya çıkan ürünü saptayarak test edilir.

Yaygın testler şunlardır:

1. Katalaz testi. Katalaz üreten organizmalar, hidrojen peroksite maruz kaldıklarında 30 saniye içinde görünür kabarcıklar üretirler. Bu test, katalaz pozitif olan stafilokokları, katalaz negatif olan streptokoklardan ayırmaya yardımcı olabilir.
2. Oksidaz testi. Bu, sitokrom oksidazın varlığını test eder. Pseudomonas gibi oksidaz pozitif bakteriler, bir renk değişikliği oluşturmak için reaktif tetrametil-p-fenilendiamin dihidroklorürü oksitleyebilir. Enterobacteriaceae oksidaz negatiftir.
3. Üre testi. Bazı türler, üreyi amonyağa ayıran güçlü bir enzim üretir; bu, büyüme ortamına dahil edilen bir pH indikatörü kullanılarak bir renk değişikliği ile tespit edilebilir. Bu test, bir bağırsak kommensali olan üreaz pozitif Proteus mirabilis’i üreaz negatif Salmonella spp. ve önemli bağırsak patojenleri olan Shigella spp olur.
4. Koagülaz testi. Staphylococcus aureus, in vitro plazmayı koagüle eden bir enzime sahiptir. Diğer stafilokoklar negatiftir.
Bu liste kapsamlı değil. Birçok başka test mevcuttur ve bunlar genellikle ticari kitlere dahil edilir.

Antijen Tespiti

Spesifik antiserumlarla hücre antijenlerinin tespiti, bakteriyolojide organizmaları belirlemek ve tiplendirmek için yaygın olarak kullanılmaktadır.

The post Moleküler Yöntemler – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).