Ayırma, serbest bölge elektroforezi kullanılarak gerçekleştirilir, burada kapiler, tanımlanmış bir pH ve molaritede bir ayırma tamponu ile doldurulur. Bu tampon aynı zamanda BGE olarak da adlandırılır. Ayrılma sırasında polarite, molekülün yüküne bağlı olarak normal ve ters mod olarak da adlandırılan katodik veya anodik moda ayarlanır: katyon veya anyon. Anyonlar için, kılcal, genellikle EOF’yi tersine çevirmek ve ko-elektroozmotik modda analitleri ayırmak için bir elektroozmotik akış (EOF) değiştiricisi ile dinamik olarak kaplanır.

Daha önce belirtildiği gibi, ilgilenilen anyonların, organik asitlerin, katyonların veya alifatik aminlerin çoğu, ancak hepsi değil, zayıf UV emilimi ile karakterize edilir.

Çoğu durumda, dolaylı UV tespiti kullanılır çünkü mevcut ticari cihazlar genellikle bu tür bir dedektör ile donatılmıştır. Bununla birlikte, konsantrasyonlarının yeterince yüksek olması koşuluyla (100 mg / mL’nin üzerinde) bu iyonların çoğu 185 veya 200 nm’de tespit edilebilir. Çeşitli yayınlar elektrokimyasal tespit tekniklerini açıklamaktadır ve bazı yazarlar dolaylı floresan saptama ve kütle spektrometresi saptamasını bildirmektedir.

Padarauskas’tan ilginç bir inceleme10, CE ile analizden önce inorganik iyonların türetilmesini açıklamaktadır. Bu teknik esas olarak metal iyonlarının analizi ve türleşmeleri için kullanılır.

Haritacılıkta uzaktan algılama
Uzaktan algılama Kullanım alanları
Aktif algılama nedir
Uzaktan algılama yöntemleri
Uzaktan algılama yöntemleri nelerdir
Uzaktan algılama teknolojileri
Uzaktan algılama Nedir
Uzaktan algılama Ders Notları

Dolaylı UV Algılama

Hjerten  ve Foret ve analit iyonunun yer değiştirme etkisi olarak da bilinen bir fenomen olan BGE konsantrasyonunu değiştirdiği dolaylı UV tespiti üzerine makaleler yayınlayan ilk kişilerdir. Dolaylı saptamanın avantajı, tüm UV emici ve UV emici olmayan analitlerin tespit edilebilmesidir. Dezavantajı, analitin tanımlanmasının yalnızca geçiş süresine bağlı olması ve birlikte geçiş zirvelerinin meydana gelebilmesidir. Bu nedenle, yüksek oranda yeniden üretilebilir geçiş zamanı veya düzeltilmiş geçiş süresinin kullanılması önerilir.

Algılama için emici bir ko-iyon kullanılır. Analit ile aynı şarj işaretine sahip olmalıdır. Bu ko-iyon ayrıca emici bir iyon veya prob olarak adlandırılır ve BGE’de bulunur. Bu ko-iyonun analit tarafından yer değiştirme derecesi, bir mol analit iyonu ile yer değiştiren probun mol sayısı olan aktarım oranı (R) olarak adlandırılır (Şekil 1). Bu, tek yüklü bir analit iyonunun tek yüklü bir prob iyonunun yerini aldığı ve çift yüklü bir analit iyonunun iki tek yüklü sonda iyonunun yerini aldığı anlamına gelir.

Transfer oranı yalnızca probun ve analit iyonlarının yüküne değil, aynı zamanda bunların elektroforetik hareketliliğine de bağlıdır. Bunun nedeni, ci, zi ve mi’nin iyonik konsantrasyonu, yükün mutlak değerini ve her iyonik bileşenin etkin hareketliliğinin mutlak değerini temsil ettiği Kohlrausch’un düzenleyici fonksiyonudur (KRF).

Maksimum transfer oranı (R), prob ve analit benzer hareketliliğe sahip olduğunda meydana gelir. Ayırma, pH 8.2’de 30 mM piridinikarboksilik (PDC) asitten oluşan bir tampon ile her biri 0.2 mM aynı konsantrasyonda dikarboksilik organik asitlerin bir test karışımı üzerinde gerçekleştirildiğinde (Şekil 2, iz A), aşağıdakilere dayalı bir ayırma elde ederiz. hem analit hem de prob iki negatif yük taşırken moleküler ağırlıkları. Detektör penceresinden geçerken her bir analitin hareketliliğini düzeltmek için, miktar tayini için zamanı düzeltilmiş bir alan kullanırız. Bu alan yalnızca konsantrasyonlarına değil, aynı zamanda probun yerini değiştirme yeteneklerine de özgüdür; bu durumda, PDC asidi vardır.

Aynı prob ve yukarıda açıklanan dikarboksilik organik asit karışımı ile pH 5.4’te (Şekil 2, eser B), analitlerin göç süreleri daha uzundur. PH 5.4’te diasitler tam olarak iyonize değildir ve bu nedenle göç süreleri, tamamen iyonize olmayan sondanın kendisi de dahil olmak üzere bu pH’ta mevcut olan farklı iyonize formlarla ilişkili tüm hareketliliklerin ağırlıklı ortalamasını yansıtır. Bu karmaşık bir durum gibi görünüyor. İki yük taşıyan prob iyonlarının yer değiştirmesinin de iki yük taşıyan iyonlar olduğu düşünülürse basitleştirilebilir. Aslında, 8,2 ve 5,4 pH değerlerinde düzeltilmiş alanlar iyi bir korelasyon gösterir.

Probun ve analitin elektroforetik hareketliliği, elektromigrasyon dispersiyonunun bir sonucu olarak pikin şeklini belirleyecektir.14 Probun kendisinin göç edeceği konumdan uzağa göç eden tüm analitler için tipik bir testere dişi pik (Şekil 3) gözlemleyeceğiz.

Bu, proba en yakın hareketliliğe sahip analitlerin 1’e yakın bir asimetri değerine sahip olacağı ve aynı zamanda en yüksek teorik plaka numarasına sahip olacağı Şekil 2 ile ilgili Tablo 1’de gösterilmektedir. Daha yüksek mobiliteye sahip analitler, 1’in altında bir asimetri değerine sahip olacak ve daha düşük mobiliteye sahip analitler, her ikisi de daha düşük bir teorik plaka numarasıyla 1’in üzerinde bir asimetri değerine sahip olacaktır.

Zon genişletme veya elektromigrasyonel dağılım14 aynı zamanda BGE’nin konsantrasyonuna ve numunenin iyonik gücüne de bağlıdır.15 Bu, ideal olarak yalnızca analite yakın mobiliteye sahip bir prob değil, aynı zamanda yüksek konsantrasyonlu bir BGE’ye de bakılması gerektiği anlamına gelir. 

Detektör, negatif zirveleri gözlemleyecektir. Çoğu cihaz, sinyali ters çevirerek (Şekil 4) veya bir referans kanalını çıkararak negatif zirvelerle baş edebilir, böylece tepe noktaları pozitif olarak görünür veya en azından pozitif zirveler olarak entegre olur.

Probun absorptivitesi ve konsantrasyonu ideal olarak mümkün olduğu kadar yüksek olmalıdır, ancak detektörün lineer aralığında olmalıdır. Bu parametrelerin gürültüye de etkisi vardır.

Gürültü esas olarak iki unsurdan oluşur: lamba ve yaşını içeren enstrümantal gürültü ve yüksek arka plan emiciliğinden kaynaklanan gürültü. Bu önemli bir parametre olduğundan, Yeung16 bunun için dinamik rezerv (Dr) terimini önermiştir.

S, dedektörün sinyalini temsil eder; ve s sinyalin standart sapması, bazı durumlarda, daha az optimal bir dalga boyu kullanılır. Gözlemlenen absorpsiyon, detektörün dinamik aralığında kalmak için yeterli olacaktır. Bu, hala 230 nm’de emen, ancak 254 nm’de neredeyse hiç emmeyen nitrat iyonu örneğiyle belgelenmiştir. Analiz ne zaman 233 nm yerine 254 nm’de çalıştırıldığında, genel olarak daha yüksek bir sinyalle sonuçlanır.

The post Dolaylı UV Algılama – Farmasötik Analiz İçin Kapiller Elektroforez Yöntemleri – Ayırma Teknolojisi – FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).