Şekil 3’te şematik olarak gösterilen basit bir çalıştırma öncesi durulama yaklaşımının, kolaylıkla uygulanabilir olduğu ve birçok endüstriyel uygulamada yeterli yeniden üretilebilirlikle sonuçlandığı gösterilmiştir.

Adım 1: Uygun bir organik çözücü (örneğin, metanol, asetonitril, vb.) İle durulayın.

Adım 2: Akan pH bölgesine bağlı olarak asit (örn.,% 10 v / v fosforik asit), su veya alkali solüsyon (örn., 0.1 M NaOH) ile durulayın.

Adım 3: Kılcal damarı arka plan elektroliti ile koşullandırın. Ayrı bir giriş flakonu kullanın (akan tampon flakonlarından) ve elektroliti yarı yarıya suyla dolu bir atık flakonuna boşaltın.

Adım 4: Durulamadan sonra, kılcal damarın her iki ucunu ve elektrotları yaklaşık 5 saniye süreyle tamamen arka plan elektroliti ile doldurulmuş iki ayrı şişeye daldırın. (Bu, yükselmelerden ve ark oluşumundan kaynaklanan akım kesintilerinden kaçınmak için potansiyel kristalin tuzu / partikülleri yıkamak için gereklidir.) Bir dizi boyunca aynı daldırma şişeleri seti kullanılır.

Adım 5: Geçiş sürelerinin tekrarlanabilirliğini daha da iyileştirmek için, bazı durumlarda bu “bekle” adımı sırasında çalışma voltajının 1 dakika süreyle uygulanması önerilir.

 Numune Enjeksiyonu

Adım 6: Numune tercihen hidrodinamik mod ile enjekte edilir, çünkü bu şekilde temsili miktarda numune çözeltisi kapiler girişe sokulur. Kılcalın çıkışı dip şişede tutulur.

Adım 7: Numune enjeksiyonundan sonra küçük bir arka plan elektroliti tıpası enjekte edilir. Kılcalın çıkışı hala daldırma şişesinde tutulur.

Ayırma Çalıştırması

Adım 8: Ayırma çalışması için arka plan elektroliti ile doldurulmuş ayrı şişe seti kullanın. Bununla birlikte, bir çalışma şişesi seti kullanılarak gerçekleştirilebilecek maksimum çalışma sayısının belirlenmesi önemlidir. Bu, dayanıklılık bölümünde daha ayrıntılı tartışılacaktır.

Kapiler

Basit olması için dünya çapında temin edilebilen uygun bir kaplamasız erimiş silis kapiler tercih edilir. Kapiler, belirtilen yöntem koşulları altında tampon kapasitesi ile birlikte dayanıklılık açısından test edilir. Joule ısıtmaya bağlı geçiş sürelerinin tekrarlanabilirlik zorluklarından kaçınmak için, geleneksel CE’de maksimum akım akışı tercihen 150 mA’nın altında tutulur.

Hedef çalışma süresi tercihen 30 dakikanın altındadır. Yukarıdaki tüm tavsiyeler dikkate alındığında, tekrarlanabilir ayırmalar ve kararlı geçiş süreleri kolayca elde edilir. Şekil 4’te görülebileceği gibi, tipik kılcal koşullandırma yaklaşımı ile karşılaştırıldığında, tekrarlanabilir sonuçlar elde edilebilir.

 Eşyalar

Nihai sonuçlarda önemli hatalara yol açabileceklerinden küçük hacimli pipetlerden kaçınılır. Benzer şekilde, volümetrik şişeler için tipik boyutlar, mümkünse 25 ile 500 ml arasında olmalıdır.

Gaz kromatografisi dedektörleri
Gaz kromatografisi kolon çeşitleri
Gaz kromatografisi fiyat
Gaz kromatografisi nasıl yapılır
Gaz kromatografisi pdf
Gaz kromatografisi kısımları
Gaz kromatografisi Cihazı
Gaz kromatografisi kolonları

Numune Hazırlama

Diğer kromatografik teknikler için doğru olduğu gibi, DS’nin ana bileşik yöntemlerinin analizinde 1, referans standardı ve numune malzemesi W100mg tartılır. Saflık ve DP analiz yöntemleri için referans standardı ve numune malzemesi W50mg tartılır.

Enantiyomer konsantrasyonunun normalize edilmiş% alanlar olarak belirlendiği kiral yöntemlerde, hedeflenen belirli bir minimum miktar yoktur. Bununla birlikte, mümkün olduğu durumlarda, 25 mg’dan daha ağır olmak için çaba gösterilmelidir. DP analizi için, numune çözeltilerinin hazırlanmasında en az 20 katı ünite kullanılır.

Alternatif olarak, numune, en az 20 katı birimlik bir öğütülmüş alikot alınarak hazırlanabilir. Örnek hazırlama sırasındaki manipülasyon adımlarının sayısı minimumda tutulmalıdır. Seri dilüsyonlara göre paralel seyreltmeler tercih edilir (seyreltmeler, en düşük seyreltme adımı sayısına sahip ilk stok çözeltilerinden doğrudan yapılır).

Düşük seviyede ve iyi pik şeklinde yeterli tespiti sağlayan optimal numune seyrelticiyi seçmek için pH’ın, organik çözücü tipinin, organik çözücü yüzdesinin, katkı maddelerinin (siklodekstrin, yüzey aktif maddeler, vb.), Enjeksiyon hacminin etkisini araştırın.  

YÖNTEM GELİŞTİRME VE OPTİMİZASYON

Yöntem geliştirme ve optimizasyon, şirket içinde veya literatürde halihazırda mevcut olan yöntemlerin gözden geçirilmesi ile başlatılır. Mevcut yöntemler bir başlangıç ​​noktası olarak kullanılır ve yöntem tanımında belirlenen yöntem gereksinimlerine göre değerlendirilir.

Gerektiğinde, gereksinimleri karşılamak için yöntem optimize edilir veya yeniden geliştirilir. DOE araçları (yanıt yüzeyi tasarımı), dayanıklılık açısından en iyi optimum koşulları elde etmek için tercihli olarak uygulanır. DOE metodolojisinin uygulanması kromatografide yeni değildir. 9,10 ve CE.11,12 DOE, CE.13216’daki enantiyomerik ayırmalar için de sıklıkla uygulanmaktadır.

Özellikle kiral uygulamalar için ayırma yöntemlerinin geliştirilmesi ve optimizasyonunda DOE yaklaşımlarının çok faydalı olduğu görülmüştür. CE ile şiral ayırmalarda, tampon elektrolite şiral bir seçici eklenir. Bu seçici, ilgilenilen bileşikle stereoya özgü bir kompleks oluşturur ve potansiyel bir ayrıma yol açar (Şekil 5).

Bir ayırma için doğru kiral seçiciyi bulmak kolay değildir. Bu nedenle, potansiyel olarak uygun birçok kiral seçicinin verimli bir şekilde taranmasını kolaylaştırmak için birçok strateji geliştirilmiştir.13 Son zamanlarda, DOE metodolojisini kullanan geniş ölçüde uygulanabilir15 basit, doğrudan, hızlı ve verimli bir tarama yaklaşımı bildirilmiştir.

Bu yaklaşım ilk olarak optimum göç koşullarını belirlemek için pH’ın bir tarama işlevini ve ardından Taguchi tasarımları aracılığıyla doğru kiral seçicinin bir seçimini içerir. Bu yaklaşımda, siklodekstrinin türü ve konsantrasyonu, tampon elektrolit konsantrasyonu ve organik modifiye edici yüzdesi gibi birkaç değişken, ilk ayırma koşullarını hızlı bir şekilde bulmak için aynı anda değiştirilir.

Tarama yaklaşımını uygulayarak ilk ayırma koşullarını elde ettikten sonra, stratejiye seçilen sistemin daha fazla optimizasyonu ile devam edilir. En uygun ve sağlam ayırma koşullarını seçmek için bu optimizasyonun bir yanıt yüzey tasarımı16 kullanılarak yapılması şiddetle tavsiye edilir.

Dahası, CE’deki ayrılma, herhangi bir destekleyici ortam olmaksızın açık bir tüpteki (kapiler) çözelti içinde ortaya çıktığı için daha da böyledir. Ayırmayı etkileyen birçok parametreden birindeki herhangi bir değişiklik, yöntemin sonucunu tehlikeye atabilir. Optimumun (yerel optimum) sağlamlığını bilmeden yöntemler geliştirildiğinde, rutin analiz sırasında öngörülemeyen sorunlar ve sorunlar ortaya çıkabilir.

The post  Numune Enjeksiyonu – Farmasötik Analiz İçin Kapiller Elektroforez Yöntemleri – Ayırma Teknolojisi –FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).