Denklem (1) ve (2)’den, emilen ve yayılan ışığın dalga boylarının aynı olduğu ve belirli bir elemente özgü olduğu sonucu çıkar. AAS, AES ve AFS’yi özel yapan da budur, böylece bir element, kimyasal olarak benzer bir elementin çok büyük bir fazlasının varlığında bile ölçülebilir.

Boltzmann denklemi, farklı durumlarla ilişkili enerjileri atomik yapıyla ilişkilendirir ve denklemden, uyarılmış atomlar olarak mevcut bir atom popülasyonunun temel durum atomlarına kıyasla oranı hesaplanabilir.

Oran, iki özellikten etkilenir: sıcaklık ve element. 2000 C civarındaki tipik çalışma sıcaklıklarında, çoğu element için oran en az 10 6:1’dir ve AAS ve AFS, AES’ye karşı üstün hassasiyet sağlar. Daha yüksek sıcaklıklar sağlayan sistemlerde oran değişiklikleri ve AES tercih edilebilir.

Alkali metallerin (örn. sodyum, potasyum, lityum) atomik yapıları öyledir ki Es nispeten küçüktür, daha uzun dalga boylarına karşılık gelir ve yaklaşık 2000 C’de uyarılmış atomların oranı yüksek olmasa da (10 4– 10 6:1), biyolojik numunelerdeki sodyum ve potasyum konsantrasyonları, alev AES’nin (alev fotometrisi olarak da adlandırılır) klinik laboratuvarlarda bu metalleri ölçmek için uygun ve iyi kurulmuş bir teknik olması için yeterlidir.

Atomik absorpsiyon spektrometrisi, nispeten ucuz ve kullanımı basit cihazlarla 60’tan fazla elementin belirlenmesi için kullanılabilir ve klinik örneklerde mevcut konsantrasyonlarda bu elementlerin çoğunu ölçmek için yeterli hassasiyet sağlar.

Benzer bir element aralığı atomik emisyon spektrometrisi ile ölçülebilir. Alev fotometrisi, yüksek konsantrasyonlarda alkali metaller için uygundur, ancak AES, çok elementli analiz yapılabildiğinde yüksek sıcaklıklı enerji kaynakları ile en kullanışlıdır.

Etkili atomik floresan yoğun, kararlı ışık kaynakları gerektirir ve bunların güvenilir bir şekilde oluşturulması zordur. Çoğu başarı, periyodik tablonun 4-6. Gruplarındaki metaloid elementler için elektrotsuz deşarj lambalarıyla elde edilmiştir. AFS tarafından bu elemanlar için çok düşük tespit limitleri elde edilir.

Kütle spektrometresi PDF
Kütle spektrometresi çalışma prensibi
Kütle spektrometresi konu anlatımı
Kütle spektrometresi nedir
Kütle spektrometresi Ders Notları
Kütle spektrometresi kullanım Alanları
Kütle spektrometresi bileşenleri
Kütle spektrometresi soruları

X-ışını floresansı

Yüksek enerjili fotonlar, elektronlar veya protonlar katı bir numuneye çarptığında, kurucu atomun iç kabuklarından (K, L veya M) bir elektron yer değiştirebilir. Ortaya çıkan yörünge boşluğu, bir X-ışını fotonunun eşlik eden bir emisyonu ile bir dış kabuk elektronu tarafından doldurulur, enerjisi, ilgili enerji seviyeleri arasındaki farka eşittir.

Bu emisyon, X-ışını floresansı (XRF) olarak bilinir. Emisyonun enerjisi, yani dalga boyu, kaynaklandığı atomun (elementin) özelliğidir, emisyonun yoğunluğu ise numunedeki atomların konsantrasyonu ile ilgilidir.

Emisyonu ölçmek için kullanılan spektrometre tipine göre XRF, dalga boyu-dağıtıcı (WDXRF) veya enerji-dağıtıcı (EDXRF) olarak karakterize edilir. Toplam yansıma XRF (TXRF), EDXRF’nin bir varyasyonu olarak görülebilmesine rağmen, genellikle ayrı bir teknik olarak tanımlanır.

İnorganik Kütle Spektrometrisi

Numuneler yüksek sıcaklıklara alındığında, organik bileşenler yok edilir ve inorganik elementlerin bir kısmı veya tamamı iyonize olur. Bu iyonlar bir kütle spektrometresine yönlendirildiklerinde, bir dört kutuplu veya başka bir kütle filtresi tarafından oluşturulan bir manyetik alandan geçirilerek ayrılabilirler. Kütle: yük ðm=zÞ oranına göre ayrılan iyonlar, bir elektron çarpanı kullanılarak saptanır ve sayılır. Bu süreç genellikle atomik veya inorganik kütle spektrometrisi olarak tanımlanır.

Çeşitli iyon kaynakları kullanılmıştır, ancak klinik analiz için en son çalışmalar endüktif olarak eşleşmiş plazma (ICP-MS) kullanmaktadır. Teknik gerçekten çok elementlidir ve “g/l aralığında veya özellikle yüksek atom kütle numaralarına sahip elementler için daha da düşük tespit limitleri sağlar.

Şimdiye kadar belirlenemeyen elementler artık güvenle ölçülebilir. Kütle spektrometrisinin diğer önemli özelliği, aynı elementin farklı izotoplarını ölçme yeteneğidir.

Enstrümantasyon – Atomik Absorpsiyon

Bir atomik absorpsiyon spektrometresi aşağıdaki modüllerden oluşur: monokromatör, dedektör ve gösterge diğer spektrometrelerinkilere benzer. AAS için iyi bir ışık kaynağının temel özelliği, içi boş katot lambalarıyla elde edilen yüksek yoğunluklu monokromatik çıktı sağlamaktır.

Lambalar, yayılan ışığın numune tarafından atomik absorpsiyon için gerekli olan aynı dalga boyunda olması için, katodun ana bileşeni olarak ölçülecek element ile yapılır.

Sonuç olarak, ölçülecek her öğe için farklı bir lamba gerekir ve ilgili maliyetler nedeniyle, genellikle yalnızca birkaç uzman laboratuvarda kapsamlı bir lamba yelpazesi sağlanır.

Atomizer, enstrümantal ışık yolu içinde bir buhar olarak temel durum atomları üretecek herhangi bir cihazdır. Kalsiyumu bir serum örneğinde düşünürsek, element çözeltide bulunur, proteine ​​bağlanır, fosfatla kompleks yapar ve bazıları inorganik Ca2+ olarak bulunur. Atomik buharın oluşumu (atomizasyon) aşağıdaki adımları gerektirir:

• Çözücünün çıkarılması (kurutma).
• Anyondan veya matrisin diğer bileşenlerinden ayrılma
• Bu adımları gerçekleştirmek için gerekli enerji, bir alevden veya elektrikle ısıtılan bir fırından ısı olarak sağlanır.
• Son olarak, atomizer içinde radyan enerjinin emilmesi vardır.

Alev atomizörleri

Tipik düzenleme, bir pnömatik nebulizatör, ön karışım odası ve 10 cm yol uzunluğuna sahip bir hava-asetilen laminer alevi içerir. Yüksek hızlı yardımcı hava akımı, Venturi etkisi nedeniyle, numune solüsyonunun kapiler boyunca sürekli olarak çekilmesine neden olur.

Numune, nebulizatörden çok çeşitli damlacık boyutlarına sahip bir aerosol olarak çıkar ve alev gazları ile karıştırılır ve atomizasyon için aleve taşınır. Bununla birlikte, yalnızca 10 mm’den küçük damlacıklar aleve girer, çünkü daha büyük boyutlu olanlar ön karışım odasının kenarlarına düşer ve boşa gider.

Sonuç olarak, numunenin yaklaşık %15’inden fazlası aleve girmez. Böylece, pnömatik nebülizör ile orijinal numune alev gazları ile seyreltmeye, ön karışım odasındaki kayıplara ve alev içinde önemli ölçüde termal genleşmeye (yani daha fazla seyreltme) maruz kalır.

Numunenin alev içinde dağılmasına ek olarak, alev kenarlarında oksitlerin veya diğer türlerin oluşumundan dolayı atom kayıpları vardır. Nebulizatör numune alım hızı genellikle yaklaşık 5 ml/dk’dır ve kararlı durum sinyali elde etmek için birkaç saniye aspirasyon gereklidir.

The post İnorganik Kütle Spektrometrisi – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).

Plaka karışık bir büyüme gösteriyorsa, testler tekrarlanır. Deneyimsiz bakteriyologlar, klinik olarak ne kadar olanaksız olursa olsun, bu sistemlerin sonuçlarını çoğu kez sorgulamadan kabul ederler. Deneyimli çalışanlar, sonuçları klinik bağlamlarında yorumlayacak ve olası olmayan veya olağandışı tanımlamaları onaylayacak veya tekrarlayacaktır.

Yeni Gelişmeler

Moleküler Teknikler

Daha önce tartışıldığı gibi, moleküler yöntemler, klinik örneklerde yavaş büyüyen ve kültürlenemeyen patojenlerin saptanmasında faydalıdır. Ek olarak, bu yöntemler araştırma ve referans laboratuarları tarafından bakteri tiplendirilmesi ve yeni türlerin karakterizasyonu için yaygın olarak benimsenmiştir.

DNA çip teknolojisinin geliştirilmesi özellikle heyecan verici, örn. katı bir destek (çip) üzerine yerleştirilmiş binlerce oligonükleotidin üretildiği DNA mikroassayleridir. Bunlar, PCR ürünlerini sıralamak için kullanılabilir. Şaşırtıcı bir şekilde, geliştirilmekte olan biyoelektronik çipler, örnekleri bir çip üzerindeki farklı analitik alanlara taşımak için elektrik alanları kullanan ve “çip üzerinde laboratuvar” nihai amacını gerçekleştiren biyoelektronik çiplerdir.

Kütle spektrometresi PDF
Kütle spektrometresi Ders Notları
Kütle spektroskopisi çalışma prensibi
Kütle Spektroskopisi nedir
Kütle spektrometresi soruları
Kütle spektrometresi çeşitleri
Kütle spektrometresi konu anlatımı
Kütle spektrometresi kullanım alanları

Kütle Spektrometrisi

Kütle spektrometresi tekniklerindeki gelişmeler, bakteriyel tanımlama alanındaki uygulamalarına yönelik araştırmaları teşvik etmiştir. Örneğin, sağlam organizmaların matris destekli lazer desorpsiyon iyonizasyon uçuş zamanı kütle spektrometrisinin (MALDI-TOF-MS), bir koloninin bir kültür plakasından çıkarılmasından birkaç dakika sonra karakteristik kütle spektral parmak izlerini ürettiği gösterilmiştir. tanımlamaya izin veren. Bu tekniğin rutin klinik laboratuvara ulaşıp ulaşmadığını zaman gösterecek olsa da, kesinlikle ilginç bir gelişmedir.

Tıbbi önemi olan bakterilerin tanımlanması

Aşağıda, tıbbi öneme sahip bakterilerin tanımlanması için kısa bir giriş yer almaktadır.

Gram pozitif

Gram-pozitif bir kokun, katalaz üretme yeteneği, Staphylococcus ve Micrococcus gibi katalaz-pozitif cinsleri katalaz-negatif cinslerden ayıran yararlı ve hızlı bir testtir. Streptococcus ve Enterokok. Sonraki tanımlama aşağıdaki bilgilere göre ilerler.

Staphylococcus ve Micrococcus

Bu katalaz pozitif cins, sıvı ortamda büyütüldüğünde karakteristik olarak kümeler halinde düzenlenmiş hücreler üretir. Stafilokoklar, anaerobik koşullar altında gelişebilme yetenekleriyle mikrokoklardan ayırt edilebilir.

Deri, yara ve akciğer enfeksiyonunun yaygın bir nedeni olan Staphylococcus aureus, plazmayı koagüle etme ve ısıya dayanıklı bir DNAaz enzimi üretme kabiliyeti ile deri kommensalleri olan diğer stafilokoklardan ayırt edilebilir.

Koagülaz aktivitesi birkaç saat içinde tespit edilerek hızlı ve güvenilir bir tanımlama sağlar. Koagülaz negatif stafilokok suşları ticari kitlerde belirtilebilir.

Streptococcus ve Enterococcus

Sıvı ortamda bu katalaz negatif cinsler, çiftler veya zincirler halinde düzenlenmiş hücreler üretir. Kanlı agarda, 24 saatlik inkübasyondan sonra 0,1–1,0 mm çapında koloniler oluştururlar ve kolonilerin çevresinde gözlemlenen hemoliz tipi, yararlı bir başlangıç ​​sınıflandırması sağlar.

Hemolitik streptokoklar en iyi anaerobik olarak yetiştirilen kültürlerde gösterilir. Koloni etrafındaki kan içeren büyüme ortamının tamamen temizlenmesini sağlayan suşlar (-hemoliz), Lancefield gruplamasıyla farklılaştırılan birkaç önemli patojenik türü içerir. Bu, 1 saatten daha kısa bir sürede ticari testlerle gerçekleştirilebilir. Şüphe durumunda ticari biyokimyasal test kitleri kullanılabilmesine rağmen, bu genellikle tanımlamayı tamamlamak için yeterlidir.

-Hemolitik streptokoklar, koloni etrafındaki kan içeren büyüme ortamının yeşilimsi bir rengi olan kısmi hemoliz (-haemoliz) üretir. En önemli patojenik tür, pnömokok olan Streptococcus pneumoniae’dir.

Kolonyal görünümü (ressam kolonileri), optokine duyarlılığı ve kolonilerinin safra tuzu çözeltisindeki çözünürlüğü ile diğer-hemolitik türlerden ayrılır. Diğer – hemolitik türler üst solunum yolunda kommensal olarak bulunur, ancak bazen ciddi sepsise neden olabilir, örn. subakut bakteriyel endokardit. Ticari kitlerle belirtilebilirler.

Enterokoklar tipik olarak kanlı agar üzerinde hemolitik değildir, ancak tek tek suşlar hemoliz gösterebilir – veya -. Çoğu streptokoklardan farklı olarak enterokoklar,% 40 safra içeren ortamda büyüyebilir ve aesculini hidrolize edebilir ve bu özellikler onları klinik laboratuvarda tanımlamak için kullanılır. Genellikle Lancefield grup D antijeni taşırlar ve gerekirse ticari kitler tarafından belirlenebilirler.

Gram Pozitif  Basil

Tıbben önemli cinsler başlangıçta kolonyal morfolojileri, spor oluşturma yetenekleri ve aerobik veya anaerobik büyüme koşulları gerekliliği ile tanımlanır.

Bacillus ve Clostridium

Bu spor oluşturan cinsler, katalaz ve büyüme için gerekli koşullar ile farklılaştırılabilir. Clostridium türleri katalaz negatif ve katı anaeroblardır. Basiller katalaz pozitiftir ve tümü aerobik olarak büyür. Gaz kangreninin nedeni olan Clostridium perfringens, bu tür tarafından üretilen spesifik bir enzim olan lesitinazı saptayan Nagler testi ile geçici olarak tanımlanabilir. Her iki cins de biyokimyasal testlerle belirlenebilir.

Listeria ve Corynebacterium

Bu aerobik, spor oluşturmayan cinsler, birincil izolasyon ortamında birbirleriyle karıştırılabilir. Sepsis ve menegensefalitin bir nedeni olan Listeria monocytogenes, oda sıcaklığında et suyu kültüründe karakteristik “yuvarlanma” motilitesi gösterir ancak 37 ° C’de değildir, aesculini hidrolize edebilir ve genellikle kanlı agarda hemolitiktir.

Corynebacteria spp. cilt ortaklarını, fırsatçı patojenleri ve birkaç ana patojeni içerir. Çok az tür -haemolitiktir. En önemli patojen, tellürit içeren seçici besiyerindeki boğaz sürüntülerinden izole edilebilen Corynebacterium diphtheriae’dir. Toksijenik suşlar, Elektest tarafından tespit edilir.

Gram negatif

Bu grupta üç ana insan patojeni vardır: Belsoğukluğunun nedeni Neisseria gonorrhoea (gonokok); Neisseria meningitidis (meningokok), bir septisemi ve menenjit nedeni; ve göğüs ve göz enfeksiyonlarının bir nedeni olan Moraxella catarrhalis. Büyüme özellikleri ve biyokimyasal testlerle birbirlerinden ve ortak insan öğeleri olan diğer türlerden ayırt edilmelidirler. Oksidaz ve katalaz pozitiftirler.

Aerobik Gram Negatif Basil

Basit büyüme gereksinimleri

Ticari sistemler, bu grup için tanımlamayı büyük ölçüde basitleştirdi. Bununla birlikte, ortak florayı potansiyel patojenlerden ayırmak ve doğru test kartını veya şeridi seçmeye yardımcı olmak için birkaç basit test hala gereklidir.

Oksidaz testi, gerçekleştirilmesi saniyeler süren yararlı bir ön araştırmadır. Oksidaz negatif cinsler, gastrointestinal sistemin kommensalleri ve patojenleri olan birçok türü içerir (Enterobacteriaceae).

The post Kütle Spektrometrisi – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).