Preparat, hücrelere nüfuz eden ve lekeleyen safranin ile boyanır. Bu muameleden sonra, bakteriler pembe görünür ve kapsülleri, çini mürekkebi veya nigrosinin koyu arka planına karşı net, lekesiz bölgeler olarak keskin bir şekilde öne çıkar.

Hayvan vücudunda, karbonhidrat veya protein kapsüler bileşenleri yabancı maddeler (antijenler olarak adlandırılır) olarak kabul edilir. Kapsüler antijenlerin varlığına yanıt olarak, kapsülle reaksiyona giren (bağlanan) antikorlar üretilir.

Antikorların antijene bağlanması (antijen-antikor reaksiyonu adı verilir) fagositozu büyük ölçüde artırır. Kapsüler antijenlerin kimyasal yapısındaki birçok varyasyon, tek bir bakteri türü içinde bile mevcuttur ve her varyasyon, bu kapsüler tipe özgü antikorların üretimini uyarır. Örneğin, 80’den fazla kapsular türü “pneumoniae” olarak  tanımlanmıştır.

Egzersiz 19’da öğreneceğiniz gibi, bu spesifik antijen-antikor reaksiyonlarından yararlanan serolojik testler, klinik örneklerde bulunan bakterilerin hızlı ve doğru bir şekilde tanımlanması için sıklıkla kullanılır. Kapsüllenmiş bakteriler, serolojik olarak, bu tür bir testle, quellung reaksiyonu olarak tanımlanabilir.

Bu testte, klinik numuneden bilinmeyen bakteriler bir lam üzerine yerleştirilir ve antiserum (bilinen antikorları içeren serum) eklenir. Mikroskop altında preparasyona bakıldığında, testteki antikorlar arasında bir antijen-antikor reaksiyonu meydana gelirse bakteri hücreleri üzerindeki serum ve kapsül antijenleri (pozitif bir test), kapsüller çok daha belirgin hale gelir ve şişer gibi görünür.

Bakteriyel kamçı, küçük kıl benzeri hareket organelidir. Hücre duvarının altındaki sitoplazmadan köken alırlar, hücrenin ötesine uzanırlar, genellikle uzunluğuna eşit veya onu aşarlar. İnce protein yapıları, ışık mikroskobu ile gösterilebilmesi için özel boyama teknikleri gerektirir. Tüm bakteriler flagellaya sahip olmadığından, bunların varlığı, sayıları ve hücre üzerindeki düzeni veya düzeni türlerin tanımlanması için ipuçları sağlayabilir.

Preparasyon nedir
Diş preparasyonu prensipleri
Diş preparasyonu nedir
Diş preparasyon Prensipleri PDF
Diş kesim Prensipleri nelerdir
Diş preparasyon aşamaları
Diş preparasyonu Santral
Chamfer diş kesimi

Örneğin, “Vibrio cholerae” ve bazı “Pseudomonas” türlerinde hücrenin bir ucunda tek bir polar flagellum bulunur (bunların monotrichous olduğu söylenir), bazı spirillalarda bipolar flagella püskülleri bulunur (bu aranjman lophotricho olarak adlandırılır) ve birçok Proteus türler, hücrelerini çevreleyen birden fazla kamçılıya (çıkıntı) sahiptir (çok zengin bir modelde).

Bazı flagellar lekeler, formalinde sabitlenmiş ve bir cam slayt boyunca yayılan bir bakteriyel süspansiyona uygulanan rosanilin boyaları ve bir mordan kullanır. Formalin, hücrelerin flagellar ve diğer yüzey proteinlerine bağlanır veya “sabitler”. Boya ve mordan daha sonra bu “sabit” yüzeylerin etrafında çökelir, çaplarını genişletir ve mikroskop altında bakıldığında kamçı görünür hale getirir.

Başka bir yöntemde, bir bakteri süspansiyonuna bir ferrik-tanat mordan ve bir gümüş nitrat çözeltisi uygulanır. Bakterilerde oluşan koyu renkli çökelti ve bunların kamçıları mikroskop altında kolayca görselleştirilmesini sağlar. Bu gümüş kaplama tekniği aynı zamanda çok ince spiroketleri boyamak için de kullanılır.

Bakteriler arasında endospor oluşumu, iki cins olan Bacillus ve Clostridium’un en karakteristik özelliğidir. Sporlaşma süreci, yaşamsal hücresel bileşenlerin yuvarlak veya oval bir iç gövdeyi çevreleyen kalın, çift katmanlı bir duvar içinde yoğunlaşmasını içerir. Bitkisel (aktif olarak büyüyen) hücrenin faaliyetleri yavaşlar ve endospor oluştukça nem kaybeder. Yavaş yavaş boş bakteri kabuğu düşer.

Kalan endospor, dinlenme, koruyucu bir aşamayı temsil eden çevresel etkilere karşı oldukça dirençlidir. Dezenfektanların çoğu buna nüfuz edemez ve kurutma, güneş ışığı, ultraviyole radyasyon ve kaynamanın öldürücü etkilerine direnir. Kuru ısı, yüksek sıcaklıklarda veya uzun süre uygulandığında, basınçlı buhar ısısı (otoklavda) veya özel sporisidal (endospor öldürücü) dezenfektanlar ile öldürebilir.

Bakteriyel endospor duvarları çözelti içindeki malzemeler tarafından hemen nüfuz etmediğinden, endosporların iç içerikleri sıradan bakteriyel boyalarla kolayca boyanmaz. Sporlanan bakteriler Gram boyandığında, bitkisel hücreler içinde oluşan endosporlar, bakteri gövdelerinde boş delikler olarak görünür.

Hücre içindeki konumlarına bağlı olarak, endosporlar terminal (vejetatif hücrenin en sonunda), subterminal (hücrenin yakınında, ancak sonunda değil) veya merkezi olarak adlandırılır. Serbest endosporlar Gram boyası ile boyandıklarında görünmezler veya soluk pembe halkalar olarak görünürler. Bakteriyel endosporların iç içeriğini göstermek için, boyayı endospor kaplamadan geçirebilen özel bir boyama tekniği kullanmalısınız.

Bakteriyel Endosporların Boyanması (Schaeffer-Fulton Yöntemi)

Amaç
Bakteriyel endosporları boyamak için bir teknik öğrenmek

Malzemeler
Bacillus subtilis’in 3- ila 5 günlük agar yatık kültürü
24 saatlik yatık Staphylococcus epidermidis kültürü
Malakit yeşil çözelti
Safranin çözümü
Slaytlar
Elmas cam işaretleme kalemi Sürgülü raf
500 ml beher
Asbest mat Forsepsli Tripod

Prosedürler

1. Slayt üzerine bir damla su koyun. Aynı damla su içinde eğik kültürlerin her birinden küçük bir miktar emülsiyon haline getirin.
2. Slaytı elmas işaret kalemiyle halka ve kodlayın.
3. Slaytı endospor boyasıyla boyayın:
a. Slaytları, bir tripod üzerinde tutulan kaynar su kabı boyunca uzatılmış bir slayt rafına yerleştirin (Bunsen brülörü yerine elektrikli brülör kullanılabilir). Bir asbest matı, beheri alttaki Bunsen alevinden korumalıdır.
b. Slaytı malakit yeşili ile yıkayın ve 5 ila 10 dakika hafifçe buhara bırakın. Lekenin kendisi kaynamamalıdır; varsa ısıyı azaltın. Leke çok hızlı buharlaşıyor ve kuruyor gibi görünüyorsa, biraz daha ekleyin. Slaytı su basmış halde tutun.
c. Slaydın hafifçe soğumasını bekleyin, ardından slaytı bir lavabo veya boyama tepsisi üzerinde boşaltmak için forseps kullanın ve su ile durulayın.
artık yeşil yıkanmayana kadar yaklaşık 30 saniye.
d. Hazırlığı 30 saniye boyunca safranin ile zıt boyayın, ardından musluk suyuyla tekrar durulayın. Slaytı kurutun veya havayla kurutun.
e. Yağa daldırma hedefi altındaki lekeyi inceleyin ve gözlemlerinizi Sonuçlar altına kaydedin.

Sonuçlar

1. Daire içinde mikroskobik gözlemlerinizin bir taslağını yapın. Stafilokokların ve endosporların boyama özellikleri arasındaki farka dikkat edin. Varsa renkli kalemler kullanın. Bitkisel hücrelerin aksine sporların rengini belirtin.

The post Preparasyon – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).