Serumda rutin olarak ölçülen enzimlerin çoğu, her biri vücutta farklı bir organ sistemi tarafından üretilebilen bir izoenzim karışımı olarak bulunur; serumdaki kreatin kinaz (CK), CK-MM (iskelet kasından), CK-MB (ağırlıklı olarak kalpten) ve CK-BB (beyinden) karışımıdır.

Elektroforez, yükselmiş toplam CK’nın nedeninin kalp veya iskelet kası hasarı olup olmadığını ayırt edebilir. Ayırma, CK tarafından etkilendiğinde UV ışığı altında görülebilen bir floresan bileşik üreten enzime sentetik bir substrat ile kaplanmış agar jelleri kullanılarak gerçekleştirilir.

Kardiyak spesifik troponinlerin ölçümü birçok laboratuvarda CK-MB ölçümlerinin yerini büyük ölçüde almış olsa da, elektroforez makro-CK komplekslerinin varlığını tespit edebilen tek yöntem olmaya devam etmektedir. Elektroforez ayrıca alkalin fosfatazı karaciğer, kemik, plasental ve bağırsak formlarına ayırmak ve laktat dehidrojenazın izoenzimlerinin modelini belirlemek için kullanılır.

Hemoglobin

Hemoglobin varyantlarının tanımlanması için HPLC yöntemlerinin yakın zamanda tanıtılmasına kadar, amino asit ikamelerinin neden olduğu hemoglobin molekülü üzerindeki farklı toplam yüke dayanan elektroforetik yöntemler yaygın olarak kullanılıyordu.

Selüloz asetat normalde tarama yöntemleri için destek ortamıydı ve taramada görülen herhangi bir anormal varyantın pozitif olarak tanımlanması için sitrat agar jel elektroforezi kullanıldı. Hemoglobin varyantlarının sitrat jel elektroforezi ile ayrılması, ikame edilmiş amino asitlerin agaropektin ile etkileşimlerine dayanır.

Yüzeye yakın ikameleri olan bu varyant hemoglobinler, örn. HbS ve HbC korunurken, HbD ve HbG gibi daha derin ikamelere sahip olanlar korunmaz. Nadir hemoglobinopatileri tanımlamak için karmaşık elektroforez veya izoelektrik odaklama kombinasyonları gereklidir.

türkiye’nin en iyi alerji doktoru
Alerji ve İmmünoloji Bölümü olan Hastaneler
İmmünoloji ve Alerji Hastalıkları randevu
Medical Park alerji testi fiyatı
hacettepe. alerji ve immünoloji doktorları
İmmünoloji ve Alerji Hastalıkları
Non immünolojik nedir
Medicana alerji testi Fiyatı

PCR’yi takip eden DNA parçaları

Bu bölümün kapsamı dışında olmakla birlikte, şu anda klinik laboratuvara tanıtılan moleküler tekniklerin çoğunun, PCR’yi takiben DNA’nın restriksiyon parçalarının elektroforetik olarak ayrılmasını ve restriksiyon enzimleri ile muameleyi içerdiğini hatırlamakta fayda var.

Agar jel, moleküler biyolojideki uygulamaların büyük çoğunluğunda radyo-etiketleme veya etidyum bromür ile boyama yoluyla görselleştirme ile kullanılan destek ortamıdır. Bu tür tekniklerin kullanımına bir örnek, HFE genindeki genetik hemokromatoz ile ilişkili iki mutasyonun saptanmasıdır: C282Y ve H63D.

Kapiler elektroforez (CE)

Dar bir kılcal damarda elektroforez ilk olarak 1937’de tanımlanmış olmasına rağmen, tekniğin kendine gelmesi ancak 1985’ten beri olmuştur. 25–100″ m çapında ve 25–100 cm uzunluğunda, uçları elektrotları da içeren tampon şişelere yerleştirilen kapilerler kullanılır. Elektroendosmotik akışı üretmek için çok yüksek voltajlar (10–30 kV) uygulanır. Kılcal damar içinde Kılcal damarı dolduran tamponun tipi, pH’ı ve iyonik gücü, istenen ayrımın elde edilmesi için kritik öneme sahiptir.

Kapiler elektroforez ile ayırmanın dört ana modu vardır: kapiler bölge elektroforezi (CZE) veya serbest çözelti ayırma; misel elektrokinetik kapiler kromatografi (MECC); kılcal izoelektrik odaklama (CIEF) ve kılcal izotakoforez.

Bu farklı ayırma modlarının ilkeleri ve laboratuvar tıbbındaki potansiyel uygulamalar yakın zamanda gözden geçirilmiştir. Serum protein elektroforezi için CE kullanan ticari bir alet geliştirilmiştir.

Bu, yüksek verim elde etmek için bir dizi kılcal damarı paralel olarak kullanır ve immüno-çıkarma tekniği kullanılarak paraproteinlerin tanımlanmasını içerir. CE, İnsan Genom Projesinde baskın metodoloji haline geldi ve mevcut nesil tezgah üstü DNA dizileyicilerinin temeli oldu.

İMMÜNOLOJİ

Protein tahlilleri

Protein analizi için kalitatif ve kantitatif teknikler, görevi kan ve diğer vücut sıvılarındaki bazı proteinlerin analizini içeren rutin immünoloji laboratuvarında temel araçlardır. Spesifik olarak, immünologların büyük ilgi gösterdiği proteinler arasında immünoglobulinler (antikorlar), kompleman sisteminin proteinleri ve en son olarak immün sistemde rolü olan sitokinler bulunur.

Bu bölümün amacı, rutin protein analizi için kullanılan yöntemlerin ilkelerini kısaca açıklamaktır. Tanımlanan yöntemlerden bazıları kompleman sisteminin proteinlerinin incelenmesi için kullanılsa da, bu sistemin doğası doğru yorumlama için özel değerlendirmeler gerektirir.

Bu nedenle, tamamlayıcı proteinler için testler Bölüm 46’da ayrıntılı olarak açıklanmaktadır. Benzer şekilde, otoimmün antikorlar için testler, immün kompleks hastalığı ve kriyoglobulinler ile ilgili bölümde ele alınmaktadır.

Rutin laboratuvarın temel amacı, aşağıdakilerin miktarını tespit etmek, karakterize etmek ve ölçmektir:

1. İmmünoglobulin eksikliği gibi spesifik proteinlerin eksiklikleri.
2. Anormal veya uygun olmayan protein ekspresyonu, örn. monoklonal gamopatilerde, otoimmün hastalıkta veya atopide.

Proteinlerin analizine yönelik yöntemler, çeşitli ilkelere dayanır.

Bununla birlikte, bu bölümde açıklananlar gibi rutin analizlerin çoğu için gerçekten sadece iki temel özellik kullanılmaktadır:

1. Bireysel proteinlerin karakteristik bir elektrik yükü vardır, bu da farklı spesifik proteinlerin elektroforez ile ayrılabileceği anlamına gelir.
2. Her spesifik insan proteininin kendine özgü bir yapısı vardır ve bu, o proteine ​​karşı antikorlar, hayvanları bu insan proteini ile immünize ederek poliklonal antikorlar veya hibridoma teknolojisi ile monoklonal antikorlar üretmek için kullanılabilir. Bir proteine ​​özgü antikorlar, bağışıklık tahlillerinin temelidir.

Uygun bir tahlil yönteminin seçimi, nitel veya nicel bir sonucun gerekli olup olmadığına bağlı olacaktır. Ayrıca, ilgili proteinin konsantrasyonu, test seçimi için çok önemli olacaktır, örn. BOS ve idrarda oligoklonal ve monoklonal immünoglobulinlerin tespiti veya ölçümü, numune konsantrasyonu veya serum numuneleri için gerekenden daha hassas bir yöntem seçimi gerektirebilir.

Kısa bir tarihsel perspektif

Elektroforez ilkeleri, bir elektrik yükündeki molekülleri ayırma yöntemi, 1930’da İsveçli Arne Tiselius, kan proteinlerinin karmaşık yapısından şüphelenerek, bir sıvı içinde serumun elektroforezi ile deneyler yapmaya başladığında bir süredir biliniyordu. sıvı tampon ortamı.

1937’de serumun elektroforezinden sonra görülebilen birkaç ayrı protein bölgesi tanımladı; bunlara albümin, -globulin, -globulin ve -globulin, anoda doğru en hızlı hareketliliğe sahip albümin ve en yavaş -globulin adını verdi.

Bu temel isimlendirme bugün hala kullanılmaktadır. 1950’lerde kağıt destek ortamı olarak kullanılmaya başlandı, daha sonraki yıllarda agar, agaroz ve poliakrilamid gibi selüloz asetat ve jellerin kullanımı izledi. Günümüzde sıvı faz elektroforezi rutin testler için yeniden kullanılmaya başlanmıştır.

The post İMMÜNOLOJİ – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri first appeared on Online (Parayla Ödev Yaptırma).