Bu çalışmanın son baskısından bu yana, tanısal moleküler bakteriyoloji alanında önemli gelişmeler meydana geldi. Bu tekniklerden çok azının araştırma ve referans laboratuvarından klinik bakteriyoloji laboratuvarına geçiş yaptığı hala doğru olsa da, ticari olarak temin edilebilen test kitlerinin sayısındaki artış, bunu yakın gelecekte, özellikle de nispeten yüksek maliyetli ise, belirgin bir olasılık haline getirmektedir. bu moleküler yöntemlerden biri ele alınabilir. Bazı örnekler aşağıda verilmiştir.

Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ve gen probları, klinik örneklerde Mikobakteri tüberkülozunun hızlı bir şekilde tanımlanmasında umut vaat etmektedir. Bu yavaş büyüyen organizmanın geleneksel yöntemlerle tanımlanması genellikle birkaç hafta sürer.

Benzer şekilde, genital Chlamydia trachomatis enfeksiyonunun teşhisi için PCR veya ligaz zincir reaksiyonu gibi nükleik asit amplifikasyon testleri önerilir. Dışkı örneklerinde PCR, verotoksin üreten Escherichia coli (VTEC) tarafından üretilen verotoksinleri kodlayan genleri tespit etmek için kullanılır, örn. E. coli O157.

Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae ve Haemophilus influenzae DNA’sının BOS veya tam kanda multipleks PCR ile eşzamanlı tespiti, bakteriyel menenitisin hızlı teşhisinde paha biçilmezdir. Gerçek zamanlı PCR (Roche Diagnostics, Mannheim, Almanya) kullanılarak metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) ve vankomiye dirençli Enterococcus spp olur.

Bu yöntemler, etkili antimikrobiyal kemoterapi ve enfeksiyon kontrol önlemlerinin erken başlatılmasını sağlamalı ve böylece klinik sonuçları iyileştirmelidir. Yöntemlerin daha kapsamlı bir tartışması için diğer bölümlere bakın.

Mikrobiyolojide kullanılan moleküler yöntemler
Moleküler tanı yöntemleri nelerdir
Moleküler genetik tanı yöntemleri nelerdir
Mikrobiyolojide kullanılan moleküler yöntemleri nelerdir
Moleküler Teknikler
Moleküler Biyolojide kullanılan yöntemler pdf
Moleküler mikrobiyoloji PDF
Hibridizasyon yöntemleri

Kültürü Takip Eden Kimlik

Saf Kültür

Bir bakteri tanımlamanın ilk adımı saf bir kültür oluşturmaktır. Bunun yapılmaması, gecikmiş veya yanıltıcı laboratuvar raporlarına yol açan yaygın bir hatadır.

Klinik materyal, gelişimin çoğu iyi izole edilmiş kolonilerden oluşacak şekilde birincil izolasyon besiyerine plakalanmalıdır. Bu şekilde elde edilen koloniler, iyi aydınlatma altında büyüteçli bir el merceği ile dikkatlice incelenmeli ve inceleme için tekli koloniler seçilmeli ve düz bir tel ve sabit bir el kullanılarak seçici olmayan bir ortama aktarılmalıdır.

Bu işlem, saf kültürün yeterli büyümesini sağlayamazsa, tekrarlanmalıdır. Bu aşamada atılan kısa yollar, tanımlamayı geciktirecek, reaktifleri israf edecek ve muhtemelen yanıltıcı sonuçlar doğuracak, bakteriyolog ve klinisyenin hayal kırıklığına ve ağırlaşmasına ve muhtemelen hasta için yanlış tedaviye yol açacaktır.

Seçici veya inhibe edici birincil izolasyon ortamı genellikle sonraki biyokimyasal ve diğer tanımlama tekniklerine müdahale ettiğinden, bu aşamada seçici olmayan bir ortamın kullanılması gerektiğine dikkat edin.

Kimlik Sanatı

Acemi bakteriyolog, bir düzine kadar farklı türde komensal bakteri içerebilen birincil izolasyon plakası ve hemen hemen her bakterinin hastalığa neden olabileceği bilgisiyle karşı karşıya kaldığında, emekli olmadan önce anlamlı bir rapor hazırlamaktan çaresiz kalmalıdır!

Bununla birlikte, örneklenen alan bilgisi, klinik tablo, olası patojenler ve komensal flora bilgisi ile birlikte bu plakaların incelenmesindeki deneyim, tanımlama ve duyarlılık testi gerektiren organizmalar hakkında makul ölçüde doğru bir fikir verecektir. Bu yaklaşım, bakteriyologun, patojenin hızlı bir şekilde tanımlanmasına yol açması muhtemel olan ilk test aralığını seçmesine izin verir.

Bu, en olası nedensel organizmayı doğrulayamazsa, araştırmacı açık fikirli hareket etmeli ve araştırmaları genişletmelidir. Aşamalı yöntem olarak adlandırılan bu yöntem, organizmanın birkaç temel özelliğinin oluşturulmasını gerektirir ve bunlardan organizma tanımlanana kadar tablolara göre sonraki testler seçilir.

Son olarak, her şey başarısız olursa, blunderbuss yöntemi, akla gelebilecek her testin yapıldığı ve sistematik bakteriyolojinin standart metinlerinde listelenenlerle karşılaştırıldığı yerde benimsenebilir. Bu nadiren gereklidir, ancak örneğin yeni bir türü doğrulamak için gerekli olacaktır.

Ön Tanımlama

Bakterilerin aerobik veya anaero-bisik koşullar altında büyüme yeteneği, büyüme gereksinimleri, koloni morfolojisi, besiyeri üzerindeki etkisi (örn. Kanlı agar üzerinde hemoliz), sıvı ortamda hareketlilik, spor oluşturma yeteneği ve Gram üzerinde görünüm ve reaksiyon boyama, bir ön tanımlamanın yapılmasına izin verir. Birkaç basit, hızlı testin müteakip uygulanması, tanımlamayı tamamlamak için hangi başka testlerin (varsa) gerekli olduğunu gösterecektir.

Gram boyaması

Usta bir zanaatkar gibi, yetenekli bakteriyolog kolonyal morfoloji ve Gram boyama sonuçlarına göre tanımlamayı tamamlamak için gereken araçları seçer. Bu testler, aşağıda listelenen geniş kategorilere göre gruplandırılabilir. Tanımlanacak organizmaya bağlı olarak sırayla veya aynı anda gerçekleştirilebilirler. Her gerçekleştirildiklerinde dikkatlice kontrol edilmeleri gerekir, örn. bilinen reaksiyonlara sahip kontrol suşları kullanılarak yapılır.

Enzim Tespiti

Bir bakterinin bir enzim üretme yeteneği, onu bir substrata maruz bırakarak ve ortaya çıkan ürünü saptayarak test edilir.

Yaygın testler şunlardır:

1. Katalaz testi. Katalaz üreten organizmalar, hidrojen peroksite maruz kaldıklarında 30 saniye içinde görünür kabarcıklar üretirler. Bu test, katalaz pozitif olan stafilokokları, katalaz negatif olan streptokoklardan ayırmaya yardımcı olabilir.
2. Oksidaz testi. Bu, sitokrom oksidazın varlığını test eder. Pseudomonas gibi oksidaz pozitif bakteriler, bir renk değişikliği oluşturmak için reaktif tetrametil-p-fenilendiamin dihidroklorürü oksitleyebilir. Enterobacteriaceae oksidaz negatiftir.
3. Üre testi. Bazı türler, üreyi amonyağa ayıran güçlü bir enzim üretir; bu, büyüme ortamına dahil edilen bir pH indikatörü kullanılarak bir renk değişikliği ile tespit edilebilir. Bu test, bir bağırsak kommensali olan üreaz pozitif Proteus mirabilis’i üreaz negatif Salmonella spp. ve önemli bağırsak patojenleri olan Shigella spp olur.
4. Koagülaz testi. Staphylococcus aureus, in vitro plazmayı koagüle eden bir enzime sahiptir. Diğer stafilokoklar negatiftir.
Bu liste kapsamlı değil. Birçok başka test mevcuttur ve bunlar genellikle ticari kitlere dahil edilir.

Antijen Tespiti

Spesifik antiserumlarla hücre antijenlerinin tespiti, bakteriyolojide organizmaları belirlemek ve tiplendirmek için yaygın olarak kullanılmaktadır.

The post Moleküler Yöntemler – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).