TSS ayrıca doğumsal olmayan bölgelerde enfeksiyon odağı olan çocuklarda, erkeklerde ve adet görmeyen kadınlarda da belgelenmiştir. S. epidermidis ve S. saprophyticus suşları bu toksik maddeleri üretmez.

S. aureus’un neden olduğu yaygın deri enfeksiyonları arasında sivilceler, çıbanlar (çıbanlar), karbonhidratlar ve impetigo bulunur. S. aureus istilasından kaynaklanan ciddi sistemik (derin doku) enfeksiyonlar arasında pnömoni, piyelonefrit, osteomiyelit, menenjit ve endokardit yer alır. S. aureus pnömoniye ek olarak sinüs (sinüzit) ve orta kulak (otitis media) enfeksiyonlarına da neden olabilir.

DENEY : Stafilokokların İzolasyonu ve Tanımlanması

Stafilokok hastalığının laboratuar tanısı, enfeksiyon bölgesini (deri lezyonundan püy, pnömoniden şüphelenildiğinde balgam, idrar, omurilik sıvısı veya kan) temsil eden klinik bir örnekte organizmanın (genellikle S. aureus) tanımlanmasıyla yapılır. S. aureus veya S. epidermidis’in yüzeysel dokularda zararsız bir şekilde bulunabileceği unutulmamalıdır.

Örneği normal flora ile kontamine etmemeye özel dikkat gösterilmeli ve laboratuvar sonuçları hastanın klinik semptomları ışığında yorumlanmalıdır.

Stafilokokların laboratuvarda tanınmasının ve ayırt edilmesinin temel özellikleri arasında mikroskobik morfolojileri, kan agarında kolonyal görünüm (özellikle hemolitik aktivite), koagülaz aktivitesi, karbonhidrat manitole reaksiyon ve antimikrobiyal ajan novobiyosine duyarlılık sayılabilir.

Ayrıca, agar ortamında büyüyen karakteristik kolonilerden S. aureus’u tanımlamak için hızlı bir lateks aglütinasyon testi mevcuttur. Antikor kaplı lateks boncuklar, tipik olarak S. aureus suşlarında bulunan iki yüzey proteini ile reaksiyona girer.

Biri stafilokokal yüzeye bağlı bir tür koagülaz, diğeri ise protein A olarak bilinen bir yüzey proteinidir. Türler mikroskopik olarak ayırt edilemez. Kanlı agar üzerinde S. aureus genellikle açık ila altın sarısı bir pigment (dolayısıyla adı) gösterirken, S. epidermidis beyaz bir pigmente ve S. saprophyticus ise parlak sarı veya beyaz bir pigmente sahiptir.

Bununla birlikte, pigmentasyon her zaman güvenilir bir özellik değildir. Kanlı agarda S. aureus her zaman olmamakla birlikte genellikle beta-hemolitiktir; S. epidermidis ve S. saprophyticus neredeyse her zaman hemolitik değildir. S. aureus, tanımı gereği koagülaz pozitiftir; S. epidermidis ve S. saprophyticus koagülaz negatiftir.

Deride bulunan ancak nadiren hastalığa neden olan diğer Staphylococcus türleri de koagülaz negatiftir. Bir grup olarak, bu türler, S. epidermidis ve S. saprophyticus ile birlikte koagülaz negatif stafilokok olarak adlandırılır. S. aureus ayrıca mannitolü fermente etme kabiliyeti ve düşük novobiosin konsantrasyonlarına direnci ile S. saprophyticus’u ayırt eder.

Mukoza zarlarından veya deriden alınan örnekler karışık bir normal flora içerebildiği için, aynı zamanda aranan patojenik stafilokoklar da içerebileceğinden, birincil izolasyon pilinde seçici, diferansiyel bir besiyerinin kullanılması çok yardımcı olabilir.

Mannitol tuzu agar böyle bir ortamdır. Stafilokok ve diğer birçok organizma dışında gram pozitif kokları inhibe eden yüksek konsantrasyonda tuz içerir. Ayrıca mannitol ve S. aureus suşlarını üzerinde büyüyen koagülaz negatif stafilokoklardan ayıran bir gösterge içerir.

Staphylococcus aureus
Metisilin dirençli stafilokok aureus tedavisi
Koagülaz negatif stafilokok antibiyotik
Stafilokok identifikasyon yöntemleri
Stafilokok tedavisinde kullanılan ilaçlar
Staphylococcus aureus analizi
Koagülaz negatif stafilokok tedavisi
Stafilokokların identifikasyon yöntemleri

Hemolitik organizmaları göstermek için bir kanlı agar plakası da gereklidir. Bazı streptokoklar ve birçok S. aureus suşu beta-hemolitik olduğundan, hemen ayırt edilebilirler. Mikroskobik morfolojinin yanı sıra, en basit, en hızlı ayrım katalaz testi ile yapılabilir, çünkü tüm streptokoklar katalaz negatifken, tüm stafilokoklar katalaz pozitiftir.

Staphylococcus aureus, popülasyonun büyük bir bölümü tarafından normal floranın bir üyesi olarak taşınır. Özellikle hastanelerdeki hastalar başta olmak üzere direnci düşük olan kişilerde hastalığa neden olur.

Hastanede S. aureus, hastane personeli veya çevreden bulaşan hastane enfeksiyonlarının başlıca nedenidir. Sorun, birçok “hastane” stafilokok suşunun yararlı antimikrobiyal maddelere dirençli olması gerçeğiyle daha da karmaşık hale gelmektedir.

Hasta bakımına dahil olan tüm personel, bulaşma yolları hakkında bilgi sahibi olmalı ve nozokomiyal enfeksiyonu önlemek için tasarlanmış katı prosedürleri dikkatli bir şekilde takip etmelidir. Takip eden deneylerde, stafilokok kültürlerini görecek ve bunlarla ilgileneceksiniz.

Aseptik teknik bilginizi kullanın ve stafilokokları ellerinizin veya giysilerinizin florasına yeni eklemeler olarak laboratuvarın dışına taşımadığınızdan emin olun. Ellerinizi titizlikle temiz tutun.

Ellerinizde küçük kesikler veya sıyrıklar veya başka yaralanmalar varsa, bunlar korunmalıdır. Laboratuvardayken ellerinizi ve birlikte çalıştığınız aletleri ağzınızdan ve yüzünüzden uzak tutun.

Amaç
Stafilokokları izole etmek ve tanımlamak için

Malzemeler
Kanlı agar plakası (BAP)
Mannitol tuzu agar plakası (MSA)
Tüplü plazma (0,5 ml alikotlar)
Novobiocin diskleri (5 ’g)
Steril 1,0 ml pipetler
Pipet ampulü veya diğer aspirasyon cihazı
Staphylococcus aureus için lateks aglütinasyon kiti
Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophyticus ve Escherichia coli’nin 24 saatlik et suyu kültürleri

Prosedürler

1. Markalama kaleminizle, bir BAP ve bir MSA plakasının altını her biri dörde bölün.
2. El yapımı geniş kültürleri kullanarak, her bir plakanın bir bölümünü S. aureus ile, on ile birlikte S. epidermidis ile aşılayın.
saprophyticus ve biri E. coli ile atanan alan içinde kalarak her bölümü dikkatlice çizin.
3. Isıtılmış ve soğutulmuş forseps ile, bir novobiosin diski alın, BAP’nin çizgi çizilen alanlarından birinin ortasına yerleştirin,
ve forcep uçları ile yavaşça agar üzerine bastırın.
4. Eklenen BAP üzerindeki kalan üç organizma için 3. adımı tekrarlayın.
5. Plakları 24 saat 35 ° C inkübatörde yerleştirin.

6. Üç Staphylococcus broth kültürünün her birinde aşağıdaki şekilde bir koagülaz testi yapın:

a. Asetil pipet kullanarak, aspirasyon cihazı ile S. epidermidis brothkültürünün 0,1 ml’sini ölçün. Bu aşıyı bir plazma tüpüne aktarın. Pipeti dezenfektanla atın. Tüpü etiketleyin.

b. Plazma ikinci ve üçüncü tüpü, sırasıyla, adım 6a’daki gibi, S. aureus ve S. aprophyticus brothkültürlerinin 0,1 ml’si ile aşılayın.

c. İnoküle edilmiş tüm plazma tüplerini 35 ° C inkübatöre yerleştirin. 30 dakika sonra bunları çıkarın ve inceleyin (okurken inkübatör kapısını kapatın). Tüpteki plazmanın katı bir kütle halinde pıhtılaşmaya başlayıp başlamadığını görmek için tüpleri yarı yatay konumda tutun. Öyleyse, koagülaz aktivitesini gösteren tüpün kaydını yapın. Yuvalanmamış tüpleri inkübatöre geri koyun.

d. Gerekirse 4 saat boyunca her 30 dakikada bir 6c prosedürünü tekrarlayın.

The post Stafilokokların İzolasyonu – Laboratuvar Ödevleri –Tez danışmanlığı – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Elektrik Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).