On dokuzuncu yüzyılın ortalarında ilk kez tanımlandıkları ve “kan tozu” olarak anılan trombositler, sayım tekniklerinin doğruluğu açısından bir zorluk teşkil etmiştir. Modern tedaviler, yalnızca kritik klinik aralıkta değil, aynı zamanda küçük kırmızı hücreleri ve büyük trombositleri ayırt etme becerisini de gerektirir. Trombositler, empedans, ışık saçılımı, ikisinin kombinasyonu ve floresan kullanılarak akış sitometrisi kullanılarak sayılabilir ve boyutlandırılabilir.

İç direnç

Beckman Coulter aletleri, eğrinin altındaki hücre sayısından türetilen bir trombosit sayımı elde etmek için empedansı kullanır. Eğri uydurma yazılımı kullanılarak, 20 femtolitreden (fl) daha büyük trombositler mevcut olduğunda bu sayımın doğruluğu iyileştirilir. 35 fl sınırının ötesindeki trombosit sayısı 70 fl’e kadar uzatılır.

Optik trombosit sayımı

Bayer’in Advia enstrüman yelpazesi, her hücre için yüksek açılı (5–15) ve düşük açılı (2–3) saçılma sinyallerini birleştirir. Bunlar dikey eksende çizilen hacme ve yatay eksende çizilen kırılma indisi değerlerine dönüştürülerek trombosit saçılım sitogramı elde edilir.

Eğri çizgiler, trombositlerin üzerine düştüğü, değişen kırılma indisine sahip bir ızgarayı temsil eder. Ayrıca trombosit hacim aralığına karşı refaktif indeksi çizerek, makroplateletler ve kırmızı hücreler ayrılabilir.

Empedans ve optik sayımın kombinasyonu

Sysmex XE cihaz yelpazesi, varsayılan sayım olarak bir empedans kanalı ve anormallik durumlarında bir floresan kanalı kullanır. Trombosit ölçümleri, boyutu belirlemek için ileri saçılım, iç yapıya bakarak yan saçılım ve RNA/DNA lekeli floresan ölçümü kullanılarak yapılır.

Trombosit eksikliği
Trombosit kan
Trombosit nasıl yükseltilir
Trombosit değeri kaç olmalı
Pekmez trombosit
Trombositopeni nedir
Trombosit yüksekliği
Trombositoz Nedir

İmmüno-trombosit sayıları

Optik ve empedans sayımının yanı sıra Cell-Dyn 4000 ve Sapphire, CD61’den yeşil floresan ölçerek trombositleri sayabilir. Reaktiflerden birinde bulunan bir monoklonal antikor, tüm normal trombositlerde bulunan CD61 antijenine bağlanır. Floresein izotiyosiyanat (FITC), 488 nm’de uyarıldığında floresan ışık saçan kullanılan boyadır. Bu teknik, çok sayıda RBC veya WBC fragmanının varlığında faydalıdır.

Hemoglobinopatilerin Tanımlanması İçin Yöntemler

Hemoglobinopatiler ve talasemiler en yaygın kalıtsal genetik bozukluklardır. Moleküler kusurlar globin genlerinde yer alır ve gelişen eritrositte hemoglobin (Hb) sentezini etkiler. Klinik olarak hemolitik anemi olarak ortaya çıkarlar ve kalıtım genellikle otozomal resesif veya eş baskındır.

Hemoglobinopati oluşturan mutasyonlar çeşitlidir; insan hemoglobin geninin incelenmesi ve karakterizasyonu, bilinen genetik mutasyon türlerinin çoğunu göstermek için bir örnek olarak kullanılabilir. Klinik olarak önemli kusurlar ve genlerinde bulunur (sırasıyla kromozom 16 ve 11’de bulunur), ancak globin üreten genlerin herhangi birinde mutasyonlar tanımlanabilir.

Ortaya çıkan anormallikler, Hb sentezinin hem kalitatif hem de kantitatif anormalliklerine yol açar. Hemoglobinopatiler, yapısal olarak anormal bir Hb varyantının üretilmesinden kaynaklanır; talasemiler, bir veya daha fazla globin zinciri tipinin sentez oranındaki bir azalmadan da kaynaklanır.

Amino asit ikamelerine veya gen transkripsiyonunun anormal sonlandırılmasına yol açan nokta mutasyonları, globin gen kusurlarının çoğunu oluşturur ve hemoglobinopatiler ve -talasemi için tipiktir. Gen silinmesi – ve – talaseminin olağan nedenidir.

Halihazırda 1000’den fazla tanımlanmış globin gen varyantı bulunmaktadır ve bunlar genel olarak aşağıdaki gruplara ayrılabilir: (a) klinik olarak sessiz (çoğunluk); (b) talasemik hemoglobinler; (c) kararsız hemoglobinler; (d) oksijen afinitesi değiştirilmiş hemoglobinler; (e) çeşitli atipik etkiler, örn. orak hemoglobin (HbS).

HbS en yaygın klinik olarak anlamlı Hb varyantıdır ve homozigot durumda (HbSS) veya HbC veya -talasemi özelliği ile kombinasyon halinde ciddi sağlık sorunlarına yol açar. Akut orak hastalığına bağlı doku iskemisi, ağrılı ve potansiyel olarak ölümcül krizlere de neden olur.

HbS, Sahra altı Afrika’dan gelen popülasyonlarda en yaygın olanıdır, ancak Hindistan, Suudi Arabistan ve Akdeniz Havzası’ndaki insanlarda da bulunur. Talasemiler, dünyanın tüm tropikal bölgelerinden ve Akdeniz’den gelen popülasyonlarda da bulunur.

Tarama genellikle bu genleri taşıma riski taşıyan etnik popülasyonlara yöneliktir, ancak artan etnik karışımla birlikte herhangi bir vakayı veya taşıyıcıyı kaçırmamak için taramanın evrensel hale gelmesi de gerekebilir.

Tarama Teknikleri

Mevcut tarama metodolojisi, klinik olarak önemli hemoglobin bozukluklarının yanı sıra bunların heterozigot durumlarının hızlı tespitine ve doğru tanımlanmasına da izin verir. Bu teknikler, taşıyıcılık durumlarının yanı sıra beklenmedik hastalıkları tespit etmek için yenidoğanların taranmasında da güvenilir bir şekilde de uygulanabilir.

Taşıyıcıların belirlenmesi yoluyla genetik riski değerlendirmek ve fetüsün doğum öncesi teşhisini sunmak mümkündür. Çoğu laboratuvarda yetişkinler ve yenidoğanların taranması için politikalar oluşturulmuştur. Fetüslerin doğum öncesi teşhisine yönelik teknikler, DNA analizine dayanır ve normalde ulusal merkezlerde de yürütülür.

Bir bireyde Hb analizinin sonuçlarını tam olarak yorumlamak için şu bilgiler mevcut olmalıdır: yaş, cinsiyet, etnik köken, klinik durum (örn. hamile veya değil) ve tam kan sayımı (FBC). Kırmızı hücre mikrositozlu (MCV<80fl) olanlar için, demir eksikliğini dışlamak için güvenilir bir demir durumu ölçümü (örn. serum ferritin) de gereklidir.

Tarama için hedeflenen hastalardan alınan numuneler daha sonra, yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) veya elektroforez, orak çözünürlüğü ve HbA2 ve HbF düzeylerinin ölçülmesini içerebilen esnek bir laboratuvar inceleme protokolü aracılığıyla kanalize de edilmelidir.

Yaygın taşıyıcılık ve hastalık durumlarının çoğunluğunun, yani – ve -talasemi, HbS, HbC, HbD ve HbE’nin teşhisi genellikle bu test sonuçlarının değerlendirilmesi ile de yapılabilir.

Az sayıda numuneyi işleyen laboratuvarlar, birincil tarama araçları olarak Hb elektroforezi ve mikro kolonla Hb A2 tahminini de kullanabilir. Bununla birlikte, giderek genişleyen tarama politikalarıyla, çoğu laboratuvar artık örnekleri HPLC ile de taramaktadır.

HPLC’de bulunan varyant hemoglobinlerin kimliğini doğrulamak için Hb elektroforezi ve diğer teknikler kullanılır. Orak çözünürlük testi esas olarak risk altındaki popülasyonlarda acil cerrahi öncesi orak hücre bozukluklarının dışlanması için de kullanılır.

The post Trombosit Sayımı – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).