1. Kaynar su banyosuna bir tüp steril besleyici agar yerleştirin. (Basit bir su banyosu, bir cam beher veya yarı dolu teneke kutuyu bir Bunsen alevi üzerine bir tripod üzerine yerleştirerek kurulabilir. Cam kapların altında bir asbest matı kullanılmalıdır. Su sabit bir yerde tutulmalı, ancak hızlı olmamalıdır. Kaynatın. Su seviyesini yarım işarette tutun. Bunun yerine elektrikli brülör kullanılabilir.)
2. Agar sıvılaştırıldığında, tüpü çıkarın ve yaklaşık 50 ° C’ye soğumaya bırakın.
3. Üst tarafı yukarı bakacak şekilde önünüze boş bir steril petri kabı yerleştirin.
4. Parmaklarınızı tıkalı ağız ucunda tutarak 1 ml’lik steril bir pipeti kabından çıkarın.

5. Diğer yandan karışık et suyu kültürünü alın, pipeti tutan elin küçük parmağıyla kapağını çıkarın (pipete hiçbir şeye dokunmayın) ve pipeti et suyuna yerleştirin.
6. Tüpü ve pipeti dikey olarak tutarak işaret parmağınızı pipet ağzının üzerine koyun. Pipetin tüpteki et suyu seviyesine kadar dolmasına izin verin ve ardından parmağınızla ağzını kapatın (pipette yaklaşık 0,3 ila 0,4 ml kültür olmalıdır).
7. Parmağınızı üst kısmı üzerinde basılı tutarak pipeti ucu et suyundan kurtulana kadar kaldırın ve ardından pipetteki materyalin yalnızca son 0,1 ml kalana kadar tüpe geri dönmesine izin verin. Şimdi pipetin ağzını kapatmak ve daha fazla damlamasını önlemek için parmağınızı sıkıca bastırın (şek. 10.1). Bir pipete sıvı çekmek için asla ağzınızı kullanmayın.
8. Pipeti tüpten çekmeden önce, pipetten sarkan damlayı çıkarmak için ucunu kuru iç duvara dokundurun.
9. Kapalı pipeti geri çekin, tüp kapağını değiştirin ve tüpü rafa koyun.
10. Şimdi, serbest elinizle petri kabının üst kısmını çıkarın (yere koymayın), pipetin ucunu yemeğin dibinde, parmağınızı ağızdan ayırın ve 0.1 ml et suyu kültürünün plak dibine akmasına izin verin.

11. Tabağı yerine koyun ve pipeti bir dezenfektan kabına atın.
12. Erimiş, soğutulmuş agar tüpünü alın, kapağını çıkarın ve tezgahın üstüne koyun.
13. Serbest elinizle petri kabının üst kısmını çıkarın (tekrar yere koymayın). Agarı hızla tabağa dökün.
14. Petri kabı kapağını yerine takın (tüp yıkama için ayrılabilir). Kapalı çanağı yavaşça sallayın veya dairesel şekilde döndürün.
Hala erimiş olan agarın alt yarının kenarından yukarı doğru dalgalanmasına izin vermemeye dikkat ederek tezgah üstünde moda edin.
15. Agarın daha fazla rahatsız edilmeden katılaşmasına izin verin. Sertleştiğinde (yaklaşık 30 dakika), plakayı ters çevirin ve tepsiye yerleştirin. (35 ° C inkübatör)

Dökme plak Yöntemi nedir
Dökme plak yöntemiyle kültürel sayım
Dökme plak Yöntemi basamakları
Dökme Plak nedir
Dökme plak yöntemi avantajları
Mikrobiyoloji dökme plak yöntemi
Mikrobiyolojik sayım yöntemleri
En Muhtemel Sayı yöntemi

B.Alt Kültür Tekniği (Saf Kültür için İzole Kolonilerin Toplanması)

1. Uygulama2’deki şekle tekrar bakın2. Şekil, çizgili bir plakanın yüzeyinden kolonyayı seçme yönteminin doğru olduğunu gösterir.
2. Şimdi, Egzersiz 9’da eklediğiniz besleyici agar plakasını üç organizma içeren karışık bir broth kültüründen açın. Ayrı ayrı izole kolonilerin tüm yönlerini görebilmeniz için, açıkta kalan agar yüzeyini iyi ışıkta tutun.
3. Sterilize edilmiş, soğutulmuş özenizi diğer elinizde sabit tutarak, özün kenarını saf alt kültür için seçtiğiniz izole edilmiş bir koloninin üst yüzeyine doğru getirin. Yüklü döngüyü geri çekin (hiçbir şeye dokunmayın!) Ve çizgili plakayı kapatın.
4. Yüklü özeyi, sıvı yüzeyinin hemen altında tüpün iç duvarına nazikçe sürterek taze, steril bir besiyerini inoküle edin. Döngüyü tüpten çıkardığınızda, et suyunun bir kısmını içerdiğinden emin olun.
5. Şimdi, taze bir besleyici agar plakasını inoküle etmek için özeyi kullanın. İnokülumu kenara yakın küçük bir alana sürün, özeyi sterilize edin ve sonra geri dönün ve şekil 9.1’de gösterilen tekniği kullanarak plağın sürme işlemini tamamlayın.
6. Her biri önceki plaka kültürünüzden alınan farklı türde bir koloni içeren iki agar plakasını daha da aşılayın.
7. Yeni plaka kültürlerinizi (ters çevrilmiş) ve broth kültürlerinizi 35 ° C’de inkübe edin.

Sonuçlar

A. Dökme Plakasının İncelenmesi

Dökme plaka kültürünüzde görebileceğiniz kolonilerin dağılımını çizin (yüzey ve alt yüzey konumları, ayırma). Tanıdığınız her türlü kolonyal ayrımları belirtin.

B. Çizgili Plaka Alt Kültürlerinin İncelenmesi

1. Eklenmiş besleyici agar plak alt kültürlerinizi inceleyin ve saf kültürler alıp almadığınızı belirleyin. Aşağıdaki tabloda, her plakadaki kolonilerin boyutunu, şeklini ve pigmentasyonunu belirtin. Her bir alt kültür plakasında kolonilerin Gram boyamalarını yapın ve tabloya Gram boyama reaksiyonlarını kaydedin.
2. Besin suyu alt kültürlerinizi inceleyin. Saf olup olmadıklarını belirlemek için Gram boyaları yapın. Her bir et suyu alt kültürüne ilişkin mikroskobik gözlemlerinizi de açıklayın.
3. Tabak ve et suyu kültürlerinizde geri kazanılan organizmalar,  orijinal olarak kaydettiklerinizle aynı mı?

Sorular

1. Klinik örneklerin kültürlenmesinde dökme ve sürme plakası tekniklerinin görece uygunluğunu tartışın.
2. Plaka kültürleri neden ters pozisyonda inkübe edilir?
3. Karışık bir floranın tabak kültüründen hangi kolonilerin seçilmesi gerektiğine nasıl karar verirsiniz?
4. Klinik örneklerden üretilmiş saf organizma alt kültürlerini yapmak neden gereklidir?
5. Bir kültürün veya alt kültürün saf olup olmadığını nasıl anlarsınız?
6. Ne tür klinik örnekler bakteri kültürlerinde karışık flora oluşturabilir?
7. Saf bir kültürde birden fazla koloni türü göründüğünde, yabancı organizmaların en olası kaynakları nelerdir?

Çevreden Mikroorganizmaların Kültüre Alınması

Mikroorganizmalar çevrenin her yerinde bulunur: havada ve suda; nesnelerin, giysilerin, masaların, yerlerin yüzeyinde; toprakta ve tozda; ve kendi vücudumuzun cilt ve mukozalarında vb.

Günlük yaşamımızda iyi hijyen sağladığımız sürece, yaygın olarak bulunan bu mikroorganizmalar normalde sağlıklı insanları ilgilendirmez. Bununla birlikte, yatkın hastaların hastane kaynaklı (nozokomiyal) enfeksiyonlardan korunması gereken hastanelerde, mikroorganizmaların ortamdaki konsantrasyonu ve dağılımı da büyük önem taşımaktadır.

Çevrenin sık sık izlenmesi, bir mikrobiyolog, hemşire veya doktor olabilecek hastane epidemiyoloğunun sorumluluklarından biridir.

The post Dökme Plak Tekniği – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).