Bakteri stok kültürü | Online (Parayla Ödev Yaptırma)

Mikroorganizmaların Kültüre Alınması – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri

odevcimonline — Sun, 21 Mar 2021 09:59:12 +0000

Çevreden Mikroorganizmaların Kültüre Alınması

Amaç
Bulaşan mikroorganizmaların kaynaklarını belirlemek için çevrenin seçilen bölgelerinden kültür almak

Malzemeler

Besin suyu
Besleyici agar plakaları
Steril bezler

Prosedürler

1. Nemlendirmek için besin suyuna bir pamuklu çubuk yerleştirin. Eküvyonu geri çekerken fazla sıvıyı boşaltmak için tüpün iç duvarına bastırın.
2. Bu pamuklu çubukla yaklaşık 10 cm kare bir alan üzerinde ovalayarak ve döndürerek zeminden bir kültür alın.
3. Bir kenara yakın küçük bir alan üzerinde döndürerek swab ile bir agar plağını inoküle edin. Çubuğu atın ve telinizi kullanın
izole koloniler elde etmek için plakayı sürme yöntemi ile ekim yapın.
4. Başka bir eküvyonu et suyunda nemlendirin ve havalandırıcı veya süzgeç çevresindeki alanda lavabo musluğundan bir kültür alın. Aşılama ve 3. adımda olduğu gibi başka bir agar plakasını sürme yöntemi ile yapın.
5. Yeni bir agar plakası alın ve sağ elinizin her bir parmak ucuyla agar yüzeyinin ayrı alanlarına dokunun.
6. Lavaboya bir agar plakası alın. Bir rafa veya küvete yerleştirin, üst kısmını çıkarın ve agarı 30 dakika açıkta bırakın. Plakayı kapatın, ters çevirin ve 35 ° C’de inkübe edin.
7. Tozun biriktiği herhangi bir alan (pencere çıkıntıları, açık raflar, temizlenmesi zor alanlar) için laboratuvarın çevresine bakın.
Nemli bir çubukla bir toz kültürü alın, inoküle edin ve bir agar plağına sürme yöntemi ile ekim yapın.
8. Laboratuvar önlüğünüzün önünde 5 cm kare alandan bir kültür (nemli bir çubukla) alın. Bir plağı aşılayın ve sürme yöntemi kullanın.
9. Saçınıza nemli bir bez sürün. Bir plağı aşılayın ve sürme yöntemi ile ekin.
10. Tüm plakları ters bir şekilde 35 ° C’de inkübe edin.

Bakteri stok kültürü
Bakteri gliserol stok
Mikrobiyoloji kültür Çeşitleri
Mikrobiyoloji kültür ekimi
Besiyeri nedir
Stok kültür nedir
Kültür koruma yöntemleri
Kültür saklama yöntemleri

Sorular

1. Daha fazla gram pozitif veya gram negatif organizma buldunuz mu:
Parmaklarınızın yüzeyinde mi? Toz içinde mi? Muslukta mı? Giysilerinizde mi? Herhangi bir farklılığı açıklayabilir misiniz?
2. Kültürlerinizde endospor oluşturan bakteri buldunuz mu? Varsa hangi kültürler?
3. Bir hastanenin hangi alanlarında, çevredeki mikroorganizma sayısı kesinlikle minimuma indirilmelidir?
4. Mikrobiyologlar neden laboratuvar önlüğü giyerler? Bunun gerekli olduğunu doğruladınız mı?
5. Bir hastaya bakarken neden temiz, koruyucu kıyafet giymek gerekir?
6. Hastalara bakarken saçlar neden temiz tutulmalı ve uzak tutulmalıdır?
7. Ortamdaki mikroorganizma sayıları nasıl kontrol edilebilir?
8. Hasta bakımında el yıkama ne zaman ve neden önemlidir?
9. Hastalara bakanlar, aralarında mikroorganizmaların yayılmasını nasıl önleyebilirler?

Fiziksel Antimikrobiyal Ajanlar

Sterilizasyon teknikleri kullanıldığında tüm mikrobiyal yaşam biçimlerinin tamamen yok edileceğinden emin olabiliriz. Sterilizasyon terimi mutlak bir terimdir; canlı hücrelerin tamamen, geri döndürülemez bir şekilde yok edilmesi anlamına gelir.

Ultraviyole veya iyonlaştırıcı radyasyon, ultrasonik dalgalar veya tam kuruluk gibi bir dizi fiziksel çevresel ajan, mikroorganizmalar üzerinde baskı uygular ve onları öldürebilir, ancak bir laboratuvar kültüründe veya klinik bir örnekte büyük mikroorganizma konsantrasyonlarını yok edemezler.

Ultraviyole ışınlarına maruz kaldıklarında veya örneğin temiz bir cerrahi pakette bulunan kumaşlar tarafından korunduklarında ve her tarafa dağıtılırlarsa, az sayıda mikroorganizma bile tamamen yok edilemez.

Ultraviyole ışık, kumaşlar dahil çoğu maddeye nüfuz etmez ve bu nedenle esas olarak yüzeylerde bulunan mikroorganizmaları inaktive etmek için kullanılır. Mikrobiyoloji laboratuvarlarında, genellikle günün sonunda yüzeylerini dekontamine etmek için biyolojik güvenlik dolaplarının içinde ultraviyole lambalar kullanılır.

Antimikrobiyal etki gösteren tüm fiziksel maddeler arasında ısı en etkili olanıdır. Yeterli bir süre için yeterince yüksek sıcaklıklarda uygulandığında mükemmel bir sterilize edici ajandır çünkü hücresel aktiviteleri etkin bir şekilde durdurur.

Nemli veya kuru olmasına bağlı olarak, ısı hücresel proteinleri koagüle edebilir (haşlanmış bir yumurtayı düşünün) veya hücre bileşenlerini oksitleyebilir (yanmış bir parmak veya yanan bir kağıt parçası düşünün). Isı, mikroorganizmalar (veya diğer canlı hücreler) üzerindeki etkilerinde de seçici değildir, ancak bu avantajın canlı olsun veya olmasın tüm materyalleri yok etme kapasitesi ile dengelendiğini unutmamalıyız.

Alıştırmalar 12 ve 13’te nemli ve kuru ısı kullanarak bazı sterilizasyon örneklerini göreceğiz.

Nemli ve Kuru Isı

Belirli bir malzeme setini sterilize etmek için, uygun ısı ve nem koşulları kullanılmalıdır. Nemli ısı, mikrobiyal proteinleri (protein enzimleri dahil) pıhtılaştırarak onları geri dönüşü olmayan bir şekilde etkisiz hale getirir. Kuru durumda, protein yapıları daha kararlıdır; bu nedenle kuru ısının sıcaklığı çok daha yükseğe yükseltilmeli ve nemli ısıdan daha uzun süre muhafaza edilmelidir.

Örneğin, kuru bir fırında, sterilizasyon için 160 ila 170 ° C’de 1 ila 2 saat gereklidir; ancak, basınç altında buharla (otoklav, bkz. Alıştırma 13), 121 ° C’de sadece 15 dakika gerekebilir. Isı sterilizasyon yöntemlerinin seçimi daha sonra sterilize edilecek malzemelerin ısı duyarlılığına bağlıdır.

DENEY : Nemli Isı

Mikroorganizmaların ısıya tepkisini, onları farklı sıcaklıklarda öldürmek için gereken süreyi ölçerek nicelendirmek mümkündür. Standartlaştırılmış saf bir bakteri kültürünü belirli bir süre içinde (genellikle 10 dakika) sterilize etmek için gereken en düşük sıcaklık olabilir. bu türün termal ölüm noktası olarak adlandırılır ve tersine, kültürü belirli bir sıcaklıkta sterilize etmek için gereken süre, termal ölüm zamanı olarak belirlenebilir.

Amaç
Kontrollü zaman ve sıcaklık koşulları altında uygulanan nemli ısı ile mikroorganizmaların yok edildiğini göstermek

Malzemeler
Tüplü besleyici et suları (5 ml’lik alikotlar)
Besleyici agar plakaları
Steril 1,0 ml pipetler
Staphylococcus epidermidis’in 24 saatlik et suyu kültürü
Altı günlük Bacillus subtilis’in et suyu kültürü

Prosedürler
1. Bir beher su banyosu kurun ve kaynamaya kadar ısıtın.
2. Bir besleyici agar plakasını, plakanın altını balmumu kalem veya mürekkep kalemi ile işaretleyerek ikiye bölün.
3. Bir öze dolusu S. epidermidis kültürünü besleyici agar plakasının yarısına sürün. Plakanın bölümünü şu şekilde etiketleyin:
organizmanın adı ve Kontrol kelimesi.
4. Plakanın ikinci yarısını inoküle ederek subtilis kültürü ile 3. adımı tekrarlayın.
5. “Kontrol” plakasını 24 saat 35 ° C inkübatörün içine yerleştirin.
6. İki besleyici agar plakasını, plakaların altını balmumu kalem veya mürekkep kalemi ile işaretleyerek 4 çeyreğe bölün.
Bir plakayı S. epidermidis ve diğer B. subtilis olarak etiketleyin. Her plakadaki 4 çeyreği şu şekilde etiketleyin: 5, 10, 15, 30 dakika aralıklarla.
7. Sırasıyla 0.1ml epidermidis ve B. subtilis ile alın.Tüpleri kaynar su banyosuna yerleştirin. Zamanı not edin.
8. Et suyu kültürlerini 5 dakika kaynar suda bırakın. Tüpleri çıkarın ve çalışma altında hızla soğutun soğuk musluk suyu kullanın. 5 dakika etiketli besleyici agar çeyreğine kaynatılmış her kültürden bir öze dolusu ekin.
9. Tüpleri 5 dakika daha kaynar su banyosuna geri koyun. Su tamamen kaynamaya başladığında zamanlamaya başlayın.
8. adımda olduğu gibi tüpleri soğutun, ardından her kültürden bir öze 10 dakika etiketli besleyici agar çeyreğine sürme yöntemi ile ekin.
10. 9. adımı iki kez daha tekrarlayın, 15 ve 30 dakika olarak etiketlenmiş plakaların çeyrek çeyrekleri üzerine öze dolusu kültür ekin.
11. Kaynatılmış tüplerden alt kültürleri 35 ° C’de 24 saat inkübe edin.

The post Mikroorganizmaların Kültüre Alınması – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).

Saf Kültür – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri

odevcimonline — Sat, 20 Mar 2021 17:45:13 +0000

Saf Kültürler Elde Etmek İçin Çizgi Çizme Tekniği

İnsan vücudunun deri ve birçok mukozal yüzeyi, normal veya yerli florayı oluşturan çok sayıda mikroorganizmayı destekler. Bu yüzeylerden klinik örnekler toplandığında ve kültürlendiğinde, aranan patojenik mikroorganizmalar diğer zararsız organizmalar arasında tanınmalı ve onlardan izole edilmelidir.

Patojenik türlerin kolonileri, karışık kültürden seçilmeli ve izole edilmiş saf kültürde büyütülmelidir. Mikrobiyolog daha sonra izole edilmiş organizmayı biyokimyasal ve immünolojik özelliklerini inceleyerek belirleyebilir. Saf kültür tekniği, mikroorganizmaların başarılı ve doğru bir şekilde tanımlanması için çok önemlidir.

Amaç

A.Karışık flora içeren bir örnekten saf kültürleri izole etmek için

B.Ağızın normal florasını kültürlemek ve incelemek

Malzemeler

Besleyici agar plakaları

Kanlı agar plakaları

Steril bezler

Aşağıdakileri içeren bir karışık et suyu kültürü

Serratia marcescens (pigmentli), Escherichia coli ve

Staphylococcus epidermidis

İyi sürme yöntemi ile izole edilmiş kolonileri gösteren, bu et suyundan yapılmış bir gösteri plakası kültürü

Cam slaytlar

Gram boyama reaktifleri

Saf kültür nedir
Saf kültür nedir Mikrobiyoloji
Bakteri identifikasyonunda kullanılan biyokimyasal testler
Saf kültür izolasyonu
Mikrobiyoloji ekim Yöntemleri nelerdir
Saf kültür elde ETME yöntemleri
Bakteri stok kültürü
Mikrobiyoloji kültür Çeşitleri

Prosedürler

A. Koloni İzolasyonu İçin Karışık Kültürü Sürerek Ekleme

1. Kültür tüpünün içeriğinin eşit şekilde karıştırıldığından emin olun.

2. Besin maddesinin yüzeyinde, besleyici tabakanın yüzeyinde, besleyici tabakanın yüzeyine yakın bir yerde, besleyici bir kültür yerleştirin.Loopflat ile agar yüzeyine karşı, aşıyı plak alanının yaklaşık sekizde biri boyunca hafifçe ileri ve geri sürün; agarı kazmayın.

3. Döngüyü sterilize edin ve havada soğumaya bırakın.

4. Sol elinizdeki açık plakayı döndürün, böylece her biri içinden geçen bir dizi dört çizgi ileri ve geri çekebilirsiniz.

inokülum ve plağın bir tarafı boyunca uzanır.

5. Döngüyü tekrar sterilize edin ve havada soğumaya bırakın.

6. Plakayı döndürün ve her biri son dört çizginin sonunu geçen ve enine uzanan dört çizgiden oluşan başka bir seri çizin.

plakanın bitişik tarafı.

7. Plakayı döndürün ve bu paralel çizgiyi bir kez daha tekrarlayın.

8. Son olarak, plakanın el değmemiş merkezinde birkaç çizgi yapın. Orijinal aşıya dokunmayın.

9. Plakayı (ters çevrilmiş olarak) 35 ° C’de inkübe edin.

B. Ağızdan Kültür Almak

1. Dilinizin ve diş etlerinizin yüzeyi üzerinde steril bir pamuklu çubuk döndürün.

2. Eküvyonu bir kan agar plağının yüzeyinin 112 cm2’lik küçük bir karesi üzerinde yuvarlayın, bir kenara yakın fakat dokunmadan. Eküvyonu bu alanda tamamen döndürün.

3. Eküvyonu bir dezenfektan kabına atın.

4. Bir inokülasyon özesi kullanarak plağı şekil 9.1’deki gibi sürme yöntemi ile ekin.

5. Plakayı (ters çevrilmiş) 35 ° C’de inkübe edin.

Sonuçlar

A.Karışık Kültürden Çizilen Plakaların İncelenmesi

1. İnkübe edilmiş besleyici agar plağını dikkatlice inceleyin. Çizginizi şekil 9.2a ve b’de gösterilenle karşılaştırın. Eklenen her alandaki büyüme yoğunluğunu gösteren bir çizim yapın.

2. Ayırt edebileceğiniz her farklı koloni türünü tanımlayın.
3. Mevcut her türden izole bir koloninin Gram boyasını yapın. Ayrıca, ilk inokülümün yerleştirildiği alandaki gelişimin bir Gram boyasını hazırlayın. (Not: Bir agar besiyerinde kolonilerden bir leke yapılacaksa, önce slayt üzerine bir öze dolusu steril su veya salin koyun ve sonra bu damlada toplanan büyümeyi emülsiyon haline getirin. metanol ve leke.)
4. Gözlemlerinizi sağlanan tabloya kaydedin.

B.Kan Agar Plakasında Ağız Kültürünün İncelenmesi

1. Kanlı agar plakasında kaç farklı koloni türü bulabilirsiniz? Her birini tanımlayın.
2. Üç farklı koloninin her birinden bir Gram boyama yapın. Her birinin Gram reaksiyonunu kaydedin ve mikroskobik morfolojisini daireler halinde çizin.
3. Kanlı agar plağını “KİRLENMİŞ” işaretlenmiş bir kaba atın.

Sorular

1. Bir agar plağı inoküle edildiğinde, ilk inokülum takıldıktan sonra öze neden sterilize edilir?
2. Saf bir kültür, karma bir kültür tanımlayın.
3. Bir bakteri kolonisi tanımlayın. Bakteri kolonilerinin ayırt edilebileceği dört özelliği listeleyin.
4. Bir petri kabı neden uzun bir süre açık bırakılmamalıdır?
5. Plaklarınızı aşılamak için kullandığınız sürme yöntemi neden izole koloniler oluşturuyor?
6. Bireysel kolonileri karışık bir büyümeden izole etmek neden gereklidir?
7. Neden ağzınızdaki kültür için besleyici bir agar yerine kanlı bir agar plakası kullanıldı?
8. Ağızda bulunan çok sayıda mikroorganizma endişe kaynağı mıdır? Açıklamak.
9. Mikroorganizmalar ağza nasıl girerler?

Dökme Plak ve Alt Kültür Teknikleri

İzole koloniler elde etmek için, yüzeylerine sürme yöntemi ile ekim yapmak dışında agar plakaları kullanmanın alternatif bir yöntemi, bir “dökme plakası” hazırlamaktır. Bu durumda, kültürlenecek numunenin bir alikotu boş, steril bir petri kabının dibine yerleştirilir, ardından eritilir, soğutulmuş agar üzerine dökülür.

Agar soğumadan hızla, aşıyı dağıtmak için plak yavaşça sallanır. Agar çökeldiğinde ve plaka inkübe edildiğinde, örnekte bulunan herhangi bir bakteri, agar tabakası içine gömülü veya yüzeyinde lokalize olmuş her yerde büyüyecektir.

Kolonileri izole edilecek ve aşılama döngüsü veya düz bir tel agara yerleştirilerek yüzey altı konumlarından çıkarılabilir. Dökme plakalarını hazırlamak için inokülum sıvı bir örnek veya kültür olmalıdır. Değilse, petri kabına yerleştirilmeden önce steril sıvı içinde süspanse edilmelidir.

Bir dökme plakası hazırlamak için başka bir yöntem, numuneyi veya kültürü doğrudan eritilmiş, soğutulmuş, ancak henüz katılaşmamış agar tüpüne inoküle etmektir. Her iki elin uzatılmış parmakları arasında ileri geri yuvarlayarak karıştırın ve aşılanmış agarı steril bir petri kabına dökün. Agar sertleşmek için yeterince soğumadan önce bu adımlar hızlı bir şekilde gerçekleştirilmelidir.

Birincil izolasyon plakları uygun şekilde döküldüğünde veya sürme yöntemi ile ekildiğinde, tek tek koloniler bir inokülasyon özesi veya düz tel üzerinde alınabilir ve taze agar veya broth besiyerine inoküle edilebilir. İzole edilmiş organizmaların bu yeni saf kültürlerine alt kültürler denir.

Gerçekten saflarsa ve farklı türlerin karışımlarını içermiyorlarsa, sonraki alıştırmalarda göreceğiniz gibi aşamalı prosedürlerde tanımlanabilirler.

The post Saf Kültür – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).