Ouchterlony’nin çift difüzyon (DD) yöntemi, antikor veya antijeni saptamak için kullanılabilir. İlk durumda bilinen bir antijen kullanılır ve ikinci durumda bilinen spesifikliğe sahip bir antikor kullanılır. Antikor ve antijen, agaroz jelde birbirine doğru yayılır ve bir dizi beyaz çökelti, pozitif bir reaksiyonu gösterir.

Karşı immünoelektroforesans (CIE), bir elektrik alanında antijen ve antikorun birbirine doğru hareketini spesifik olarak yönlendirir ve bu nedenle DD’den daha hızlıdır. CIE, başlangıçta hepatit B yüzey antijeninin saptanmasında kullanılan yöntemdi. Bu yöntemlerin yerini, çoğu zaman çok daha hassas teknikler almıştır, ancak bazı laboratuvarlar bu yöntemleri hala mantar antikor testleri için kullanmaktadır.

Hemaglütinasyon ve Hemaglütinasyon İnhibisyonu (HA ve HAI)

İnfluenza, kızamıkçık ve kızamık virüsleri gibi belirli virüslerin sahip olduğu hemaglutinin, seçilen türlerin kırmızı kan hücrelerini (RBC) aglütinasyon özelliğine sahiptir. HA testleri en yaygın olarak influenza virüslerinde kullanılır.

İnfluenza A ve B, insan grubu O, kobay ve kümes hayvanı eritrositlerini 4 ° C’de ve 20 ° C’de aglütine ederken, influenza C yalnızca kümes eritrositlerini aglütine eder. HA testleri bu nedenle viral antijenin saptanması ve titrasyonunda faydalıdır. HAI, antikoru saptamak için virüs üzerindeki hemaglutinin varlığından yararlanır.

Test, spesifik antikorun hemaglutinin ile birleştiği ve HA’yı inhibe ettiği prensibine dayanır. Hastanın serumunun seri seyreltilerinin belirli miktarda hemaglutinin ile reaksiyona girmesine izin verilir ve ardından uygun indikatör RBC’ler eklenir. Spesifik antikor varsa, hemaglutinini bloke eder ve bu nedenle pozitif bir reaksiyon, hemaglütinasyonun olmamasıyla gösterilir.

Spesifik antikorun bulunmadığı durumlarda viral hemaglutinin indikatör RBC’leri aglütine etmekte serbesttir (negatif reaksiyon). Geçmişte HAI testleri, bağışıklık durumunu belirlemek ve son kızamıkçık virüsü enfeksiyonlarını teşhis etmek için yoğun bir şekilde kullanılmıştır. Bununla birlikte, HAI, serumun spesifik olmayan inhibitörleri uzaklaştırmak için önceden tedaviye ihtiyaç duyması ve bu nedenle kızamıkçık teşhisi için daha hassas ve spesifik tekniklerle değiştirilmiş olması gerçeğiyle karmaşıktır.

Bununla birlikte, HAI, influenza virüslerinin tanımlanması ve tiplendirilmesi için referans laboratuarları tarafından hala kullanılmaktadır. HA teknikleri, hemaglutinine sahip olmayan virüsler için de kullanılabilir. Bu, viral antijenin RBC’lerin yüzeyine tanik asit gibi bir birleştirme ajanıyla bağlanmasıyla elde edilir.

Spesifik antikor içeren serum ile karıştırıldığında, yüzeylerine bağlanan viral antijen (dolaylı veya pasif HA) nedeniyle RBC’ler topaklanır. Dolaylı HA, toksoplazmaya karşı antikor tespiti için kullanılmıştır. Bununla birlikte, RBC’lerin kararsızlığı nedeniyle, artık lateks, jelatin ve karbon parçacıkları gibi inert taşıyıcı parçacıklar kullanılmaktadır.

Aglütinasyon testleri nelerdir
Aglütinasyon testi Nedir
Tüp aglütinasyon testi nedir
Eia testi nedir
Brucella tüp aglütinasyon testi nedir
Serolojik testler Mikrobiyoloji
Lam aglütinasyon testi nedir
Standart tüp aglütinasyon testi nasıl yapılır

Partikül Aglütinasyon Testleri

Parçacık aglütinasyonuna dayalı birçok test vardır. Bu testler, bir cam veya karton slayt üzerinde veya mikrotitre kuyularında yapılır. Aşağıdakiler kapsamlı bir liste değil, halihazırda kullanılan en yaygın testlerden bazılarının bir örneğidir.

Lateks Aglütinasyonu (LA)

Polistiren lateks mikropartikülleri, spesifik antikor içeren hasta serumu ile karıştırıldığında duyarlı hale gelir veya viral antijen aglutinat ile kaplanır. Antijen kaplı lateks partikülleri, bir cam slayt üzerinde veya bir mikrotitre kuyusu içinde hastanın serumu ile karıştırılır. Spesifik antikor mevcutsa, görünür bir aglütinasyon paterni ortaya çıkar.

Bu testler hızları, basitlikleri ve kullanım kolaylıkları nedeniyle virüs laboratuvarlarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Şu anda kızamıkçık, toksoplazma ve sitomegalovirüs için iyi LA testleri mevcuttur. LA testleri, bağışıklığı sağlamak için hem tek bir serum numunesinin hem de yeni bir enfeksiyonu teşhis etmek için eşleştirilmiş serumların taranması için kullanılır.

Jelatin partikül aglütinasyon testi (GPAT)

Jelatin parçacıkları antijen ile kaplanır ve hasta serumunun seri seyreltmeleri mikrotitre kuyularında test edilir. Antikor titresi, antijen kaplı partikülleri aglütine eden en yüksek serum seyreltmesi ile belirlenir. Spesifik olmayan aglütinasyon meydana gelebilir, bu nedenle kaplanmamış jelatin partikülleri her zaman kontrol olarak dahil edilir.

VDRL

VDRL, sifiliz enfeksiyonu taraması için serolojik bir testtir. Testin bir modifikasyonu, reajin antikoru taramak için mikropartikülat karbon içeren antijen kullanır. Karbon parçacıklarının kullanılması, test sonucunun beyaz bir arka plan üzerinde görsel olarak okunmasını geliştirir.

Kompleman sabitleme (CF)

Yerli komplementi yok etmek için 56 ° C’de 30 dakika süreyle inaktivasyondan sonra hasta serumu, bilinen miktarda viral antijen ve tavşan komplementine ilave edilir. Anti-vücut-antijen reaksiyonu meydana gelmişse, tamamlayıcı aktive edilir veya “sabitlenir” veya bağlanır.

Daha sonra koyun RBC’lerine (hemolizin) tavşan antikoru ile duyarlılaştırılmış koyun RBC’leri şeklinde bir antijen ve antikor detektör sistemi eklenir. Kompleman, ilk antijen-antikor reaksiyonu ile ‘sabitlenmişse’, koyun eritrositleri parçalanmaz, bu da pozitif bir reaksiyonu ve serumda spesifik antikor varlığını gösterir.

Negatif bir reaksiyon, duyarlı hale getirilmiş koyun kırmızı kan hücrelerinin tamamlayıcı tarafından hemoliziyle gösterilir. CF testi, nicel bir testtir. Serum seri olarak seyreltilir ve antikor seviyesi, duyarlı hale getirilmiş RBC’lerin% 50’sinde hemolize yol açan serumun en yüksek seyreltisinin bir karşılığı olarak ifade edilir.

Akut ve iyileşen örnek arasında titrede veya serokonversiyonda dört kat artış tanısaldır. Bu teknik önemli ölçüde uzmanlık gerektirir ve yoğun emek gerektirir, ancak serum aynı gösterge sistemi kullanılarak tek seferde birden fazla antijene karşı test edilebilir.

CF testleri yalnızca uzman viroloji laboratuvarlarında yapılır ve solunum yolu viral ve atipik bakteriyel enfeksiyonların serolojik teşhisi için hala tercih edilen testlerdir.

Nötralizasyon

Spesifik antikorun virüs nötralizasyonu ile etkileşimi, enfektiviteyi artırır ve bu virüs tarafından duyarlı bir yaşayan konakçı sistemin enfeksiyonunu önler.

Bu testlerin önemli bir dezavantajı, hücre kültürü veya canlı hayvanlar formunda yaşayan bir konakçı sistemin gerekli olması ve bu nedenle bu testlerin birçoğunun başka tekniklerle değiştirilmiş olmasıdır. Nötralizasyon testleri hala poliovirüs antikorunu ve Clostridium difficile gibi belirli toksinleri saptamak için kullanılmaktadır.

The post Partikül Aglütinasyon Testleri – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).