Yüzlerce farklı durum var ve birçoğunun onlar hakkında yazılmış büyük ciltleri var. Geniş grupların ve yaygın veya önemli örneklerin genel bir özetini vermektedir. Bu genel şemaya nerede uyduklarını göstermek için bunların her biri hakkında kısa bir söz verilmiştir; önceki bölümler bazı bireysel koşullar hakkında daha fazla ayrıntı verir. Ayrıca bölümün sonunda bir okuma listesi bulunmaktadır.

Orak hücre anemileri ve diğer hemoglobin varyantları

Kırmızı hücre, anormal globin zincirlerinden yapılmış hemoglobin içerir. Hemoglobin A (HbA) normaldir. HbF bir varyanttır ancak fetüste normal olacaktır. Anormal hemoglobin S, hemoglobin zincirinde bir amino asit ikamesine neden olan genetik bir kusurdan kaynaklanır.

Bu koşullarda kırmızı hücre, tutulan genlere göre belirli hemoglobinler içerir. Örneğin, iki S genli homozigot orak hastalığında, kırmızı hücre çoğunlukla HbS ve biraz HbF içerecek, ancak HbA içermeyecektir. Özellikte (bir S geni) %45 HbS ve geri kalanı HbA içereceklerdir.

Bunların her hücredeki yüzdeler olduğunu akılda tutmakta fayda var; bunun aksine, normal kan transfüze edilmiş (sadece HbA) homozigot bir orak hastada da %45 HbS ve geri kalan HbA olabilir, ancak her hücre ya hepsi olacaktır. HbS veya tüm HbA.

Orak hücreli anemi (SS)

Anormal Hb’nin oksijeni giderilmiş formu, normal HbA’dan daha az çözünürdür (fosfat tamponunda bu, HbS için tarama testinin temelini oluşturur). HbS ‘taktoid’ oluşumu nedeniyle deforme olmuş kırmızı hücrelere (orak hücreler) neden olur ve bu hücreler dalakta ve periferde yok edilir.

Hastalarda düşük hemoglobin (5-10 g/dl) bulunur ve sıklıkla nötrofil ve trombosit sayıları yükselir. Kan filminde orak ve ‘tekne şeklindeki’ hücreler görülebilir. Teşhis, asit veya alkali pH’ta agaroz jel üzerinde Hb elektroforezi ile yapılır.

Çok sayıda numuneyi işleyen laboratuvarlar, yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) kullanabilir. Düşük Hb, bazı çocuklarda gelişimi bozmak için yeterlidir. Klasik olarak uzuvlarda ağrıya neden olabilen ve ayrıca göğüs, karın ve beyni de etkileyen oraklanma nedeniyle trombotik olaylar meydana gelir.

Dalağın enfarktüsü (oksijen eksikliği nedeniyle lokalize yıkım), kan filminde kırmızı hücrelerde Howell-Jolly cisimcikleri ile hiposplenizme neden olur. İyi tıbbi bakımın, bu durumdaki hastaların yaşam kalitesi ve mortalitesi üzerinde önemli bir etkisi vardır.

Orak hücre özelliğinde (AS) oraklaşma (her hücrede daha az HbS olduğu için) çok hipoksik koşullar (örneğin basınçsız uçak, genel anestezi) dışında oluşmaz. Filmde görülecek çok az şey var.

Talasemi nedir
Talasemiler ppt
Talasemi intermedia Nedir
Akdeniz anemisi taşıyıcısı nasıl beslenmeli
Talasemi major Nedir
Talasemi PDF
Talasemi normal değerleri
Akdeniz anemisi Corona

HbC Hastalığı (CC)

Bu, hafif hemoliz ve genişlemiş bir dalak üretir ancak dehidrasyon ve hamilelikte ekstra problemler ortaya çıkar. Özellik (AC), genetik terimler dışında birey için hiçbir öneme sahip değildir.

HbSC hastalığı (S/C)

Bu hafif hemolize neden olur, ancak hastalarda özellikle hamilelikte oraklanma sorunları olabilir. Bazıları retinopatiden (gözün arkasındaki enfarktüsler) ve kemik yıkımından (örneğin femur başının) rahatsız olur.

Orak/tal hastalığı (S/Thal)

Şiddet, üretilen normal Hb miktarına bağlıdır ve bu da kesin talasemi genine bağlıdır. Hiçbiri yoksa, hastalık homozigot SS formu kadar da şiddetlidir.

Talasemiler

Bu koşullarda, anormal globin zincirlerinin üretimi (anormal zincir türlerinin üretimi yerine) vardır. Bu, 0-talasemiden (zincirsiz) zincir sentezinde hafif bir azalmanın olduğu ve klinik problemlerin olmadığı hafif talasemilere kadar da uzanır.

Heterozigotların başı belaya girmez ama sıklıkla kan filmi anormallikleri vardır. Homozigot 0-talasemi, ömür boyu transfüzyon gerektiren ciddi bir bozukluktur ve bazen hipersplenizm (aşırı aktif dalak tüm kan hücrelerini yok eder) ile komplike hale gelir. Hedef hücreler filmde karakteristik olarak da görülür.

Üretim eksikliği, anormal hücrelerin hemolizinden daha önemlidir. İliğin hiperplazisi, karakteristik çocukluk çağı kemik deformitelerine yol açar. Çocuklar kan nakli olmadan gelişemez ve ölürler. Transfüzyondan kurtulanlar aşırı demir yükünün etkilerinden de muzdariptir.

Demir atılımını artırmak için her gece subkutan infüzyon olarak oral şelatlayıcı ilaç veya desferrioksamin kullanılarak yapılan şelasyon başarısız olursa, endokrin bezi (hipofiz, gonadal, pankreatik), karaciğer ve kalp infiltrasyonu ve hasarı meydana gelir ve genellikle yaştan önce ölümcül sonuçlarla da sonuçlanır. 

Hemoglobin H hastalığı – talaseminin bir şeklidir (H olarak adlandırılan anormal bir Hb varyantı değildir!) Burada bazı zincirlerin yokluğu, fazla zincirlerin inklüzyon cisimcikleri (H cisimcikleri, kresil mavisi boyamada görülür).

Kalıtsal Sferositoz

Kalıtsal sferositoz ‘otozomal dominant’tır, yani bir gen ile bir kişi durumu kalıtsal olarak alır ve genellikle Kafkasyalılarda bulunur. Kırmızı hücre zarı kasılma proteinlerinde, deforme olabilirliğin azalmasına yol açan bir anormallik vardır. Anormal hücreler dalakta tutulur ve zamanından daha önce de yok edilir.

Anemi genellikle hafiftir ve kan filminde sferositler görülür (ancak kolayca gözden kaçarlar!). Teşhis, artan ‘ozmotik kırılganlık’ ile konur ve kırmızı hücre membran bileşenlerinin SDS poliakrilamid jelleri kullanılarak elektroforetik analizi ile de doğrulanabilir.

NOT: Ozmotik kırılganlık testi. İyi karıştırılmış oksijenli kan alikotları, genellikle %0.2-1.2 NaCl aralığında bir dizi tamponlu salin konsantrasyonuna eklenir. Seyreltmeler, tüpler santrifüj edilmeden ve süpernatandaki hemoliz miktarı fotometrik olarak okunmadan önce 30 dakika oda sıcaklığında inkübe edilir. Sferositler, hipotonik çözeltilere anormal derecede duyarlıdır ve normal kırmızı hücrelerden daha yüksek konsantrasyonlarda da parçalanır.

Kan numunesi testten önce 37 C’de 24 saat inkübe edilerek sonuçsuz bir ozmotik kırılganlık testi tekrarlanabilir. Bu modifikasyon, hafif sferositozun saptanmasında orijinal yönteme göre çok daha da duyarlıdır. Normal kırmızı hücreler için grafik genellikle gri alanda görünür. Kalıtsal sferositozlu bir hasta için temsili bir grafik gösterilmektedir. Bazı laboratuvarlar bir varyasyon da kullanır.

The post Talasemiler – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).

Tam kan sayımı, kan filmi ve ferritin

Yapısal hemoglobinopati taşıyıcı durumlarının çoğunda, film belirli özellikler gösterebilse de (örneğin, HbC ve HbE özelliklerindeki hedef hücreler) FBC’de herhangi bir anormallik görülmez. Bazofilik noktalanma, talasemi özelliğinde ve düzensiz kasılmış hücrelerde  talasemi özelliğinde bulunur.

Kırmızı hücre indeksleri, mikrositoz ve normal veya normale yakın bir Hb ile karakterize edilen talasemi özelliğinin değerlendirilmesinde önemli göstergelerdir. <80 fl ortalama hücre hacmi (MCV) veya <27 pg ortalama hücre Hb (MCH) olası talaseminin göstergesidir, özellikle RBC sayısı normal veya yükselmiş (> 5 1012/l) ve serum ferritini normalidir (> 30 mg/l).

Bununla birlikte, bu sınırlayıcılar, otomatik ölçüm yöntemine ve laboratuvar tarafından atanan normal aralıklara göre bir laboratuvardan diğerine biraz farklılık gösterebilir. Semptomatik hastalardan alınan FBC (örn. -talasemi majör, HbSS) anemi özelliklerini değişken derecelerde ve kırmızı hücrelerin daha ciddi morfolojik anormalliklerini gösterebilir. Oksijen afinitesi artmış hemoglobin vakalarında polisitemi bulunabilir.

Hemglobinopatilerin tespiti, tanımlanması ve miktar tayini

Hemoglobinlerin saptanması, tanımlanması ve miktar tayini prensipleri, çözeltideki hemoglobinlerin yüklerine göre fiziksel olarak ayrılmasına dayanır. Çoğu varyanttaki amino asit ikameleri, tespitlerinin ayrılmaz bir parçası olan toplam yüzey yükünde bir değişiklik meydana getirir.

Dolayısıyla bu tekniklerin bir sınırlaması, aynı yüzey yüküne sahip olmaları durumunda Hb varyantlarının HbA’dan ayırt edilememesidir. Tüm bu testlerin doğru yorumlanması için kan naklinden sonraki üç ay içinde numunenin alınmadığından emin olmak önemlidir.

Talasemi normal değerleri
Alfa talasemi
Talasemi testi değerleri kaç olmalı
Talasemi demir eksikliği anemisi farkı
HbA2 zincirleri
Hemoglobin D hastalığı nedir
Hba0 kaç olmalı
Hb A nedir

Algılama ve Tanımlama

Elektroforez

Temel tarama metodolojisi, bir elektrik alanındaki yüklü bir molekülün (Hb) bir katoda veya anoda doğru göç etmesine dayanır. Yükün gücü ve polaritesi, tamponlanmış ortamın pH’ı ile belirlenir. Göç hızı, destekleyici ortamın gözenek boyutu ve molekül üzerindeki yükün büyüklüğü tarafından yönetilir.

Selüloz asetat yaygın olarak kullanılan bir ortamdır, ucuzdur ve sınırsız raf ömrüne sahiptir; agar yaygın olarak kullanılan bir alternatiftir. Ön tarama için pH alkalidir, Tris–EDTA borat veya Tris-barbiton tamponlarıyla pH 8.4–8.9’da sabitlenir. Bu pH’da çoğu hemoglobin negatif yüklüdür ve katottan anoda doğru göç eder.

Birçok varyant, bu koşullar altında HbA’dan ayrılarak, proteine ​​özgü bir boyayla, örneğin Ponceau S veya Amido siyahı ile boyanarak daha belirgin hale getirilebilen, görünür algılamayı mümkün kılar. Referans kontrollerle işaretlenen göç modeli daha sonra olası tanımlamayı vermek için bir varyant haritasıyla karşılaştırılabilir.

Sabit pH teknikleri, benzer yüklere sahip varyant gruplarının ayrı ayrı ayrılmasına nispeten duyarsızdır. pH 8,4’te iki ortak varyant grubu—HbS, HbD ve HbG; ve HbC, HbE ve HbO Arab – birlikte göç eder. Bu, daha fazla araştırma yapılmadan her gruptaki varyantlar arasında ayrım yapılmasını imkansız kılar.

Tamponun aside dönüştürülmesiyle (örneğin, genellikle sitrat agarda pH 6.3’e) hemoglobinlerdeki yükte farklı bir değişiklik indüklenebilir, bu da göçün hızı ve karakteristik modelini değiştirir.

Hb varyantının asit ve alkali pH’daki nispi hareketlilikleri, varyant haritalarında çapraz referanslıdır ve bu genellikle onun güvenilir bir şekilde tanımlanmasına olanak tanır, örn. pH 6.3’te HbC, HbE ve HbO Arab’dan farklı hale gelecek ve HbS, HbD ve HbG’den ayrılacaktır.

Bazı varyantların kimliği çözülmeden kalacaktır ve farklı teknikler ile daha fazla analiz ile belirlenebilir, örn. izo-elektrik odaklama (IEF) veya HPLC. Bazı nadir vakalar, moleküler düzeyde kesin mutasyonun tanımlanmasını gerektirebilir.

Orak Çözünürlük

Orak çözünürlük testi, HbS’nin varlığı için basit ve hızlı bir taramadır. Pozitif bir ekran, homozigotlar ve heterozigotlar arasında ayrım yapmaz ve yaklaşık %20 HbS konsantrasyonuna kadar bir duyarlılığa sahip olmalıdır. Bu test en çok hızlı bir ekranın gerekli olduğu durumlarda kullanışlıdır, örn. hemoglobinopati durumu bilinmeyen ‘risk altındaki’ etnik gruptan bir hastada genel anesteziden önce kullanılır.

HbS’nin tespiti, oksijeni giderildiğinde göreceli olarak çözünmezliğine ve ardından RBC zarının klasik orak şekline deformasyonuna dayanır. Test tüpünde, eser miktarda saponin eklenmiş sodyum ditiyonit tarafından deoksijenasyon indüklenir. HbS varsa, o zaman deoksi formu, klasik taktoid kristalleri oluşturmak üzere polimerleşir.

Pozitif bir test opak bir görünümü korur (süspansiyondaki oraklanmış RBC’ler nedeniyle), negatif numunelerdeki deoksihemoglobin ise berrak bir hemoglobin solüsyonu verir. Oraklama özelliklerine de sahip olan altı nadir varyant daha vardır, bu nedenle bu tarama HbS için değil, daha çok “oraklama” hemoglobinleri için benzersizdir.

Kimlik her zaman elektroforez ile doğrulanmalıdır. Tersine, HbS konumunda göç eden bir değişken bant her zaman bir orak çözünürlük testi ile doğrulanmalıdır.

Bu ekran, yenidoğanlarda bulunanlar gibi çok düşük HbS seviyelerine karşı duyarsızdır ve bu nedenle yenidoğan taramasının bir parçası olarak kullanışlı değildir. Bununla birlikte, elektroforezin birinci basamak araştırma olarak mevcut olmadığı bireylerde HbS genini saptamak için kullanılabilir, örn. üçüncü dünya ülkeleridir.

İzoelektrik Odaklama (IEF)

İzoelektrik odaklama, son derece hassas ve çok daha karmaşık bir elektroforez şeklidir ve hemoglobinlerin izoelektrik noktalarına göre ayrılmasına dayanır. Bir dizi izoelektrik noktaya sahip düşük moleküler ağırlıklı taşıyıcı amfolitler, bir pH gradyanı oluşturmak için poliakrilamid jel veya agar içine dahil edilir.

Hb ayırma amacıyla 5.5-8.5 pH aralığı kullanılır. Hemoglobinler gradyan boyunca göç ederken, izoelektrik noktalarında (pI) nötr hale gelirler ve göç etmeyi bırakırlar, yani kendi pI’lerine odaklanırlar. pI, bir molekül üzerindeki yüzey yüküne özgü olduğundan, çok küçük bir diferansiyel yüke sahip hemoglobinler bile ayrı ayrı ayrılacaktır.

Prekast jellerde, hemoglobinler aynı yerde tekrarlanabilir şekilde odaklanır, böylece tek bir ayırmada çok daha fazla kesinlik sağlar. IEF’nin artan duyarlılığı nedeniyle, çok küçük konsantrasyonlarda bulunan varyantlar bile çözümlenebilir, örn. Sabit Yay, A2 varyantları, H, Bart’s. Dolayısıyla bu teknik, yenidoğanların kordon kanı taraması için de uygundur.

Kantitatif

Hb fraksiyonlarının miktar tayini, esas olarak RBC mikrositozlu ve normal demir durumu olan kişilerde ve talasemi özelliklerinin ayrımında kullanılır.

Aynı zamanda: (a) bazı değişkenlerin daha ileri karakterizasyonu, örn. -zincir varyantları, HbE; (b) bileşik hemoglobinopati sendromlarının teşhisi; (c) fetal Hb (HPFH) bozukluklarının kalıtsal kalıcılığının teşhisi; ve (d) orak hücre bozukluklarında transfüzyon rejimlerinin izlenmesi.

Hb fraksiyonlarının tahmini, varyantın elektroforez ve ardından elüsyon, mikrokolon kromatografisi, HPLC, radyal immünodifüzyon ve ELISA ile ayrılması dahil olmak üzere çeşitli tekniklerle elde edilebilir.

Mikrokolon Kromatografisi

Mikrokolon kromatografisi esas olarak saptama için HbA2 yüzdesini belirlemek için kullanılır.

Daha sonra elüattaki reçineden yıkanır. Fraksiyonun yüzde konsantrasyonunun tahmini, daha sonra optik dansitometri ile seyreltilmiş bir toplama karşı ölçülür. DEAE (dietilaminoetil) selüloz, bir glisin-KCN veya Tris-HCI tamponu, pH 8.3 ile eşleştirilmiş bir anyon değişim reçinesidir.

HbA2 için normal aralık %1,8-3,5’tir ve yüksek seviyeler (yaklaşık %7,5’e kadar) -talasemi özelliğini gösterir. Normalliği veya hafif (+) talasemiyi doğrulamak için sınırda seviyeler (%3,3-3,7) dikkatli yoruma ve muhtemelen DNA analizine ihtiyaç duyar. -Talasemi özelliğinde, HbA2 seviyesi normal veya düşük olabilir.

The post Talasemilerin Laboratuvar Tanısı – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).