Islak Fiksasyon

Islak fiksasyon, protoplazmayı kurutur ve proteini, genellikle daldırma veya kaplama yoluyla alkol bazlı bir sıvı kullanarak koagüle eder. Bu tür bir sabitleme, son preparasyonda bir derece hücre küçülmesine neden olur. Carnoy sıvısı seçici olarak eritrositleri parçalamaktadır ve ağır kan lekeli örneklerde yardımcı olabilir. Diğer fiksatifler, ör. glutaraldehit veya formalin, belirli koşullar altında tercih edilebilir. Alkol içerisindeki polietilen glikol, posta gönderimi için koruyucu bir mumsu kaplama sağlar ve sonraki boyamadan önce iyice çıkarılmalıdır.

Hava ile Kurutma

Havayla kurutma, hızlı olması gereken buharlaşmaya dayanır ve en iyi şekilde pasif olmaktan ziyade slayt üzerindeki zorla hava hareketi ile kolaylaştırılır. Bu yöntem, ıslak sabitlemeye kıyasla hücreleri görünür bir genişleme ile düzleştirme eğilimindedir. Hava ile kurutulmuş preparatlar, çapraz enfeksiyon tehlikelerini önlemek için kurutulduktan sonra neredeyse her zaman metanol içinde sonradan sabitlenir.

İnce iğne aspirasyonunu takiben kist sıvısı veya iğne yıkamaları gibi materyaller taşıma ortamında alınabilir. Herhangi bir taze biyolojik numunenin laboratuvar personeli için potansiyel bir biyolojik tehlike oluşturduğu unutulmamalıdır ve önerilen sağlık ve güvenlik önlemlerine her zaman uyulmalıdır.

İntraoperatif konsültasyon Nedir
Fiksasyon Nedir
Perfüzyon fiksasyonu nedir
Fiksasyon yöntemleri nelerdir
Dokuların fiksasyonu
Fiksasyon Nedir Patoloji
Fiksasyon çeşitleri nelerdir
Fiksasyon nasıl yapılır

Hücre konsantrasyon teknikleri

Santrifüjleme

Bu yöntem, seröz efüzyonlar, idrar veya tuzlu lavaj numuneleri gibi hacimli örnekler için uygundur.

Sitosantrifüj

Bu, hücrelerin lokalize bir tek tabakasını oluşturmak için doğrudan mikroskop slaytları üzerine döndürülen küçük sıvı alikotlarını kullanır. Düşük hacimli mütevazı hücresel örnekler için uygundur. Bununla birlikte, bazı materyaller kaçınılmaz olarak filtre kartında kaybolur. Viscid veya hücresel örnekler uygun değildir.

Membran filtrasyonu

Pozitif basınç veya vakumlu filtrasyon, önceden belirlenmiş gözenek boyutuna sahip çeşitli filtre türleri, örn. selüloz asetat veya polikarbonat. Çok çeşitli geniş hacimli veya hiposelüler sıvı örnekleri için uygundur ve santrifüjleme yöntemlerine göre daha fazla hücre yakalama sağlayabilir.

Hücre bloğu hazırlama

Hücreler doku benzeri bir durumda kümelenerek, geleneksel histoloji ile karşılaştırılabilir kesitlerin kesilmesini sağlar. Yöntemler arasında plazma kullanan plazma trombin pıhtısı ve sıcak agar ile agar hücre bloğu bulunur. Çoğu hücre süspansiyonu için uygundurlar ve immünositokimya dahil özel boyamaya izin verirler.

Sıvı bazlı sitoloji

Yukarıdaki sitoloji örneklerinin işlenmesi ve hazırlanmasına ilişkin tekniklerin iyileştirilmesi, uzun bir süre boyunca kademeli olarak yapılmıştır. Bununla birlikte, son yıllarda artan beklenti, özellikle en son teknolojik gelişmelerden yararlanmanın yollarını arayarak, geleneksel metodolojinin birçok yönünün eleştirel olarak yeniden incelenmesine yol açmıştır.

Sıvı bazlı sitoloji, bir tarama ve tanı yöntemi olarak sitolojinin duyarlılığını ve özgüllüğünü artırma arzusundan gelişmiştir. Üreticiye özel kılavuz, yarı otomatik veya tam otomatik protokollere dayanan bir dizi özel sistem şu anda mevcuttur.

Bununla birlikte, slaydın daha küçük bir alanını kaplayan homojen, daha temiz, daha düz bir numune üretmek amacıyla çalışma prensipleri büyük ölçüde benzerdir. Bu, tatmin edici olmayan örneklerin sıklığında eşlik eden bir azalma ile daha kolay ve daha hızlı taramayı kolaylaştırır. Teknoloji, hem jinekolojik hem de jinekolojik olmayan uygulamalara başarıyla uyarlanıyor.

Örnekler genellikle olağan şekilde toplanır ve bir hücre süspansiyonu oluşturmak için belirtilen taşıma veya koruma sıvısına aktarılır. Bazı sistemler, sıvıya parçalanan patentli fırçalar veya süpürgeler kullanır, böylece tüm numunenin yakalanmasını sağlarken, diğerleri hedef hücre popülasyonunu toplamak için bir durulama prosedürü kullanır.

Laboratuvarda materyal daha sonra kanı, enflamatuar ve proteinli eksüdayı uzaklaştırmak için işlenir. Süspansiyonun bir bölümü nihayetinde ince, homojen bir tabaka olarak bir cam slayt üzerine bırakılır.

Eşit dağılım, iyi hücre koruması, tutarlı hücre boyaması, gelişmiş mikroskobik ayrıntı ve artefaktlardaki azalma, geleneksel tekniklerle hazırlanan yaymalarla olumlu bir şekilde karşılaştırılır. Herhangi bir hücre sayfası ve grup daha küçük olma eğilimindedir ve arka plan öğeleri tarafından daha az şaşırtılır.

ThinPrep (Cytyc Corporation) yöntemi, bir filtre ile kaplı açık, tek kullanımlık bir plastik tüp etrafında ortalanır. Örnek, metanol bazlı bir ortamda toplanır ve santrifüjlenir. Hücre peletinden alınan bir numune daha sonra metanol bazlı bir koruyucu sıvıya aktarılır.

Hazırlamanın diğer üç ana aşaması vardır: birincisi, makine filtre tüpünü hücre süspansiyonu şişesine yerleştirir ve mukusu ve herhangi bir hücre kümesini dağıtmak için onu çalkalayarak hücre dispersiyonu; ikinci olarak, hafif bir vakum darbesinin, üzerine bir hücresel malzeme tabakasının bırakıldığı filtreden tüpe sıvı çekildiği hücre toplama.

Bazı kan, enflamatuar hücreler ve hücresel kalıntılar filtreden geçebilir ve hücre yakalanmasını optimize etmek için sıvı akışı izlenir; üçüncü olarak, filtre tüpü ters çevrildiğinde ve elektrostatik olarak yüklü bir kızağa hafifçe bastırıldığında hücre transferi.

Slayt hemen fiksatife daldırılır ve ardından manuel veya makine ile sonraki boyama için hazırdır. Tüm prosedür, 30 dakikanın altında nispeten hızlıdır ve çok az teknisyen zamanı gerektirir. Hücre birikim alanı 1.9 cm çapındadır ve 100.000 hücre mertebesinde içerir.

SurePath Prep (TriPath Imaging Inc.) yöntemi, örneğin etanol bazlı bir ortamda toplanmasıyla başlar. Laboratuvarda, flakon hücreleri dağıtmak için vortekslenir ve süspansiyon, yoğunluk gradyan santrifüjü yoluyla hücre zenginleştirme aşamasından geçer.

Bu aynı zamanda kan ve diğer kirletici kalıntıları da giderir. Süpernatan sıvı çıkarılır, hücre pelleti yeniden süspanse edilir ve ikinci kez santrifüjlenir. Hücre peletinin bir alikotu daha sonra robotik olarak bir çökeltme odasına aktarılır; burada hücrelerin, poli-L-lizin kaplı bir mikroskop lamı üzerinde ince bir tabaka oluşturmak için yerçekimi altında yatmasına izin verilir.

Makine daha sonra slaytları otomatik olarak boyar. Bu işlem yaklaşık 60 dakika sürer ve bir dereceye kadar manuel müdahale gerektirir. Dairesel çökeltinin çapı yaklaşık 1.3 cm’dir ve yaklaşık 100.000 hücre içerir.

The post Islak Fiksasyon – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).