Bağları serbest analit veya antikordan ayırmak için kullanılan herhangi bir teknik, birincil reaksiyonu bozmamalıdır. Serbest ve antikora bağlı analit arasındaki moleküler boyuttaki fark, amonyum sülfat veya polietilen glikol ile protein çökeltme ve serbest analitin odun kömürü ile adsorpsiyonu gibi erken sistemlerde kullanılmıştır.

Bir anti-tür antikorunun kullanımı yoluyla immünolojik ayırmanın çok daha güvenilir olduğu kanıtlandı. Örneğin, antikorlar bi- veya multivalan olduğundan, birincil antikor bir tavşanda yetiştirildiyse, bir eşekte yetiştirilen tavşan immünoglobulinlerine yönelik antikorlar, bir çökelti oluşturmak için yeterince büyük ve çözünmeyen tavşan immünoglobulinleri ile kompleksler üretecektir.

Çökeltmeyi sağlamak için genellikle aşılanmamış bir tavşandan alınan bazı serum veya immünoglobulinler (taşıyıcı serum) eklenir. Bu tür reaktifler genel uygulanabilirliğe sahiptir. Bu ayırma sistemine (örneğin eşek anti-tavşan) ‘ikinci antikor’ denir ve bunu kullanan tahlillere çift antikor yöntemleri denir, ancak bu isim bazen iki bölgeli bir tahlil anlamında da kullanılır.

İkinci antikor çökeltisinin oluşumu yavaştır, tahliller genellikle gece boyunca bırakılır, ancak bu aşama polietilen glikol ilavesiyle önemli ölçüde kısaltılabilir. Santrifüjlemeden sonra, süpernatan aspirasyon veya dekantasyon yoluyla çıkarılır, üretilen çok küçük çökeltilerle ilgili beceri ve deneyim gerektiren prosedürler.

Katı Faz Ayırma Yöntemleri

Diğer tüm yöntemlerin yerini büyük ölçüde alan bu teknikler, reaktiflerin katı fazlara kovalent bağlama veya absorpsiyon yoluyla bağlanmasını içerir. Katı faz, plastik bir tüpün duvarı, bir mikrotitre plakasının kuyusu veya büyük boncukların veya küçük parçacıkların yüzeyi olabilir. Mıknatıslanabilir bir çekirdeğe sahip parçacıklar, olağanüstü hızlı ve verimli ayırma sunar.

Ayırma, sıvı fazın basit ve uygun bir şekilde boşaltılması veya aspirasyonu ile yapılır, ardından ayırmanın tam olmasını sağlamak ve spesifik olmayan bağlanmayı (antikorun yokluğunda görünen bağlanmayı) azaltmak için genellikle katı fazın tamponla yıkanması takip eder.

İki veya daha fazla analitin eşzamanlı tahlili, ayrı ölçüm için tahlilin son aşamasında antikor kaplı boncukların karışımlarını analite özgü renk kodlu setlere ayırabilen enstrümantasyon ile artık mümkündür. Böyle bir sistem, örneğin, neonatal tarama için tek bir Guthrie noktasında birden fazla analitin immünoanalizine izin verecektir.

Katı faz, ikinci antikor veya streptavidin ile kaplanarak yapılan çok amaçlı bir reaktif olabilir; spesifik bir reaktif, streptavidin için çok yüksek bir afiniteye sahip olan biotin ile birleştirilir. Diğer çiftler, anti-floresan içeren floresan içerir.

Bu teknik, sıvı fazda spesifik reaksiyonların meydana gelmesi gibi ek bir avantaja sahiptir. Bir katı faza bağlanma, bir antikorun afinitesini ve reaksiyon hızını azaltır ve diğer özellikleri değiştirebilir.

Katı faz teknikleri, aynı zamanda, numuneye tüm reaktiflerin aynı anda eklenmesinin temel biçiminden tahlil protokolünün varyasyonlarına da izin verir. Bu tür varyasyonlar artan özgüllük ve diğer iyileştirmelerle sonuçlanabilir. Kağıt şeritler üzerinde hareketsiz hale getirilen reaktifler, seviye çubuğu testlerinin temelini oluşturur, örn. hamilelik testi için. Diğer tek kullanımlık bakım noktası immünoassay cihazları, kardiyak belirteçler ve ilaçlar için testleri içerir.

karışımları ayırma yöntemleri 10. sınıf
karışımları ayırma yöntemleri 4. sınıf
karışımları ayırma yöntemleri 7. sınıf
Mıknatısla ayırma yöntemi
Karışımları ayırma yöntemleri
Bileşikleri ayırma yöntemleri
karışımları ayırma yöntemleri 10. sınıf proje ödevi
Analitik ayırma yöntemleri

Otomasyon

Bağışıklık tahlillerinin otomasyonu, çoğu yöntemde bağlı ve serbest etiketin ayrılması gerekliliği nedeniyle teknik olarak çok talepkardır. İlk cihazlar, sınırlı sayıda analit için genellikle homojen bir test olan tek bir test formatı kullanan toplu analiz cihazlarıydı.

1980’lerin sonundan itibaren mevcut olan yüksek verimli, tamamen otomatik sistemler, toplu analizörler olabilir veya her iki cihazın yüksek düzeyde stabilitesinden elde edilen seyrek kalibrasyonla (genellikle haftalar veya aylar arasında) rastgele erişim sunabilir ve reaktifler.

Rastgele erişim, nadiren talep edilen testler için bile numuneleri gruplama ihtiyacını ortadan kaldırır ve kısa geri dönüş süreleri sağlar. Farklı test formatları, ancak ortak bir ölçüm sistemi ile tek bir cihaza dahil edilebilir.

Hassas zamanlama, denge için inkübasyon olmaksızın kısa reaksiyon sürelerine izin verir. Hassasiyet her zaman manuel testlerden daha iyi olmalıdır, ancak farklı cihaz türleri arasında önemli ölçüde farklılık gösterir. Doğal dezavantajlar karmaşıklık ve esnekliktir.

Minyatürleştirme

Diğer disiplinlerdeki gelişmeler, immünoassay cihazlarının minyatürleştirilmesine izin vermiştir. 96 kuyulu mikrotitre plakası, çok küçük hacimlerde numune ve reaktifler için özel sıvı işleme sistemleri gerektiren, bu sayının birçok katına sahip yüksek yoğunluklu plakalar tarafından takip edilebilir.

İlaç veya tümör belirteç taramasında olduğu gibi, çok sayıda hastanın aynı test setlerine ihtiyaç duyduğu tıp alanlarında özellikle ilgi çekici olan, mikrodizileri kullanan sistemlerin geliştirilmesidir.

Böyle bir mikrodizi, inert bir destek üzerinde basılmış veya başka bir şekilde oluşturulmuş reaktifin çok sayıda ayrı mikro noktasından oluşur (örneğin, 1 1 cm’lik bir substrat veya çip üzerinde 5 5’lik bir nokta dizisi veya standart bir mikrotitrenin her kuyucuğundaki 8 8 dizisi tabak).

İmmünolojik test için, hareketsizleştirilmiş reaktif genellikle spesifik bir antikor olacaktır ve her bir mikro nokta farklı bir antikor olabilir, bu da birkaç analitin aynı anda tahmin edilmesine izin verir.

Örnek ve diğer spesifik reaktiflerin bir karışımı ile inkübasyon ve immünolojik test prosedürünün geri kalanı olağan şekilde gerçekleştirilir ve sinyal (genellikle floresan veya kemilüminesans) bir kamera cihazı tarafından algılanır veya görüntülenir.

Dizideki bazı mikro noktalar, örnekteki parazitleri tespit etmek için tasarlanabilir, örn. heterofilik antikorlar ve reaktiflerin kalite kontrolünü sağlamak için, daha basit sistemlerde kolayca elde edilemeyen bir kalite denetimi seviyesi. Bu cihazlar, geleneksel otomatik sistemlere kıyasla önemli miktarda numune, reaktif ve zaman tasarrufu sağlar.

Gelecekte, numune hazırlamadan sinyal algılamaya kadar tüm adımları gerçekleştirebilen mikrofabrikasyon yapıları içeren tam entegre immünolojik test mikroçipleri kullanılabilir hale gelebilir. Mikroçip bağışıklık tahlilindeki başarıların bir açıklaması için ve genel olarak minyatürleştirmedeki gelişmelerin bir literatür araştırması içindir.

The post Ayırma Yöntemleri – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).